简介:摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因,探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象,设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA,sgRNA),将其克隆入CRISPR/Cas9质粒,并应用其将E6、E7基因敲除,随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果,并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒,经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后,可以引发靶点DNA的突变,致使E6和E7基因密码子改变,无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验,pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比,P=0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比,P=0.0007),促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复,细胞的恶性度降低。
简介:首先论述了在MPC8349E平台引入CRAMFS+JFFS2两种文件系统的必要性,然后介绍了两种嵌入式文件系统开发工具LTIB和BusyBox,通过这两种工具的配合使用,提供了一种嵌入式Linux文件系统CRAMFS+JFFS2的设计方案,并基于此方案实现LED控制程序的自启动,最后验证了该嵌入式文件系统的运行状况。
简介:Objective:ToinvestigatetheexpressionofE2FandBcl-2andtheclinicopathologicalsignificanceinhepatocellularcarcinoma.Methods:TheexpressionsofE2F-3andBcl-2in74patientswithhepaticcarcinoma,paracarcinomaand15patientswithlivercirrhosisweredetectedbyS-Pimmunohistochemicalstaining.Results:TheexpressionofE2Finhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinomaorlivercirrhosis(P<0.005),theexpressionofBcl-2inhepaticcarcinomawassignificantlyhigherthanthatinparacarcinoma(P<0.005),inwhichBcl-2expressionwaslowerthaninlivercirrhosis(P<0.05).TheexpressionofE2F-3wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsize,andtheexpressionofBcl-2wasrelatedwithhistologicalgrade,tumorsizeandtumornumber.TherewascorrelationbetweentheexpressionofE2F-3andBcl-2inhepaticcarcinoma.Conclusion:E2F-3andBcl-2expressionmayplayanimportantroleindevelopment,progressionandcellapoptosisoftumor.
简介:上期讲到,小雄他们穿过暗道来到了一个大厅,大厅里的景象让众人目瞪口呆!这时,一向不讨人喜欢的西单不知被什么东西叮了一下,便神色恍惚地离开了众人……
简介:ApplicationofcertaintyfactorsofearthquakeprecursoryanomalyevidencesCF(E)ZHAO-BIZHENG(郑兆),JUNZHANG(张军)andMEIQING(庆梅)Seismolo...
简介:壁咚释义:时下热门的'告白高招'。溯源:壁咚是日本传过来的流行词语,时常出现在少女漫画、动画以及日剧当中。壁咚指男性把女性逼到墙边,单手或者靠在墙上发出'咚'的一声,让女生完全无处可逃的动作。而后,经过偶像剧演绎,又出现了'胸咚''指咚'。