简介:摘要目的构建斑马鱼脑出血模型,并以此筛选诱导斑马鱼脑出血的相关基因。方法通过吗啉代寡核苷酸(MO)技术和单细胞显微注射技术构建斑马鱼脑出血模型,并从宏观、微观角度多重验证。首先,造模实验采用注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼作为对照组,实验组在AB斑马鱼胚胎单细胞时期分别注射神经嵴源性细胞(NCDCs)发育相关基因的MO,包括col8a1 MO、tfap2α MO、msx1a MO、msx2 MO、dkk1a MO等,于显微镜白光视野下初步验证模型。其次,采用Tg(flk1:GFP;gata1:dsRed)双转基因斑马鱼进行模型验证,该转基因鱼用绿色荧光蛋白(GFP)标记血管内皮细胞,用红色荧光蛋白(dsRed)标记血红细胞,能够更清晰地观察到斑马鱼脑出血的部位。在斑马鱼胚胎单细胞时期注射Control MO 作为对照组,注射col8a1 MO作为实验组,正常培养至受精后48 h通过激光共聚焦观察红细胞渗漏情况,构建荧光视野可观察的脑出血模型。最后,采用Tg(flk1:GFP)转基因斑马鱼进行基于血脑屏障的模型验证,通过Dextran-Rhodamin和DAPI染料的渗漏现象进一步明确斑马鱼血脑屏障的破坏与脑出血的发生,并进行定量统计,从而验证NCDCs发育相关基因与脑出血表型的关系,证明造模有效。结果与注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼对照组相比,col8a1、tfap2α和msx1基因突变的实验组斑马鱼有明显的脑出血现象,出血比例分别为18.18%(52/286)、23.04%(62/251)、35.94%(23/64),而msx2和dkk1a基因突变的斑马鱼极少观察到脑出血,出血比例仅分别为1.03%(1/97)和1.15%(1/87)。注射Control MO与col8a1 MO的Tg(flk1:GFP;gata1:dsRed)双转基因斑马鱼红细胞渗漏发生率分别为0.37%(1/273)与18.18%(52/286)(P<0.001)。注射Control MO与col8a1 MO组Tg(flk1:GFP)转基因斑马鱼DAPI阳性的细胞核数分别为(10.05±5.27)个与(60.35±3.96)个(P<0.001);Dextran-Rhodamin染料渗漏引起的中脑实质荧光示踪强度值分别为2.54±4.70与5.13±3.52(P<0.001),两组比较差异有统计学意义。结论本研究成功构建了斑马鱼脑出血模型,并筛选出col8a1、tfap2α、msx1等诱导斑马鱼脑出血的相关基因。
简介: 摘要:鱼书不至雁无凭,的确,许久不曾见到大雁了,即使在梦里。忙啊忙,所以久疏亲墨,而泛滥的数字文化亦令我不知CP是否还设有这项最为传统的业务。但是我知道,缺少了鱼书的互通,即使是旁系亲属之间,淡漠的脚步声也就快要真真儿了。
简介:摘要:随着建筑行业飞速发展,工程建设项目投入越来越大,项目规模也越来越大,工程实施前,需要编制施工总进度计划,施工总进度计划作为工程的进度规划,可为工程施工人力、物资、机械、资金等计划提供参照。编制施工进度计划的软件很多,常见的有excel、project、斑马•梦龙,个人认为利用斑马•梦龙软件编制施工进度计划,既高效又实用,值得推广,下面谈谈如何利用斑马•梦龙软件编制施工总进度计划。
简介:摘要目的探讨尿管管腔内置斑马导丝对导尿困难患者的治疗效果观察研究。方法收集2017年至2021年9月粤北人民医院住院部、门诊、急诊常规导尿困难患者共69例,其中男67例,女2例,年龄55~81岁。其中前列腺增生常规导尿困难患者50例,前尿道狭窄7例,后尿道狭窄3例,后尿道结石2例,女性尿道狭窄2例,包茎引起的尿道外口狭窄2例,尿道损伤2例,阴茎癌导尿困难1例。均采用尿管管腔内置斑马导丝导尿。结果2例前列腺增生患者常规留置导尿困难改行耻骨上膀胱穿刺造瘘术,其余均通过尿管管腔内置斑马导丝导尿成功,成功率97.1%(67/69)。结论尿管管腔内置斑马导丝可以明显提高导尿困难患者的留置尿管成功率,是一种安全有效、简单、经济的方法。
简介:摘要:社会发展进程的加快,对于生态环境的应用程度增加,环境破坏与污染的程度也会逐渐加剧,对渔业而言,环境的破坏会导致养殖资源的匮乏,但是养殖户为了满足市场的庞大需求会选择放养的密度,并且增加一定的肥料,这类做法导致生态环境的污染进入恶性循环的状态,对渔业的长久性发展造成不利影响,鱼菜共生是一项科学的养殖模式,其可以有效解决环境污染的问题,为渔业发展带来更大的发展机遇。本文将从鱼菜共生的原理、构成及特点入手,分析鱼菜共生池塘生态养殖技术要求,探究蔬菜栽培的方式方法。
简介:摘要:纠正学生在考试中或者练习中呈现出来的错误也是数学教学的一类重要内容,学生的错误主要有数学概念不清、数学思维卡壳、心理因素。教师在解决错误时还要揪出错误背后的根本原因已达到训练学生思维、夯实学生基础的目的。