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  • 简介:造血干细胞是最重要的成体干细胞之一,通常认为其能够通过程序性的分裂完成自我更新,并具备向下分化为完整血细胞谱系的能力,因此,自体造血干细胞被认为是人类血液疾病的治疗手段之一,受到了较大的关注和重视。由于哺乳动物的造血干细胞能够在成体中被分离出来并实现体外培养,因此关于其分裂和分化的行为倾向和调节因子方面的研究也已相当成熟、然而。囿于哺乳动物营胎生造成胚胎期活体观察的诸多不便,造血干细胞在体内的产生方式一直以来都悬而未决。本研究中使用的斑马是一种硬骨鱼类,其在进化水平上与哺乳动物具有很高的相似性,具备相对完善的血液系统,更重要的是,在受精后0~7天(f)~7dpfdayspostfertilization)的斑马幼鱼的皮肤是通体透明的、本研究基于此项独特优势,使用荧光蛋白转基因斑马品系,实现在体观察尾部动脉血管腹侧壁的造血干细胞产生过程。后又使用另一个可变色荧光蛋白转基因品系TgLL将既有研究中发现的背部动脉前段产生之造血干细胞和尾部产生之造血干细胞进行分别标记和追踪,得出这两批产生时间和产生位置均不相同的造血干细胞在分裂和分化上的异同,希望能为斑马和哺乳动物造血系统的相关研究提供新的思路和依据。

  • 标签: 斑马鱼 转基因 造血干细胞 分化 追踪
  • 简介:目的正向遗传筛选斑马鱼肝脏、肠和胆囊发育缺陷突变体.方法ENU诱变野生型斑马并开展经典的F2代筛选,以lfabp为探针的全胚原位杂交、BES-H2O2-Ac荧光染料分别检测斑马早期胚胎肝脏、肠和胆囊的表型.结果在128个突变基因组中筛选获得了源自14个F2家族的斑马消化器官发育缺陷突变体品系23个,并按表型划分为6类.结论斑马鱼肝脏、肠和胆囊的发育调控机制有相似性和差异性.

  • 标签: 斑马鱼 消化器官 遗传筛选 突变体
  • 简介:目的探究ripply1基因在斑马早期背腹轴发生过程中的作用.方法利用斑马整封原位杂交技术揭示ripply1基因在斑马早期胚胎发育过程中的表达模式,通过显微注射技术在胚胎1细胞期注射ripply1的mRNA来高表达Ripply1蛋白并在后期观察胚胎背腹标记基因的变化及胚胎形态变化.利用Tol2转基因技术构建ripply1启动子驱动的GFP转基因.结果原位杂交结果显示ripply1基因在斑马原肠早期胚盾期特异表达在胚盾处,即预定的背部.高表达ripply1后,在胚盾期背部标记基因表达范围扩大,腹部标记基因表达减弱,受精后24小时胚胎表现出严重的背部化表型:头部增大,腹部卵黄延伸减弱,尾部躯干及尾部区域减少,有的甚至形成了第二个体轴.得到的转基因揭示ripply1母源表达,并且转录起始位点上游1200个碱基驱动的GFP能模拟内源基因的表达图式.结论ripply1可能参与斑马胚胎早期背腹轴的发生.

  • 标签: 斑马鱼 ripply1 早期胚胎发育 背腹发生
  • 简介:目的探讨一种可溶性的外分泌因子midkine-a在斑马胚胎心脏发育过程中的功能.方法在整体胚胎上做midkine-aRNA的原位杂交实验;利用原有的转基因斑马系Tg(pmidkine-a:EGFP),动态观察胚胎从出生到心脏发育成形这一段时间心脏荧光表达情况;将原有的转基因斑马体系Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎进行热休克而过表达midkine-a,观察胚胎心脏表型;利用Tg(pcmlc2:dsRed)系胚胎的心肌细胞核带有红色荧光,能进行单个心脏心肌细胞计数这一特点,将杂合的Tg(phsp:midkine-a:EGFP)系与纯合的Tg(pcmlc2:dsRed)系交配,以得到Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)的杂合胚胎,对其进行热休克而过表达midkine-a,计算每个胚胎心脏内心肌细胞的总数;用吗啉寡聚核苷酸(morphonino,MO)阻碍新生胚胎内的midkine-amRNA表达,观察胚胎心脏表型.结果原位杂交试验证实midkine-a在胚胎48hpf(hourpostfertilization,受精后,用来标记斑马胚胎年龄)大时表达于心脏;转基因Tg(pmidkine-a:EGFP)胚胎在72hpf时其EGFP表达于心脏;Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎在过表达midkine-a后心脏变小;吗啉寡聚核苷酸敲除midkine-a对胚胎心脏发育无影响;最后在Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)系胚胎内过表达midkine-a导致其单个心脏内心肌细胞数目变少,与其小心脏外形吻合.结论midkine-a在斑马胚胎发育过程中表达于胚胎心脏;过表达midkine-a导致胚胎心脏内心肌细胞总数减少及心脏变小;敲除midkine-a则对胚胎心脏发育无影响.

  • 标签: 斑马鱼胚胎 心脏发育 midkine-a 心肌细胞池
  • 简介:摘要目的初步探讨以L-FABP10GFP肝组织特异性转基因斑马建立放射性肝损伤模型的可能性。方法出生后5天的斑马,给予“剂量爬坡梯度”放疗,连续观察5天,了解幼鱼放疗安全性及安全剂量;结合“剂量爬坡”试验的结果及临床实践,选择合适的剂量进行放疗,连续观察5天,了解放疗后斑马鱼肝脏荧光强度、面积和形态的变化。结果“剂量爬坡”试验显示0、2、6、10、20、30、40Gy/次条件下的放射处理对斑马是安全的;接近临床实践剂量40Gy/次的放疗处理未见斑马鱼肝脏荧光强度、范围及形态的变化。结论L-FABPGFP转基因斑马放疗后54h内无法通过监测肝GFP荧光变化了解放射性肝损伤情况,该模型的建立仍需要进一步探讨。

  • 标签: 放疗 斑马鱼 肝损伤 模型
  • 简介:目的鉴于目前对斑马视锥细胞视蛋白运输机制并不明确,且缺乏相应的抗体,本实验拟构建一种可以在视锥细胞中特异表达荧光的转基因斑马.方法利用编码紫外敏感型视蛋白基因(sws1)的启动子,构建了一种在紫外敏感型视锥细胞中特异表达红色荧光蛋白tdTomato的转基因斑马.同时,将tdTomato荧光蛋白与非洲爪蟾rhodopsin蛋白末端44个氨基酸相融合,将该融合蛋白定位于紫外敏感型视锥细胞的外节段,进而可模拟内源性视蛋白的定位.结果共筛选出三种不同品系的转基因斑马,经过免疫组化分析,确定其中一种转基因品系是正确的目标品系.结论该转基因斑马的构建将会为进一步研究视锥细胞中视蛋白的运输机制提供帮助.

  • 标签: 斑马鱼 视锥细胞 紫外敏感型 SWS1 转基因 sws1
  • 简介:大家好!老编说事第三期又跟大家见面了。在本期话题没开始之前,请允许老编说几句题外话。前两期“老编说事”刊出后,一些朋友给老编来电,对网上购物的许多陷阱有了更进一步的认识,同时也对两期的话题给予了充分肯定,有些朋友希望就网购问题同老编私下再谈,老编欢迎!

  • 标签: 话题 网上购物 朋友
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  • 简介:阴沉沉的天,很冷很冷。一只被叫做列那狐的狐狸看着家里空空的储藏柜,心情很不好。他的妻子艾莫丽娜坐在一旁,满脸愁云。

  • 标签: 狐狸 储藏
  • 简介:一天,鼠倾巢出动,窜上大街要把所有的都买下来。行老板问:“你们不愁吃喝,买那么多鱼干啥?”“虽不愁吃喝,可要平安无事,总得费些钱财呀!”老鼠狡黠地笑了笑。行老板听不明白,却眼珠一转狠狠地敲起竹杠来。一下子.价抬高了好多倍。小老鼠们买完后,有的把扛在肩上,有的举在头顶,有的抱在怀里。

  • 标签: 鱼价 老鼠 老板 钱财
  • 简介:我的师傅,我称呼为“爸爸”的老人,在黑夜里发出粗粗的喘息声。他不像过去那样容易入睡了,总是睁大一双亮亮的眼睛看着夜色。他看到了什么?他好像要从这夜色深处看到自己的过去、看到死去的亲人,所以才会长时间目不转睛。每到了这样的时刻,我就有点紧张和害怕。我会用一声连一声的呼唤把他的目光拉到眼前,落在我和猫的身上。

  • 标签: 故事 夜色
  • 简介:放学的铃声响了,玲玲拎着书包刚走到教室门口,胳膊就被一只手扯住了。嘿,玲玲,等一下。玲玲扭转头,看见大虎和瑞江正笑眯眯地盯着她。眨眼间同学们都跑光了,偌大的教室变得空荡荡的。“你们干什么呀,不让我走?”

  • 标签: 小说 文学 文学作品 现代文学
  • 简介:我姓陈,大名叫陈小水,小名叫三毛。我有两个姐姐,两个弟弟,我刚好在中间,就像一只手的中指一样。嘘,你可别告诉我的两个姐姐,要是让她们听见这话,一定不服气了。女孩子,就是小心眼。我们兄弟姐妹的名字很好记,说一遍你保准记住了,依次叫:陈小金、陈小木、陈小水、陈小火、陈小土。小名更好记了:一毛、二毛、三毛、四毛、五毛。念下来就像清点零钱似的。听妈妈说,

  • 标签: 小金 土豆丝 芝麻糖 一只手 粉面 一朵朵
  • 简介:小溪里有一种活泼机灵的,差不多有半个格尺长,身体滑溜溜的,有点黑还有点黄,像菱形的梭子。由于它们喜欢成群聚集在柳树根里,所以,人们都叫它柳根。捉是我和小伙伴们最喜欢做的事之一。

  • 标签: 小学生 语文学习 阅读知识 课外阅读
  • 简介:地铁十号线上被挤成夹心饼干的小白领和终南山谷一条呵着热气的,遥遥地形成了某种呼应,一个古典学老教授在课堂上讲着讲着,突然被庄子的子非附体,他翕张着腮,宣布下课

  • 标签: 诗歌 文学 文学作品 当代作品
  • 简介:熊爸爸捉了些回到家,吩咐小熊来乡。我找4个方便袋来,一会儿就分完了。你把这些平均分成4份,送给我们的邻居。剩的要尽可能的少,够我们吃顿晚餐就行。

  • 标签: 小学生 语文学习 阅读知识 课外阅读
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