简介：目的探讨胃癌患者外周血CD133mRNA表达情况及其临床意义.方法抽取10名健康志愿者（组1）、5例胃溃疡穿孔患者（组2）,18例胃癌术前患者（组3）及19例胃癌术后患者（组4）外周静脉血2ml,分离单核细胞,采用半定量RT-PCR检测CD133mRNA表达水平.结果组3患者外周血CD133mRNA灰度值显著高于组1和组2（P=0.001）.组4患者中12例复发转移者外周血CD133mRNA灰度值显著高于7例无复发转移者（P=0.042）.CD133mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤分期有关（P＜0.05）.CD133mRNA灰度值与淋巴结转移率呈正相关（P=0.007）.结论胃癌患者外周血高表达CD133mRNA,其表达与淋巴结转移率正相关.胃癌术后外周血高表达CD133mRNA提示肿瘤复发或转移.

简介：摘要目的探讨可能影响mRNA疫苗粒径和粒径分布的因素。方法在不同离子强度缓冲液、pH值、稀释剂类型、稀释度和检测仪器条件下，采用动态光散射法对3批mRNA疫苗的粒径和粒径分布进行检测。结果稀释剂的离子强度增大时，疫苗的粒径随之增大，粒径分布不发生改变；稀释剂的pH值增加时，疫苗的粒径随之增大，当pH值达到弱碱性时，粒径分布出现明显变化；选择不同溶液作为稀释剂时，mRNA疫苗的粒径均不同，粒径分布无明显变化；疫苗稀释度≤100时，粒径和粒径分布均无明显改变；不同仪器参数下疫苗的粒径和粒径分布差异无统计学意义，但粒径分布略有不同。结论粒径和粒径分布受稀释剂、稀释度和检测仪器等因素影响，在生产与质控中应予以关注。

简介：目的探讨肾癌相关蛋白CAIX／MN／G250mRNA在肾细胞癌（renalcellcarcinoma，RCC）手术前后的表达水平及临床意义。方法应用RT—PCR技术检测57例RCC患者癌组织及术前外周血中CAIX／MN／G250mRNA的表达情况，并选择15例癌旁肾组织、15例正常肾组织及40例健康人外周血作对照，对术前外周血CAIX／MN／G250mRNA阳性RCC患者术后随访4周，并对其外周血CAIX／MN／G250mRNA水平进行半定量检测。结果57例RCC患者，其CAIX／MN／G250mRNA阳性率在外周血中为59．6％（34／57），癌组织中为78．9％（45／57），显著高于对照组（P〈0．01）。在肾透明细胞癌患者的外周血及癌组织中，CAIX／MN／G250mRNA的阳性率分别为76．2％（32／42）和95．2％（40／42），均显著高于相应对照组（P〈0．01）。RCC患者外周血及癌组织中CAIX／MN／G250mRNA阳性率均随临床分期的增加而增加（P〈0．01）。34例外周血阳性患者CAIX／MN／G250mRNA水平术前2h、术后7、14、21和28d分别为0．54±0．13、0．56±0．15、0．34±0．13、0．29±0．18和0．22±0．11。RCC患者外周血CAIX／MN／G250mRNA水平在肾癌根治术后随时间的推移呈下降趋势（P均〈0．05）。结论使用RT—PCR技术检测CAIX／MN／G250mRNA对肾癌尤其是透明细胞癌有较好的特异性和敏感性。外周血CAIX／MN／G250mRNA检测可作为肾癌微转移的检测指标用于RCC的诊断、疗效评价及预后判断。

简介：【摘要】目的：分析临床诊断前列腺癌患者过程中，予以外周血PCA3基因mRNA检测的应用价值研究。方法：本次研究共计纳入某院临床接诊80例患者参与分析，研究时间由2022年1月开始，拟定临床计划，收集研究数据，直至2022年12月截止，使用计算机表法依照患者疾病类型进行分组，研究组为前列腺癌患者40例，对照组为前列腺良性肿瘤患者40例，两组均进行荧光定量PCR检测，分析外周血PCA3基因mRNA水平表达情况。结果：研究组患者PCA3基因mRNA水平表达情况高于对照组PCA3基因mRNA水平表达，差异有统计学意义，P＜0.05。结论：临床使用外周血PCA3基因mRNA检测技术，诊断前列腺癌患者应用价值极高，通过分析相关基因水平表达情况，能够有效掌握患者疾病进展情况，便于选取对应措施进行干预，保障患者生命安全，值得临床广泛使用。

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简介：目的应用荧光定量RT—PCR榆测乳腺癌外周血中的表达情况．并评价其表达的临床意义。方法用荧光定量RT—PCR方法检测49例乳腺癌患者外周mCK19mRNA表达。结果49例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性28例，阳性率57．1％，统计结果显示乳腺癌患者外周血CK19mRNA的表达阳性牢在患者不同年龄、病理类别、临床分期、ER、PR状态的各组差异无显著性（P〉0．05），在淋巴结转移状态间有显著差异。结论CK19mRNA可作为RT-PCR法榆测乳腺煽患者外周血微转移的分子标志物，有助于早期预测乳腺癌发生血道微转移，指导临床治疗.

简介：TA克隆构建含MOC1基因cDNA片段的重组质粒，作为TaqMan定量检测水稻分蘖基因MOC1mRNA的标准品，建立了检测方法。采用RT—PCR。的方法，从水稻分蘖芽总RNA中逆转录扩增总cDNA，PCR扩增MOC1基因中设计的目的片段，将纯化的目的片段与pMD19-TSimple载体连接，转化宿主菌JM-109，提取重组质粒DNA，PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值，确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品。对重组质粒进行实时荧光定量PCR实验。建立了MOC1基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法，特异性好，检测灵敏度达10^2拷贝，线性范围为10^2-10^7拷贝，阈值循环数与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系（r=0．999），扩增效率高（E=92．8％）。成功建立了MOCI基因实时荧光PCR定量标准品，且TaqMan荧光定量RT—PCR的方法可对水稻分蘖基因MOC1mRNA的表达进行准确定量。

简介：目的探讨外周血促甲状腺激素受体mRNA（TSHR-mRNA）检测在甲状腺乳头状癌诊断中的应用价值.方法收集2015年4月至2015年12月104例甲状腺疾病患者资料,以术后常规病理为诊断标准进行分组,并以11例健康对照者作为校正标准,应用RT-PCR技术检测其手术前、后外周血TSHR-mRNA的表达情况,用SPSS17.0软件进行统计学分析,手术前后患者外周血TSHR-mRNA表达量以均值±标准差表示,t检验;通过分析ROC曲线,确定TSHR-mRNA对PTC的诊断阈值,P〈0.05为差异有统计学意义.结果甲状腺乳头状癌患者组术前外周血TSHR-mRNA表达量明显高于甲状良性病变患者组、健康对照组;且术前外周血TSHR-mRNA的表达量在不同性别、年龄、病灶大小、病灶数目以及是否合并桥本氏甲状腺炎组间无统计学意义（P〉0.05）,而在甲状腺癌是否合并被膜侵犯、淋巴结转移以及B-rafV600E基因突变差异有统计学意义（P〈0.05）.甲状腺癌患者术后1d,其外周血TSHR-mRNA表达量明显降低.通过ROC分析外周血TSHR-mRNA对甲状腺癌的诊断截断值为1.7时其诊断甲状腺癌的敏感度为：60%,特异度为：82.4%,阳性预测值为：87.5%,阴性预测值为：50%,准确率：为67.3%.结论外周血TSHR-mRNA检测可作为甲状腺乳头状癌的无创检测指标,有可能在成为预测预后、辅助分期、术后随访、监测复发和转移的新指标.

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简介：Thepurposeofthestudyistoestablishafluorescencequantitativereversetranscriptionpoly-merasechainresponse(FQ-RT-PCR)methodforthequantitativedeterminationofIL-2mRNAandIL-4mRNAinThcells,withwhichtheThcellsstatusofthepatientswithgynaecologicaltumorsandchronicrenalfailure(CRF)canbeanalyzed.IL-2cDNAandIL-4cDNAwereprepared,andtheplasmidpMD18carryingIL-2cDNAorIL-4cDNAfragmentwasconstructedandclonedasthetemplateforquantitativedetermination.Theprimersandprobeslabelledwith6-carboxy-fluorescein(FAM)and6-carboxy-tetrarnethylrhodamine(TAMRA)wereprepared,andtheexperimentalconditionswereoptimizedtosetuptheFQ-RT-PCRmethodforquantitativedeterminationofIL-2mRNAandEL-4mRNA.Thcellsenrichedfromperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)of20healthyvolunteers(HVs),16gynaecologicalbenign(GB)cases,18gynaecologicalmalignant(GM)tumorcasesand16chronicrenalfailure(CRF)patientsweretestedforIL-2mRNAandIL-4mRNAbyFQ-RT-PCR.Thehouse-keepinggeneβ-actinwasusedastheinternalcontrolgeneoftheexperiment.Thestandardcurveforlogconcentrationofseriesofquantitativetemplatesvsthresholdcycle(CT)wasestablishedbylinearregression,andthelinearrangewas102-107copies/μl.TheimprecisiontestshowedtheCVofinter-assayandintra-assayofahighcontentsamplebyFQ-RT-PCRwere7.8%and12.5%,respectively.TheCVofinter-assayandintra-assayofalowcontentsamplewere10.8%and19.5%,respectively.TheIL-2mRNAexpressionsinThofthepatientswithgynaecologicalmalignanttumor(comparedwiththeHVsandthepatientswithgynaecologicalbenigndisease)andinThoftheCRFpatients(comparedwiththeHVs)weredeclinedsignificantlyandatthesametimetheIL-4mRNAexpressionincreasedsignificantly(P<0.001).Asimple,sensitiveandaccurateFQ-RT-PCRmethodforthequantitativedetectionofIL-2mRNAandIL-4mRNAhasbeenestablished.TheIL-2mRNAandIL-4m

简介：Clusterinisa75-80kDaheterodimericglycoprotein,thatisproducedinmosttissuesbutwhichexactbiologicalroleisstillnotclear.Particularly,itsroleinprotectionorpromotionofapoptosisisheavilydisputed,sincedatasupportingbothviewshavebeenreportedinseveralindependentstudies.Toclarifythisissue,andalsotodeterminewhetherclusterinexpressionitselfmightbeaffectedbyapoptosis,inthepresentstudy,ratthymocytesweretreatedwithdexamethasone,-asyntheticglucocorticoidthatelicitsapoptosisinthymocytes-,andclusterinmRNAexpressionwasanalyzedbysemi-quantitativeRT-PCRbeforeandafterinductionofapoptosis.Interestingly,neitherthetreatmentwithdexamethasoneinvitronortriggeringofapoptosisinvivoup-regulatedclusterinexpression,opposingtheviewthatclusterinisinvolvedinapoptoticprocesses.Ontheotherhand,anewclusterinmRNAisoformwasdetectedandisolated,whoseexpressionwasrestrictedtofreshlyisolatedthymocytes.Thisnovelisoformlacksthepost-translationalproteolyticcleavagesiteandisthereforepredictedtoencodeamonomericprotein.Thebiologicalfunctionundernormalcircumstances,however,willneedfurtherinvestigationsforclarification.Whileapoptosiscouldnotmodulateclusterinexpression,activationofthymocyteswithconcanavalinAandinterleukin-2resultedinup-regulationofclusterinmRNAlevel,indicatingthatclusterinexpressionisratherunderthecontrolofcellactivation-mediatedratherthanapoptosis-inducedsignals.

简介：也有许多用DD方法的研究,因此DD得到的是mRNA的标签（tags）,　　既往对mRNA的比较研究中多用减数杂交方法［4］（subtractionhybridization）

简介：在真核生物的基因中，mRNA选择性剪接现象十分普遍。mRNA选择性剪接导致一个基因多转录本的产生，被认为是高等生物增加蛋白质多样性的主要机制，且已发现与许多人类疾病密切相关。发现这些转录本的选择性剪接位点、新的外显子和外显子组合，乃至获得这些剪接变异体的完整克隆，对于基因功能的深入研究十分必要。简要介绍了几种在mRNA水平探索选择性剪接的方法。

简介：摘要：介绍了mRNA新冠疫苗的工艺设计特点，并结合mRNA新冠疫苗生产的无菌要求，探讨了公用工程的设计要点。

简介：摘要：宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其致病因子之一是人乳头瘤病毒（HPV）的高风险型感染。HPV E6和E7基因的活化对于宫颈癌的发展起着重要的作用，因此，检测HPV E6/E7 mRNA的表达水平在宫颈癌中的诊断和治疗中具有重要的意义。本文将详细介绍HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌中的研究进展，包括其原理、检测方法、临床应用。

简介：摘要目的分析E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法选取本院2017年9月—2018年11月50例因宫颈疾病就诊的患者为研究对象，开展宫颈病变筛查。结果E6/E7mRNA检测方式宫颈疾病检出率为80.0%，与病理学检查比较差异不具备统计学意义（P＞0.05）。E6/E7mRNA检测方式检测宫颈疾病的敏感性、阳性预测值、阴性预测值与病理学检查比较，差异不具备统计学意义（P＞0.05）。结论E6/E7mRNA检测方式对ASC-US分流意义较为明确，能够有效指导阴道镜的合理使用。

简介：目的定量研究细胞间粘附分子基因（ICAM-1mRNA）在不同病理类型颅咽管瘤的表达差异及意义。方法收集30例经手术治疗的颅咽管瘤标本，采用SYBR荧光实时定量PCR法检测ICAM-1mRNA在肿瘤组织的表达，并对表达结果行统计学分析。结果造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（62．18±6．43）×10^3copies／μg，鳞状乳头型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量为（1．13±0．17）×10^3copies／μg，造釉细胞型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达量显著性高于鳞状乳头型颅咽管瘤（P〈0．01）。结论两种病理类型颅咽管瘤ICAM-1mRNA表达存在显著性差异，此差异性可能与两种病理类型颅咽管瘤不同的肿瘤炎症有关。

简介：目的：研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞（PBMCs）经结核特异性抗原刺激后白介素-8（interleukin-8,IL-8）的mRNA表达情况并与结核潜伏感染（latenttuberculosisinfection,LTBI）及非结核感染健康对照组进行比较。方法提取研究对象的PBMCs,经特异性抗原肽刺激后,收集细胞并提取总RNA然后经实时荧光定量PCR检测技术比较各组IL-8mRNA表达情况。然后以敏感性（sensitivity）为纵坐标,1-特异性（1-specificity）为横坐标绘制结核组和LTBI组相比较的ROC曲线。结果经结核特异性抗原刺激后,结核组PBMCs中IL-8基因mRNA的相对表达量明显高于LTBI和健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。ROC曲线下面积为0．72。以3．985为临界值,鉴别活动性结核病和LTBI的敏感性和特异性分别为54．17%和90．00%,此时阳性似然比等于5．42,64．7%的病例诊断准确。结论IL-8有可能作为新的活动性结核病诊断标志物,有助于活动性结核病与LTBI的鉴别诊断。

简介：