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简介：摘要2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus，2019-nCoV)是新近分离鉴定的第7种可以感染人类的冠状病毒，已确认为目前正在暴发流行的COVID-19的病原体。2019-nCoV可在COVID-19患者的支气管肺泡灌洗液、鼻咽拭子、血液等样本中检出，细胞分离培养相对容易。鉴于病毒分离培养和病原学鉴定对病毒复制增殖、致病性、免疫、检测诊断和特异防治等都具有重要意义，此文就2019-nCoV分离、病原学鉴定以及根据宏基因组测序的反向病原学研究现状与进展做一综述。

简介：摘要目的探讨质谱（MALDI-TOF MS）在临床分离的丝状真菌快速鉴定中的应用。方法收集首都医科大学宣武医院2017年1月至2019年1月经形态学鉴定为丝状真菌的菌株，分别采用双甲酸夹心法和甲酸乙腈萃取法提取真菌蛋白并行MALDI-TOF MS鉴定，并与聚合酶链反应（PCR）内转录间隔区（ITS）基因序列测定结果比较；分析丝状真菌菌种分布和标本来源。结果共收集临床分离的丝状真菌90株，其中曲霉菌属70株（77.78%），青霉菌属6株（6.67%），链格孢霉5株（5.56%），镰刀菌属4株（4.44%），赛多孢菌2株（2.22%），米根霉、根毛霉和哈茨木霉各1株（1.11%）；其中曲霉菌以烟曲霉47株（52.22%）、黄曲霉13株（14.44%）和黑曲霉4株（4.44%）为主。标本主要来源于呼吸道标本（90.0%）（包括痰标本和肺泡灌洗液），其次为角膜和耳道分泌物（3.33%），痰标本中分离率最多的为曲霉菌（59株、65.56%）。MALDI-TOF MS鉴定到种水平82株，与基因测序结果一致率为91.11%（82/90），鉴定准确率显著高于形态学鉴定结果（68.89%，62/90），差异有统计学意义（χ2 = 12.02、P = 0.01）；质谱鉴定丝状真菌中的曲霉菌、镰刀菌、赛多孢菌和链格孢霉时准确率高（98.57%～100%）；双甲酸夹心法和甲酸乙腈萃取法前处理的质谱鉴定丝状真菌到种水平的比率分别为91.11%（82/90）和90.00%（81/90），鉴定曲霉菌种水平分别为98.57%（69/70）和97.14%（68/70），但鉴定准确率差异无统计学意义（χ2 = 0.34、P = 0.95）；两种前处理方法均可100%鉴定烟曲霉、黄曲霉、赛多孢菌和链格孢霉到种水平，其中89.36%（42/47）烟曲霉和76.92%（10/13）黄曲霉鉴定得分≥ 2.0分。结论MALDI-TOF MS技术鉴定丝状真菌快速准确，双甲酸夹心法前处理操作更简便，适合实验室常规检测，可用于实验室常规鉴定曲霉菌等常见丝状真菌。

简介：摘要：枣缩果病严重影响我国枣业发展，并且逐年呈现上升趋势。本研究从大棚枣园基地采取冰糖枣、胎里红枣、中华梨枣三种作为研究对象，对采摘后的病果进行多次的分离，并且根据柯赫氏法则对分离的病原菌进行鉴定。

简介：摘要目的了解山西省家禽中艾伯特埃希菌的带菌情况。方法采集山西省不同禽类定点屠宰场鸡肠内容物经EC肉汤增菌后，PCR对其进行eae基因检测，阳性增菌液接种麦康凯琼脂，挑取不发酵乳糖菌落进行三重PCR（clpX、lysP和mdh基因）、16S rRNA基因序列分析及多位点序列分型（Multiocus sequence typing，MLST）鉴定。结果本研究共采集了250份样品，经eae基因检测、生化鉴定、三重PCR检测、16S rRNA及MLST聚类分析，确定2株不发酵乳糖、木糖，无动力，eae、clpX、lysP和mdh基因阳性的菌株为艾伯特埃希菌。进一步对该2株艾伯特埃希菌毒力基因分析发现，该菌株携带Ⅱ/Ⅲ/Ⅴ组亚型 cdtB基因，但均不携带stx基因。结论本研究表明山西省鸡类中存在艾伯特埃希菌带菌的情况。

简介：摘要目的了解海南省虫媒病毒种类及分布变化。方法于2017－2018年在海南省野外采集吸血昆虫标本，所有吸血昆虫标本实验室处理后用BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离，同时使用RT-PCR平行检测吸血昆虫标本中虫媒病毒基因。结果共采集到4属（库蚊、阿蚊、伊蚊、按蚊）15 062只蚊虫和11 360只蠓虫。采集的蚊虫中三带喙库蚊居多，占蚊虫采集总数92.88%（13 990/15 062）。经组织培养细胞共获得4株病毒分离物，其中3株乙型脑炎（乙脑）病毒、1株盖塔病毒，在5批三带喙库蚊标本中检测到乙脑病毒基因阳性。遗传进化分析结果显示这3株乙脑病毒和5批PCR筛检阳性的标本均属于基因1型乙脑病毒。当地乙脑病毒的最低感染率为0.57‰（8/13 990）。在5批蠓虫标本中检测阿卡斑病毒基因阳性，当地阿卡斑病毒的最低感染率为0.44‰（5/11 360）。基于病毒S基因和M基因序列的系统进化分析显示这5株阿卡斑病毒处于单独进化分支形成独特的地理分布特征。结论继1980年代以来，从海南省的蚊虫标本中再次分离到乙脑病毒和盖塔病毒、蠓虫标本中检测到阿卡斑病毒。应加强乙脑病毒、盖塔病毒和阿卡斑病毒对人畜动物感染状况及疾病负担的监测，以减少对当地公共卫生健康的危害。

简介：摘要目的了解云南松鼠是否携带鼠疫噬菌体，并探讨其流行病学意义。方法2015 - 2018年，在云南鼠疫疫源地和非疫源地的5个调查点进行鼠疫宿主动物调查。对调查中捕获的松鼠，取其脾、肝、肠道标本，低温保存备用。取肠道标本磷酸盐缓冲液（PBS）增菌液，经0.22 μm滤膜滤过后加入到含有100 μl鼠疫疫苗株（EV76）菌悬液的LB液体培养基中，28 ℃、220 r/min恒温气浴振荡培养18~24 h，采用双层平板法观察噬菌斑的生长情况，电镜下观察鼠疫噬菌体的形态结构；同时取脾、肝、肠道标本进行鼠疫菌特异标志基因caf1检测。结果共捕获到10只松鼠，其中赤腹松鼠8只，珀氏长吻松鼠2只。共分离出4株鼠疫噬菌体，其中在赤腹松鼠分离出2株，在珀氏长吻松鼠分离出2株；家鼠鼠疫疫源地弥勒县和新平县各分离出1株，野鼠鼠疫疫源地剑川县和洱源县未分离出，非鼠疫疫源地永善县分离出2株。肉眼下观察，家鼠鼠疫疫源地分离出的2株噬菌体产生的噬斑为透明状，生长状态良好；非鼠疫疫源地分离出的2株噬菌体产生的噬斑为半透明状，生长状态欠佳。电镜下观察，噬菌体为较典型的肌尾噬菌体，噬菌体头部直径约40 nm，肌尾约120 nm，肌尾末梢可见尾丝簇。10份松鼠脾、肝、肠道标本caf1检测均为阴性。结论云南松鼠中携带鼠疫噬菌体的比例较高，虽然鼠疫菌特异标志基因caf1检测均为阴性，但由于鼠疫噬菌体的存在，松鼠有可能成为鼠疫菌传播的一种载体。

简介：摘要目的对2017年山东省临沂市手足口病(hand, foot and mouth disease，HFMD)患儿粪便标本进行病毒分离与鉴定，并对其基因特征进行分析。方法对HFMD患儿粪便标本进行核酸检测。用人横纹肌肉瘤细胞进行病毒分离。对病毒进行全基因组序列测定，通过与人类肠道病毒比较，对分离株进行系统发育分析和基因重组分析。结果自重症HFMD患儿粪便标本中成功分离到1株柯萨奇病毒A组2型(coxsackievirus A group 2 type, CoV－A2)，命名为CoV-A2 SD17-430，系统进化分析进一步确定其基因型属于D2基因型。SD17-430衣壳蛋白编码区与CoV-A2国际原始株同源性高，在非结构蛋白编码区与CoV-A4(MH086949)和CoV-A14(KP036482)同源性高。结论与原始毒株相比，CoV-A2 SD17-430株发生了较大程度的遗传变异，其进化过程中可能与多个A组肠道病毒发生了基因重组。应继续加强对HFMD病原的全面监测，以便进一步了解其病原谱变化，为制定更有效的HFMD防控策略提供数据参考。

简介：摘要目的分离、鉴定口腔变黑普雷沃氏菌(Prevotella nigrescens，P.nigrescens)，探讨其对食管鳞癌是否有促进作用。方法胰豆胨肝粉琼脂(GAM)培养基厌氧原代培养慢性牙周炎患者龈沟液，挑选黑色菌落分离纯化；革兰染色、16S rRNA基因测序鉴定分离的单克隆细菌；该细菌感染食管鳞癌细胞NE6-T后细胞生物学性状变化。结果慢性牙周炎患者龈沟液厌氧原代培养120 h后可见多个菌落，其中灰黑色菌落经连续划线法分离纯化为黑色、圆形光滑单克隆菌落。该细菌革兰染色阴性、串珠状排列，16S rDNA序列与P.nigrescens F0103同源性为99.78%(P.nigrescens LY01)。LY01感染促进NE6-T细胞体外增殖、迁移、侵袭和裸鼠皮下荷瘤生长，并诱导Ki67表达上调和p-STAT3激活。结论慢性牙周炎口腔P.nigrescens可能促进了食管鳞癌发展。

简介：摘要目的对贵州省钩端螺旋体（钩体）病疫区不明原因发热病例进行钩体分离鉴定和分子分型，了解其病原学特征，为当地钩体病的防治提供病原学依据。方法采集贵州省钩体病疫区黔东南州黎平县不明原因发热病例血液和尿液标本进行钩体分离培养，对分离的钩体疑似菌株通过致病性钩体G1/G2-PCR方法进行初步鉴定，进一步采用钩体血清群特异PCR进行分群鉴定，然后采用多位点序列分型（MLST）技术对其进行分子分型，并与国内常见血清群参考菌株进行聚类分析。结果从35例发热病例血液中分离得到3株钩体疑似菌株，分离率为8.6%，分别命名为17BX002、17BX003和17AJX008；3株菌株经钩体特异性G1/G2-PCR鉴定为致病性钩体；钩体血清群PCR鉴定显示，17BX002株为流感伤寒群钩体，其余2株菌为阴性（排除其为黄疸出血群、赛罗群、犬型、秋季群、流感伤寒群和七日热群）；进一步的MLST显示，17BX002株为ST106型，与流感伤寒群聚类最近，而其余2株为ST96型，与巴达维亚群菌株一致。结论高发季节贵州省疫区不明原因发热病例中存在钩体感染病例，流感伤寒群和巴达维亚群为贵州省新发现钩体菌群。

简介：摘要：目的：探讨潍坊地区肉鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定及耐药性特点，为潍坊地区肉鸡大肠杆菌病治疗提供依据。 方法：调查 30 个标准化肉鸡饲养场 100 个鸡群（ A 组 ）和 160 个大棚肉鸡饲养场（ B 组 ）， 每个场所均选择 800 只鸡，了解不同鸡群 发病情况、病原学， 分离鉴定禽致病性大肠杆菌，并对常用的 10 种抗生素实施药敏试验。 结果：A 组肉鸡大肠杆菌病发病率小于 B 组，差异有统计学意义（ P ＜ 0.05 ）； A 组病原分离物检出率小于 B 组，差异有统计学意义（ P ＜ 0.05 ）；病原分离菌株的耐药性 在 1.79%-89.20% ， 其中 头孢噻肟钠、头孢曲松钠、多粘菌素、环丙沙星、恩诺沙星 等耐药性较低。 结论：潍坊地区肉鸡大肠杆菌病发病率较高，同时病原分离鉴定检出率也较高，病原菌存在多重耐药性，需要重视潍坊地区肉鸡大肠杆菌病的预防，科学饲养，积极采取措施降低病原菌的耐药性。

简介：摘要目的对2018年候鸟迁徙季从天山北麓分离的1株野鸟源H1N1禽流感病毒(avian influenza virus, AIVs)进行全基因组测序及遗传进化分析。方法2018年11月于天山北麓中段多个水库采集320份新鲜野鸟粪便样品，通过接种鸡胚、血凝抑制试验和AIVs PB1通用引物的RT-PCR等方法分离鉴定AIVs，以甲型流感病毒通用引物扩增病毒基因组8个片段并进行全基因组测序，利用BLAST、Clustal W、MEGA7.0和MegAlign等软件进行序列比对、系统进化和分子特征分析。结果从6份野鸟粪便样品中分离鉴定出流感病毒，阳性率为1.88%，其中1株为H1N1亚型AIV，命名为A/wild bird/Xinjiang/010/2018 (H1N1)(简称XJ-H1N1)。XJ-H1N1 8个基因片段均源于雁行目野鸭中分离的AIVs，其中表面基因HA和NA均属欧亚谱系，分别源于蒙古国绿头鸭(Anas platyrhynchos)中分离的H1N1和孟加拉国野鸭中分离的H3N1 AIVs，6个内部基因分别源于俄罗斯西伯利亚地区赤膀鸭(Anas strepera)中分离的H6N8、埃及琵嘴鸭(Anas clypeata)和短颈野鸭(teal)中分离的H7N3以及荷兰绿头鸭等野鸟中分离的H7N5 AIVs。XJ-H1N1血凝素(HA)蛋白裂解位点仅含1个碱性氨基酸，为低致病性AIV。HA受体结合位点190、225位氨基酸为E、G(H3计数)，能够结合α2，3半乳糖苷唾液酸(SAα2，3Gal)和SAα2，6Gal双受体。HA的T200A、E227A突变和NS1的P42S突变均可增强病毒在哺乳细胞中的复制能力和致病性。结论从天山北麓野鸟中分离到1株H1N1亚型低致病性AIV，其主要由迁徙野鸭携带的AIVs经多次重配产生，该病毒在哺乳动物细胞中的复制能力和致病力可能增强，可结合SAα2，3Gal和SAα2，6Gal两种受体。

简介：摘要：目的：探讨呼吸道疾病住院患者病原菌分离鉴定及其对不同抗生素耐药性分析。方法：从 2016年 5月开始进行研究对象选择，到 2020年 5月结束，收集 168例呼吸道疾病住院患者，对患者的痰液进行病原菌培养，并且对病原菌进行药敏试验，分析病原菌的分布，以及耐药性的情况。结果： 168例患者共分离培养 383例病原菌，其中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌，且均存在耐药情况。结论：呼吸道疾病住院患者病原菌主要包括革兰氏阴性和阳性菌，且大多数常见致病菌均存在耐药的情况，因此临床需根据实际情况选择抗菌药物。

简介：摘要：在现代社会及科技的不断发展和进步中，石油业的发展也得到了极大的进步。与此同时，人们对于石油的需求量也在不断地增大，且在能源的使用量中占据着极大一部分。但就目前来看，越来越多的原油含水量在不断的提升，许多油田受到了严重的破坏。所以，在这种情况下，想要更好的实现水资源保护，促进石油能源的开发和利用，就需要对油气水分离问题加以重视，且油气水分离是一项具有较强专业和工艺性，对各方面的要求都比较高，所以，这就需要进一步完善与优化该技术，以便更好的满足现代社会发展对于能源生产和发展的实际需求。基于此，论文先是以高效分离器油气水分离现状为切入点，进而从其设计要求、技术原理、研究方案几个方面对高效分离器油气水分离展开了深入的分析和探讨。

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简介：摘要：法医临床鉴定中的伤残鉴定能够为案件分析提供科学依据，帮助相关人员对案件进行有效处理，因此作为法医临床鉴定中的重要组成部分，所以必须保证伤残鉴定的准确性。本文将对法医临床鉴定中的伤残鉴定进行研究，从多个方面展开分析，最终达到提高法医临床鉴定中伤残鉴定整体质量的目的。

简介：摘要：空分装置是以空气为原料，通过压缩机加压、预冷系统和纯化系统吸附杂质、膨胀机做功和冷箱换热把空气变成液态，再经过精馏而从液态空气中分离生产出纯度99.999%的氮气和液氮。

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简介：摘要： 本文从 顺序分离工艺技术 、 前脱 丙 烷工艺技术 、 前脱乙烷工艺技术 以及其他技术几方面入手，分析了当前乙烯、丙烯生产中 乙烯装置主流分离技术的 特点，并对 乙烯装置分离技术的进展 进行说明。

简介：【摘要】目的：探讨传统经验鉴定法和现代技术鉴定法对中药饮片鉴定的应用价值。方法：20种中药饮片各取一份，一份作为现代组，另一份作为传统组，主要包括乳香、黄柏、车前子、杜仲、海金沙、秦皮、白头翁、菟丝子、桔梗、龙血竭、漏芦、降香、藏红花、白花蛇舌草、石斛、苏木、牡丹皮、胖大海、葶苈子、青黛，逐一鉴定。结果：传统组采用传统经验鉴定法鉴定后其药品的鉴定准确率达90.0%，错误率为10.0%，而现代组采用显微技术鉴定后其准确率为100%，无错误率，二者对比结果无明显差异（P>0.05）。结论：在鉴别中药材时不论是采用现代技术还是传统经验技术二者无太大差别，但由于传统经验鉴定法投入成本较小，操作便捷，因此被广泛应用在各大基层医院。