简介：

简介：目前,在供体器官短缺的情况下,大家公认猪是最合适的异种器官和组织的提供者,用猪肝细胞治疗急性肝衰病人已有报道.如何将肝细胞最大限度完整地、无损伤地分离出来,这是非常关键和重要的一步.我室在进行猪肝细胞的分离中,逐渐探索出一套比较行之有效的方法.材料与方法:采用中国实验用小型猪,常规麻醉、消毒、开腹,用D-Hank′s液进行肝脏原位灌注,再用0.02%EDTA-Hank′s液(37℃)灌注18～20min,摘取肝脏行多点灌注5min,置肝脏于60目钢网上,用直剪迅速剪开肝脏被膜,用镊子夹起轻轻抖动,并用1640液冲洗,边抖动边冲洗,使细胞滤出漏于烧杯中.与此同时,用剪刀把肝组织剪成小块,再用玻璃注射器芯轻轻研磨,边研磨边冲洗,操作要轻,并保持无菌,收集肝细胞,离心洗涤三次,并逐级用80目、100目、120目、150目钢网过滤.分离出的肝细胞进行计数、台盼蓝拒染试验检查、PAS染色、葡萄糖-6-磷酸酶染色及电镜检查.结果:肝细胞存活率90±1.3%,PAS染色显示肝糖元丰富,葡萄糖-6-磷酸酶染色显示酶的活性良好.电镜观察,肝细胞的线粒体、内质网等亚显微结构未见异常.对于猪肝细胞的分离,国外文献报道多采用Ⅳ型胶原酶循环灌注法,但费用很昂贵.在实践中,我们用EDTA代替胶原酶,采用肝脏原位灌注+多点灌注+机械研磨的方法,取得了较为满意的效果.此法与胶原酶灌注法比较,从分离的肝细胞数量、活力、肝糖元及细胞中一些酶的活性都与胶原酶法无显著差异,且光镜及电镜观察,显示细胞形态及亚细胞结构未见异常.我们认为此方法易于控制,价格低廉;而胶原酶法容易消化过度,造成细胞膜破损,或消化不完全造成多个细胞连在一起,且费用昂贵.实验证明,改良的猪肝细胞分离方法为用猪肝细胞治疗急性肝衰病人的研究提供了一个可行的方法.

简介：树突状细胞(DC)是一类专职性抗原呈递细胞,不仅启动免疫反应和诱导免疫耐受,还在调节免疫反应与免疫耐受的平衡中起决定性作用.肝脏因其固有的移植耐受性而在免疫耐受研究中深受关注,肝移植物容易存活,伴有肝移植的其他器官(如心脏、肾脏等)移植存活时间也较其单独移植明显延长.最近有人提出,在肝移植耐受中DC可能起关键作用,但因其难于分离培养,国外仅美国Pittshburgh大学在做相关研究,国内尚未见报道.材料与方法:1.肝非实质细胞的分离:取6～8w小鼠,麻醉后无菌开腹,门静脉插管,用前灌液(PBS+肝素500μ/100ml)灌流2～3min,改用注射器缓慢推注2mlⅣ胶原酶(GIBCOL公司,0.05%);取材后剪碎,15mlⅣ胶原酶液(0.05%)体外消化30min.尼龙网过滤,PBS液清洗(400g×5min离心)两次,稀释成4～5ml细胞悬液.下铺细胞分离液Percoll(Pharmacia公司)制成的不连续密度梯度液,500g×30min离心后,细胞分三层,先吸弃最上层细胞碎片,再吸取两液体界面的肝非实质细胞,避免吸到最底层的血细胞,RPMI1640液(GIBCOL公司)清洗两次,400g×5min离心,即可得肝非实质细胞.2.肝树突状细胞(HDC)的培养:将肝非实质细胞用含灭活的10%胎牛血清(GIBCOL公司)的RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2.5×106/ml,接种于24孔培养板,每孔1ml,加GM-CSF(GIBCOL公司)10ng/ml.培养第三天轻轻吸去未贴壁细胞,换液.后隔天半量换液,培养第7～8d可收取HDC.结果与讨论每只小鼠可得肝非实质细胞约1.0～1.5×107个,细胞大小不一,类型较多.培养24～48hr后,有大量细胞贴壁生长,少量HDC前体细胞半贴壁状散在分布,经筛选、扩增,第4d时HDC数量增多,出现6～8个细胞组成的小集落.第7～8d,HDC数量增多,此阶段细胞有一明显的增殖高峰,有大量半贴壁半悬浮的集落,集落表面的细胞有小的突起.第7～8d,每只小鼠HDC得率约为2～3×106个.因HDC难于分离培�

简介：长期以来,Guguen等[1]的两步胶原酶灌注法分离获得肝细胞的方法,几乎成了肝细胞分离的经典方法;在此基础上又发展了多种不同的培养方法,如在培养瓶内加纤连蛋白(febronectin)以促进肝细胞附壁[2],添加生长因子于培养基促其生长等.但上述方法步骤繁琐,成本较高,且两步胶原酶灌注法主用于大鼠肝细胞的分离,不适于新生鼠肝细胞的分离,甚至分离成年小鼠肝细胞,都因为血管的纤细,在实际应用中也很困难.

简介：

简介：实验教学是理论教学的必要补充和深化,是教学的重要环节.组织学是一门形态学科,要求对大量细胞、组织、器官的光镜和电镜结构进行认识,尽管我校本科和专科教学中理论课与实验课的教学比例已达到2:3或2:2,但仍不能满足学生观察组织切片的要求,学生也应该通过多观察组织切片和图片来更好地理解结构与功能的关系.

简介：人体胚胎学是综合课程中的一部分内容,在人体的发生和胚胎发育过程中,它经历了从时间、空间、量变、质变的动态和连续复杂的变化过程,在整个变化的过程中它不是一个孤立的环节,而是一环扣一环动态变化的长链,其内容抽象、机理复杂、空间立体感强,学习起来必须富有空间想象力和较强的逻辑思维能力.因此,对仅有初中毕业的中等卫生职业学校的学生来说,学习的难度较大,困难也不少,从而要求我们教师在教学的过程中应根据教材内容特点,采取较有效教学方法,来帮助学生的理解和掌握.本文是笔者在多年的教学实践中点滴体会,在此与同行们共同商讨.

简介：人体解剖学是医学生的必修基础课程。标本考试是解剖学教学中的一个重要环节。为了适应教学的需要，解决办学规模扩大后资源相对不足的问题，我们教研室利用计算机多媒体技术，进行了标本考试的改革，取得了良好的效果。

简介：本文就当前解剖学教学中存在的问题，讨论了如何改进教学方法以完成解剖学课程的目标教学。

简介：专科第三版教材就以前相比,有了很大的改进,并且具有自己的一些特色,这一点在杭州医学院的王祖武的文章中也有说明,这里不再赘述,文中也就教材中的一些错误指出了部分,但我们在教材的使用过程中发现有些地方虽没有指出来,但存在一些问题值得商榷,故在本文中作一些说明.

简介：人体断层解剖学是用断层方法研究人体形态结构及其相关功能的科学,其主要特点是在保持人体器官于原位状态下,准确地显示各结构的形态、位置及毗邻关系.掌握人体断层解剖学的结构特征,为医学影像专业的学生学好其它影像学奠定坚实的形态学基础.但是对于初学人体断层解剖学的学生来讲,学习人体断层解剖学的思维方式与学习系统解剖学、局部解剖学的思维方式存在很大的差异.因此,学习断层解剖学有一定的难度,为了帮助学生更快更好的掌握这门学科,笔者从以下几方面进行了探索,在教学实践中收到了较好的效果.1要学好断层解剖学,必须以坚实的局部解剖学知识为基础

简介：

简介：人体解剖学课堂提问的探讨王美容海南省卫生职工中等专业学校琼海５７１４００课堂教学过程，从社会心理学的角度可视为师生间的交往过程。美国教育心理学家林格伦认为：“教师作为课堂上相互交往的中心，应主导师生间的双向交往，使教学获得最佳效果。”那么怎样才能获得...

简介：解剖学是一门重要的形态科学,是每个医学生首先接触的医学基础课程之一.

简介：解剖了27具成人尸体的奇静脉，奇静脉起始于脊柱的右侧或前方，在上行过程中向左侧偏移率达81．48％，其中部分跨过脊柱中线者占59．26％，与一般教科书中描述的沿脊柱右侧上升不一致，这种走行在胸部断层图像检查中奇静脉的定位时应加以注意。

简介：本文对河南洛阳出土的301例成年男性颅骨腭区进行了观察和测量。腭长、腭宽、腭高的均值低于太原、西安人；腭型主要为狭腭型；腭形主要为椭圆形；腭圆枕出现率低，多呈嵴状；腭大孔多位于第3磨牙腭侧，距腭正中缝14.39mm，距硬腭后缘5.51mm。

简介：传统的人体解剖学教学中仅依靠挂图、幻灯片讲述，学生难以理解人体的动态生理过程，难以想象人体的三维结构，教学中存在很大的困难。随着计算机多媒体辅助教学技术在教学领域越来越受到重视，多媒体辅助教学技术以其图文并茂、动静结合、高交互性等优点被广泛运用于解剖学教学。目前，大部分解剖学教师使用PowerPoint制作课件，PowerPoint虽操作简单易懂、设计灵活、使用方便，可以随时对课件内容进行补充或修改，但是课件表现形式死板、单调，尤其反映不出人体的动态生理过程，体现不出多媒体教学的生动性和形象性。为充分发挥多媒体技术在解剖学教学中的优势，弥补传统教学之不足，我教研室采用PowerPoint与3DSMAX相结合的方式制作解剖学课件，实现了人体三维结构和人体动态生理过程的虚拟。

简介：人体解剖学是一门非常重要的医学基础课,属于形态学的范畴,是每个医学生接触最早而又必须学好的医学启蒙学科之一.但是由于人体的结构复杂,使得人体解剖学的名词繁多.所以,对那些刚踏入医学院的学生来说,常常感到听课时难学难记,复习时枯燥无味.为了提高学生的学习兴趣,加深记忆所教授的内容,在解剖学教学过程中,教师常配合所用挂图、模型及标本进行讲课.随着科学技术的发展,再结合应用幻灯片、录像片、摄影片、教学电影片或电脑三维立体成像等,的确可使教学更直观生动,但往往要受到经济、地点、时间、空间等条件的限制,很难满足某些特定的教学要求.为了保证教学质量,我们在解剖形态学的教学中充分而灵活地使用板图法收到了良好的教学效果,深切体会如下:

简介：年青教员在组织学实习的教学过程中，往往显得经验不足，不能适应和顺利完成教学任务。除了教学心理不成熟和知识欠缺之外，笔者认为最重要的因素是教师与学员之间缺少心理沟通。笔者作为年轻教员，在组织学实习的教学实践中有几点体会。首先，与学员初次见面时较为详细的介绍自己，并请同学们用英语自我介绍。不但能和他们交流感情，而且可以增强自信心。其次，提问对答过程的形式应不落俗套。自己在课前准备些诸如“粉刺形成的组织学基础是什么”之类的常识性小问题，课中穿插提问，提高了学员的学习兴趣。再次，一些难以区分的概念如“胶原纤维，肌原纤维，神经原纤维等”和专业英语的记忆方法，让同学们用自己的学习经验办墙报和黑板报列表作图进行对比，同学们深刻地理解和记忆了专业知识。另外，笔者还经常利用实习结束时，给学员们讲我们教研室的科研工作方向以及先进科技方法如原位杂交、激光共聚焦显微镜、膜片钳等，这些知识使同学们学习组织学积极性大大提高。通过实习教学的这些锻炼，笔者的教学心理渐渐趋向成熟，学员们也更好学到了组织学的知识。

简介：医学影像学──年轻的医学学科王峻山川北医学院医学影像学系自１８９５年Ｒｏｅｎｔｇｅｎ发现Ｘ线并首次记录人体影像至今，一个世纪过去了，随着科学技术尤其是电算机的迅猛发展，传统的放射诊断学概念已不复存在。特别是近二十多年来，除传统的显像技术不断改进外，电...