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  • 简介:介导等温扩增技术(LAMP)是一种核酸扩增技术,该方法最大优点是能够在63℃~65℃等温条件下扩增特定DNA序列,并在30~60min内可以观察到结果。LAMP已经成功用于许多病毒检测,本文主要概述与LAMP技术相关最新发展现状,以及国外应用该技术检测食物致病菌、动物病毒、临床微生物等方面进展。LAMP作为一种快速、简便、灵敏、特异,无需贵重检测设备而易普及检测技术,在一些基层实验室、流行病学调查和检验检疫等领域具有广阔应用前景。

  • 标签: 环节异等温扩增技术 快速检测 链置换反应 研究进展
  • 简介:摘要目的通过罗氏固体培养法,对环介导等温扩增技术(LAMP)和实时聚合链反应(RT-PCR)检测痰结核分枝杆菌优劣评价。方法选择临床经罗氏固体培养为阳性痰标本68份,阴性标本68份,分别采用LAMP和RT-PCR方法进行结核分枝杆菌检测结果,两者阳性检出率分别为88.2%.85.3%,两者差异没有统计学意义(P>0.05);培养阳性标本经LAMP、RT—PCR检测结果灵敏度分别为91.2%和82.4%,两者差异没有统计学意义(P>0.05);培养阴性标本经LAMP、RT—PCR检测结果特异性分别为85.3%和88.2%,两者差异没有统计学意义(P>0.05)。结论LAMP检测法阳性率高于RT-PCR法,但两者之间差别尚无统计学意义,LAMP具有简单快速、准确,LAMP检测阳性标本灵敏度比RT-PCR好,LAMP检测阴性标本特异性稍低,LAMP具有简单、快速、准确,不需要昂贵检验设备和严格实验室设置,更适合基层结核病实验诊断推广应用。

  • 标签: PT-PCR技术 LAMP技术 结核分枝杆菌 痰标本
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  • 简介:摘要为探讨聚合链反应(PCR)DNA扩增对诊断活动性肺结核临床价值,本文用PCR技术扩增结核杆菌特有的MPB64蛋白基因序列,对121例病人临床标本进行检测,发现34例活动性肺结核中有28例PCR阳性,疑诊为肺结核者33例中有18例阳性,非结核肺疾患54例中有10例阳性,其中有肺结核既往史者阳性6例,有结核接触史者阳性3例。提示PCR阳性并非为活动性肺结核所特有。

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  • 简介:目的利用根癌农杆菌介导基因转化定点插入突变几丁质合成chsC基因,实现基因失活而构建几丁质合成chsC基因缺失烟曲霉突变体。方法构建根癌农杆菌二元载体pDHt/SK,利用根癌农杆菌介导转化插入突变烟曲霉几丁质合成chsC基因,用潮霉素抗性基因筛选转化子,并进行实时定量逆转录聚合链反应(RT-PCR)鉴定。结果潮霉素抗性基因通过同源重组成功插入烟曲霉基因组中;经RT-PCR鉴定,烟曲霉几丁质合成基因chsC表达失活。结论利用根癌农杆菌介导基因转化可以定点插入突变并失活目的基因,此方法有可能成为烟曲霉基因转化和功能基因组研究有力工具。

  • 标签: 烟曲霉 根癌农杆菌 chsC基因 潮霉素抗性
  • 简介:摘要目的探究采用核酸扩增技术进行血液筛查应用价值。方法选取2013年6月—2014年4月在我献血站进行无偿献血者血液标本32202例,且按筛选方法分为实验组和对照组。实验组采用双试剂酶联免疫吸附试验(ELISA)对血液进行筛查,对照组采用核酸扩增技术(NAT)对血液进行筛查。将两组标本筛查结果进行统计学比较。结果实验组32202例中检出HBVDNA阳性286例,其阳性检出率为1.77%,对照组32202例中检出HBVDNA阳性346例,其阳性检出率为2.15%。结论NAT对HBVDNA阳性检出率明显高于ELISA,不仅避免了血液筛查中漏检情况出现,很大程度上降低了输血传播疾病风险,而且保证了临床上输血安全,值得在临床上推广应用。

  • 标签: 核酸扩增技术 血液筛查 窗口期 输血安全
  • 简介:摘要目的探讨交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中应用效果,为交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中应用提供理论依据。方法选取2014年5月-2016年7月在医院接受治疗60例恶性疟疾患者作为此次研究对象,提取血液样品120份,每例2份,分为观察组和对照组,观察组采用交叉引物等温扩增技术进行检测,对照组采用胶体金技术检测,分析比较两组恶性疟疾原虫灵敏度和特异性检测情况,分析比较两组恶性疟疾原虫密度检测情况。结果观察组灵敏度为71.7%,对照组为63.3%,观察组明显高于对照组,两组之间差异显著,具有统计学意义(P<0.05);两组特异性检测都为100.00%,无差异,不具有统计学意义(P>0.05);恶性疟疾原虫密度区间为10-100、101-1000、1001-10000和10001-100000等,观察组检测情况明显高于对照组,两组之间差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中应用效果显著,能很好检测出恶性疟疾灵敏度和特异性,筛选出感染恶性疟疾患者,适应于恶性疟疾快速检测。

  • 标签: 交叉引物等温扩增技术 恶性疟疾 快速检测 应用
  • 简介:

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  • 简介:疟疾诊断、种类鉴定及治疗后继续采用措施,可能会出现错误,尤其是在血膜没有足够数量疟原虫,而且由未经训练显微镜工作者检验时,由此,各种敏感性较强检查疟原虫基因扩

  • 标签: 基因扩增技术 血膜 卵形疟 种类鉴定 抗疟药 DNA
  • 简介:【摘 要】目的:本次研究多通道荧光探针滚环扩增技术应用在结核分枝杆菌耐药基因检测中应用。方法:通过多通道荧光探针(HEX/FAM/ROX)对滚环扩增产物精准捕获与信号放大,实现对三种突变基因单管多重检测。结果:通过应用多通道荧光探针滚环扩增技术,同一反应体系中中katG315响应范围为1.5 pmol/L至0.1 5nmol/L, rpoB531和rpsL43响应范围为1.5pmol/L至60.0 pmol/L和1.5 pmol/L至25.0 pmol/L,特异度与灵敏度较高,可精确识别单碱基突变;模拟血清样本回收实验中,回收率95.3%-105.5%。结论:多通道荧光探针滚环扩增技术检测具有较高特异性,耗时短,灵敏度高优势,临床应用价值显著。

  • 标签: 多通道荧光探针 滚环扩增 结核分枝杆菌 耐药基因
  • 简介:摘要目的探讨对泌尿生殖道沙眼衣原体(CT)感染进行检测过程中,采用实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)获得效果。方法选取我院2011年10月—2013年10月200例疑似患者,针对所有患者尿样以及拭子标本在同一时间完成SAT检测以及CT培养检测,对检测后表现出差异标本利用PCR方法针对拭子标本实施二次检测,最后由最终检测结果对SAT技术在实施检测过程中具有的敏感性以及特异性进行详细评估。结果对细胞培养以及PCR最终实验结果进行相关性分析,最终分别得出SAT技术在对尿样标本进行检测以及对拭子标本进行检测后分别具有的敏感性以及特异性,仔细分析二者最终检测结果符合率,发现没有显著差异(P>0.05)。结论在对CT试剂盒进行检测过程中采用SAT技术表现出了诸多优点,最终检测结果表现出了较高敏感性以及特异性,临床针对CT检测工作具有重要应用意义。

  • 标签: 实时荧光核酸恒温扩增技术 沙眼衣原体 尿样检测
  • 简介:摘要目的探讨由载体介导靶向hTERT基因RNAi技术对白血病HL-6细胞hTERT基因和细胞增殖影响。方法用已经构建好表达针对hTERT基因siRNA质粒载体,经转染试剂RNAi-Mate转染HL-60细胞;以空质粒、转染试剂及空白组作对照,将转染后24h、72h、120h细胞作为三个实验组,用RT-PCR检测细胞hTERT基因mRNA表达,MTT检测细胞增殖活性。结果三个实验组HL-60细胞hTERTmRNA表达水平低于各对照组,细胞增殖活性抑制率高于各对照组(P<0.05),实验组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);三个对照组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论载体介导靶向hTERT基因RNAi技术能在体外抑制HL-60细胞hTERT基因表达,抑制细胞增殖。

  • 标签: 端粒酶逆转录酶 RNA干扰 HL-60细胞 hTERT基因表达 细胞增殖抑制率
  • 简介:摘要目的探究在中药成分分离提取中技术运用情况。方法对近年来中药有效成分提取中技术运用情况进行分析总结,从而得出了采用果胶、纤维素以及木瓜蛋白对植物细胞细胞壁解情况,探究其在中药提取中应用情况。结果和结论通过对近年来解在各类中药成分提取中应用情况显示其在生物解中应用效果,同时与各项医药领域新技术相结合能够有效运用效用,值得在医药领域中推广应用。

  • 标签: 中药成分 分离提取 酶技术
  • 简介:摘要目的探讨双源CT多平面重组技术在胆道梗阻病变中应用价值。方法对50例临床证实梗阻性黄疸患者行双源CT扫描,薄层数据进行胆道多平面重组,对梗阻原因进行定位、定性诊断,并与手术病理结果进行对照分析。结果良性梗阻病变32例,其中肝外胆管结石27例,单纯炎性狭窄5例,双源CT定性、定位准确率分别为93.75%、100%;恶性梗阻病变18例,其中胰头癌9例,胆管癌5例,胆囊癌侵犯胆管2例,壶腹部癌2例,双源CT定性、定位准确率分别为88.89%、100%,总体50例中定性准确率92%,定位准确率100%。结论双源CT胆道多平面重组技术能够清晰显示梗阻扩张胆道结构,提高对梗阻部位定位、定性诊断率,具有较高临床应用价值。

  • 标签: 胆道梗阻 多平面重组 体层摄影术 X线计算机
  • 简介:城市医疗资源重组倾向已经形成。医疗资源重组基础是医疗服务市场有效运作。资源重组是一把双刃剑,既可能实现医疗资源整体优化,也有可能形成市场垄断。通过资源重组实现城市医疗资源整体优化应是近期卫生改革着手操作任务。

  • 标签: 城市医疗资源 资源重组 医疗服务市场 卫生改革 城市医院
  • 简介:摘要目的通过箱体图法及峰度法对统一数据进行离群值检验,探寻适合转录介导扩增发使用室内质控方法。方法使用外部阳性标准物质,每日随当日血液筛查标本一同进行核酸单人份联检,对检测结果分别进行峰度法和箱体图法群值检验。结果HBVDNA、HCVRNA外部标准物质经检测95次结果,采用峰度法离群值检验分别发生1次、4次和3次离群;采用箱体图法离群值检测分别发生2次、5次和3次离群;外部标准物质检测值离群时诺华内部质控系统未表现出异常。结论使用外部标准物质进行室内质控,可以增强当批次实验结果可靠性;且根据实验检测结果是否离群进行分析,推断实验过程是否发生微小变化,对实验质量体系建立与提高具有重要意义。

  • 标签: 血液筛查 核酸检测 室内质控