简介：摘要：目的：为了深入研究对扩大标准供者供肾移植患者实施西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预后，患者肾功能改善情况。方法：选取我院2017年1月至2021年1月期间收治的扩大标准供者供肾移植患者共42例，将其随机分组，给予西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预措施组为研究组，给予常规干预措施组为参照组，研究组和参照组各21例患者。对比两组患者肾功能改善情况。结果：干预期结束后，研究组扩大标准供者供肾移植患者肾功能改善情况显著优于参照组。差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：临床对扩大标准供者供肾移植患者实施西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预，可有效改善患者肾功能改善情况，故方案值得推广。（病例一年内只有10例患者左右，少之又少，数据需改动）

简介：【摘要】目的：为了深入研究对扩大标准供者供肾移植患者实施西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预后，患者肾功能改善情况。方法：选取我院2017年1月至2021年1月期间收治的扩大标准供者供肾移植患者共42例，将其随机分组，给予西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预措施组为研究组，给予常规干预措施组为参照组，研究组和参照组各21例患者。对比两组患者肾功能改善情况。结果：干预期结束后，研究组扩大标准供者供肾移植患者肾功能改善情况显著优于参照组。差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：临床对扩大标准供者供肾移植患者实施西罗莫司联合低剂量钙调磷酸酶抑制剂干预，可有效改善患者肾功能改善情况，故方案值得推广。

简介：采用碱性角蛋白酶堆置脱毛法对兔皮进行脱毛处理,对脱毛工艺的酶用量、石灰用量、温度等条件进行了优化,得出了最佳的堆置酶脱毛方案。同时对经不同情况处理的毛进行了扫描电镜和强度测试,探究该方法对兔毛质量的影响。实验结果表明,酶用量为皮重的0.05%~0.09%、温度为32℃、时间在4h时堆置酶脱毛,可以有效除去兔皮上的兔毛,并且对脱下的兔毛质量损伤较小,该脱毛工艺可以有效回收兔毛,为兔毛和兔皮的深加工提供原材料。

简介：摘要目的探讨不同浓度过氧化氢(H2O2)对A549细胞组蛋白去乙酰化酶-2(HDAC-2)和丝裂原激活蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。方法选择不同浓度H2O2(0、100、200、400、600、800 μmol/L)干预A549细胞2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h，采用噻唑蓝(MTT)法检测不同干预时间点A549细胞存活率，乳酸脱氢酶(LDH)实验检测不同干预时间点A549细胞生长受抑情况，采用Western blot法检测12 h时HDAC-2和MKP-1蛋白表达水平。结果1．MTT结果显示，不同浓度H2O2干预A549细胞，与对照组(H2O2浓度为0 μmol/L)相比，随H2O2浓度提高，不同干预时间点(2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h)A549细胞存活率均呈下降趋势。2.LDH检测结果显示，不同浓度H2O2干预A549细胞，与对照组(H2O2浓度为0 μmol/L)相比，随H2O2浓度提高，不同干预时间点(2 h、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h)A549细胞抑制率均呈上升趋势。3.不同浓度H2O2干预A549细胞12 h时，随H2O2浓度增加，HDAC-2蛋白表达水平呈浓度依赖性下降(F＝14.588，P<0.01)，MKP-1蛋白表达水平呈浓度依赖性升高(F＝64.297，P<0.01)。结论H2O2可通过调控HDAC-2及MKP-1的表达，参与肺细胞氧化应激性损伤过程。

简介：碱性蛋白酶是指在碱性条件下水解蛋白质肽键的酶类。本实验对一株高产高碱碱性蛋白酶的嗜碱性芽孢杆菌的发酵培养基及发酵工艺进行了优化。确定了发酵培养基所采用的棉籽饼粉最适粒度为80目，麦芽糊精的最佳DE值为30％。并确定了该菌株的最适发酵培养基配方为(g／100ml)：棉籽饼粉3、酵母浸粉1．758、麦芽湖精10、柠檬酸钠0．3、CaCl20．3、K2HPO41；最适摇瓶发酵条件为：

简介：采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白，以水解度（DH）及水解产物对血管紧张素转化酶（ACE）的抑制率为指标进行酶解工艺优化。结果表明，较大活性的ACE抑制肽的最佳水解条件为：pH值7．0，温度50℃，酶底kL4％，底物质量分数为2％。该条件下经60min水解，其水解度为12．23％，得到ACE抑制肽的IC50值为0．85mg／mL。

简介：

简介：随着人们生活水平的提高和现代科技的发展,生物技术越来越多地进入到人们的生活当中.在众多的生物新技术的应用中,酶制剂的应用与人类生活息息相关.自酶被开发以来,酶就对现代家用及工业用洗涤剂的发展和提高起到了极大的推动作用.

简介：摘要目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中的动态表达。方法采用腹腔注射CCl4的方法建立大鼠肝纤维化模型，用HE和Masson三色染色检测大鼠肝脏组织的病理组织学变化，采用免疫组织化学染色、蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR技术检测大鼠肝组织的SHP2蛋白及mRNA表达。多组间均数比较采用单因素方差分析，进一步组间比较采用LSD检验。结果成功构建CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型，随着造模时的延长，大鼠肝纤维化程度逐渐加重。免疫组织化学染色结果显示大鼠肝组织的SHP2主要表达于细胞质，随着肝纤维化程度的加重，SHP2阳性表达的细胞逐渐增多(P < 0.05)。蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR检测结果显示，造模第2、4、6周及第8周不同时间大鼠纤维化肝组织的SHP2蛋白及mRNA表达均高于对照组(P < 0.05),并随着肝纤维化的加重逐渐增高(P < 0.05)。结论CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织中SHP2的蛋白及mRNA表达均随着肝纤维化程度的加重逐渐增高,其增高程度与肝纤维化程度一致。

简介：摘要目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)在睾丸缺血再灌注损伤(IRI)中对GC-1细胞焦亡的作用及其机制。方法建立睾丸GC-1细胞(美国ATCC细胞库)缺氧复氧模型，采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同复氧损伤时间点PTEN的表达变化；分别采用免疫荧光实验、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染PTEN后对GC-1细胞焦亡相关蛋白NLRP3和Caspase-1表达水平的影响。组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果对照组及缺氧复氧组(0、6、12、24 h)PTEN的mRNA表达水平分别为(1.00±0.21、3.48±0.35、3.75±0.38、4.25±0.40、4.06±0.37)。与未缺氧GC-1细胞的对照组比较，随着复氧损伤时间的增加，PTEN表达明显增高，并在复氧12 h达到峰值(F＝43.21，P<0.05)。Western blot结果显示，缺氧复氧组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.52±0.04、0.41±0.04)高于对照组(0.24±0.03、0.20±0.03，t＝9.700，P<0.05；t＝7.275，P<0.05)。过表达PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.75±0.06、0.62±0.05)高于其对照组(0.53±0.04、0.42±0.03)明显(t＝5.284，P<0.05；t＝5.941，P<0.05)。沉默PTEN组中NLRP3和Caspase-1表达水平(0.36±0.03、0.32±0.03)低于对照组(0.52±0.04、0.41±0.03)明显(t＝-5.543，P<0.05；t＝-3.674，P<0.05)。结论PTEN在GC-1细胞中呈高表达，其可能通过改变GC-1细胞焦亡水平，从而影响睾丸IRI的发生发展。

简介：

简介：摘要目的探讨结直肠癌组织(CRC)芯片中蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)、c-Myc的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测44例CRC组织及正常组织中CIP2A、c-Myc的表达，分析CIP2A、c-Myc表达与临床资料及预后的关系。采用χ2检验和Kaplan-Meier法结合Log-rank检验进行。结果CRC中CIP2A、c-Myc阳性率高于正常组织(59.1%、54.6%比25.0%、34.1%)。CIP2A、c-Myc表达与年龄、性别、肿瘤位置和肿瘤分期等因素无明显相关。CIP2A、c-Myc高表达患者比低表达患者5年总生存期低(60.0%、54.2%比73.7%、79.3%)。多因素分析表明，c-Myc高表达是影响CRC的独立不良预后因素。结论CIP2A、c-Myc共同参与CRC的发生和发展，并于肿瘤的恶性程度明显相关。

简介：蔗糖磷酸合成酶（sucrosephosphatesynthase，SPS）是高等植物体内控制蔗糖合成的关键酶之一，它主要通过异构调节和磷酸化修饰在酶水平调节蔗糖合成。本文简要介绍SPS家族的成员、SPS蛋白上的3个磷酸化位点，以及SPS的生物学功能、SPS与磷酸蔗糖磷酸酶的关系等。

简介：摘要目的探讨丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（mitogen-activated protein kinase phosphatase-1，MKP-1）对慢性不可预测性温和应激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）大鼠行为及海马神经元凋亡的影响。方法采用随机数字表法将36只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为对照组（n=8）、CUMS组（n=8）、空载组（n=10）、MKP-1下调组（n=10）。除对照组外，其他各组用来构建抑郁症大鼠模型，其中空载组和MKP-1下调组在CUMS造模之前进行海马CA1、CA3区的腺相关病毒的注射。采用糖水偏好实验、强迫游泳实验及旷场实验观察大鼠行为学变化。采用免疫印迹法检测海马组织中MKP-1、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）蛋白和BCL-2相关X蛋白质（Bcl-2 associated protein，Bax）的表达。采用原位末端转移酶标记技术（TdT-mediated dUTP nick-end labeling，TUNEL）染色法观察海马CA1区神经元DNA断裂情况。采用重复测量方差分析体重和行为学数据，采用独立样本t检验分析蛋白水平。结果与对照组相比，应激后CUMS组大鼠平均体重下降（F=44.664）、糖水偏爱率降低（F=14.978）、强迫游泳不动时间延长（F=8.436）、旷场实验中排便粒数增加（F=9.572），MKP-1、Bax/Bcl-2相对表达水平升高（t=4.415、3.410），差异均有统计学意义（均P<0.05）；与空载组相比，应激后MKP-1下调组大鼠糖水偏爱率增高（F=11.922）、强迫游泳不动时间缩短（F=12.868）、旷场实验中心区停留时间比增加（F=6.291）、直立次数增加（F=14.327），MKP-1、Bax/Bcl-2（t=3.775、6.193）相对表达水平降低，差异均有统计学意义（均P<0.05）；TUNEL染色观察到CUMS组海马CA1区细胞核断裂的DNA数量明显多于对照组，MKP-1下调组细胞核断裂的DNA数量则明显少于空载组。结论下调MKP-1基因可能改善CUMS大鼠抑郁样行为及海马神经元的凋亡。

简介：摘要目的观察西罗莫司联合钙调磷酸酶抑制剂（CNI）治疗糖皮质激素耐药/依赖广泛型慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的疗效和安全性。方法选择糖皮质激素治疗耐药/依赖的cGVHD患者，给予西罗莫司联合环孢素A/他克莫司治疗。结果①入组患者27例，男17例，女10例，中位年龄36（19～56）岁。急性髓系白血病13例，急性淋巴细胞白血病4例，慢性髓性白血病4例，骨髓增生异常综合征3例，淋巴瘤1例，再生障碍性贫血1例，阵发性睡眠性血红蛋白尿症1例。HLA全相合同胞或亲缘供者移植14例，HLA全相合无关供者移植2例，HLA不全相合同胞或亲缘供者移植11例。②患者中位服药时间为14.2个月，中位随访时间20.1（12.9～46.1）个月。③随访6个月时，完全缓解（CR）3例，部分缓解（PR）12例，总反应率（ORR）为55.6％，6个月时无病生存率（PFS-6）、总生存率（OS-6）分别为88.9％（24/27）、100％。④随访12个月时，CR 5例，PR 11例，ORR为59.3％，PFS-12为62.9％（17/27），OS-12为100％。⑤亚组分析发现该方案对男供者的cGVHD更有效，对治疗口腔、皮肤、肝脏cGVHD疗效较好。⑥不良反应：新发高脂血症3例，血糖升高1例，腹胀/腹泻4例，口腔溃疡2例，血尿1例，药物性肝损伤1例，细菌感染3例，真菌感染3例，带状疱疹2例，均为1～2级，无新增巨细胞病毒、EB病毒感染。结论西罗莫司联合CNI治疗糖皮质激素耐药/依赖广泛型cGVHD的疗效及安全性较好，适合cGVHD的长期治疗。

简介：目的探讨磷酸酶和张力蛋白同源基因（PTEN）及磷脂酰肌醇3激酶（P13K）在直肠癌中的表达与临床病理特征的相关性。方法应用免疫组织化学染色MaxVisionTM法检测60例直肠癌、30例直肠腺瘤和10例正常直肠黏膜组织标本中PTEN及P13K的表达情况，并对其表达水平与直肠癌临床病理特征之间的关系进行相关性分析。结果直肠癌组织PTEN阳性表达率明显低于正常直肠黏膜组织和直肠腺瘤组织[43．3％（26／60）比100．0％（10／10）和93．3％（28／30），P〈0．05]，直肠癌组织P13K阳性表达率明显高于正常直肠黏膜组织和直肠腺瘤组织[75．0％（45／60）比30．O％（3／10）和33．3％（10／30），P〈0．05]。PTEN及P13K在直肠癌组织中的表达水平与患者术前癌胚抗原、分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关（P〈0．01或〈0．05），而与患者年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤形态无明显相关性（P〉0．05）。相关分析结果表明，P13K与PTEN阳性表达呈显著负相关（r=-0．269，P=0．023）。结论直肠癌中P13K高表达及PTEN低表达，与直肠癌的侵袭和转移密切相关，监测两者的表达对判定直肠癌生物学行为有一定的价值。

简介：

简介：摘要目的探讨PH结构域且富含亮氨酸重复基序的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶1(PHLPP1)对乳腺癌恶性细胞行为的影响及其机制。方法采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测河南省人民医院2017年6月到2019年6月手术切除的59对乳腺癌组织和配对癌旁组织的PHLPP1蛋白表达水平。采用慢病毒在MDA-MB-231乳腺癌细胞系构建对照和PHLPP1过表达稳定细胞系，分别命名为对照组和实验组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定两组细胞增殖能力；采用凋亡试剂盒检测两组细胞凋亡水平；采用Transwell分析两组细胞侵袭能力；采用异体移植瘤实验分析细胞在体内生长和转移能力；采用Western blot分析两组基质金属蛋白酶3(MMP-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白表达水平。两组间比较行独立样本的 t检验。结果癌旁组织中PHLPP1蛋白相对表达水平(1.54±0.23)明显高于乳腺癌组织 (0.74±0.15)，差异有统计学意义(t＝3.749，P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.98±0.22)明显高于观察组细胞A值(1.06±0.16)，差异有统计学意义(t＝4.082，P<0.05)。对照组细胞体内生长30 d后肿瘤体积[(1 209.43±289.69) mm3]明显高于观察组细胞[(920.43±100.54) mm3]，差异有统计学意义(t＝6.943，P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(4.19±4.90)%]明显低于观察组细胞凋亡比例[(27.33±4.98)%]，差异有统计学意义(t＝3.431，P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(91.49±7.23)个]明显高于观察组细胞迁移数量[(57.18±6.20)个]，差异有统计学意义(t＝5.298，P<0.05)。对照组细胞体内生长30 d后淋巴结转移数量[(19.48±3.99)个]明显高于观察组细胞[(7.19±1.54)个]，差异有统计学意义(t＝6.943，P<0.05)。对照组细胞Caspase-3蛋白相对表达水平(0.86±0.18)明显低于观察组细胞(1.59±0.25)，差异有统计学意义(t＝3.002，P<0.05)。对照组细胞MMP-3蛋白相对表达水平(1.32±0.20)明显高于观察组细胞(0.73±0.17)，差异有统计学意义(t＝3.691，P<0.05)。结论PHLPP1在乳腺癌组织中呈低表达，上调PHLPP1表达水平促进细胞凋亡，抑制细胞生长、侵袭和转移。

简介：摘要目的为了探讨骨碱性磷酶与骨密度B超在佝偻病早期诊断中的效果。方法对我院2008年1月到2011年12月，接诊0～2岁早期疑似佝偻病患儿210例，进行骨碱性磷酶与骨密度B超联合检测。同时，进行左腕关节X线摄片进行对照。结果通过骨碱性磷酶与骨密度B超联合检查，210例早期疑似佝偻病患儿中有202例符合两项诊断标准，确定为佝偻病，早期诊断率为96.19%。通过X线片检查，有200例患儿检查结果异常。X线与这两项检查结果相符率为99.0%。结论联合使用骨碱性磷酸酶检测和骨密度B超早期诊断佝偻病，可以减少单一技术应用时出现的误诊漏诊，为更好地早期诊治佝偻病提供了诊断依据。

简介：目的:探讨碳源对芽胞杆菌碱性纤维素酶(CMCase)合成的影响,揭示酶的阻遏合成规律。方法:采用分批培养法,改变培养基中基质种类及浓度,定时取样测定CMCase酶活(DNS法)和菌体干重(DCW),以比合成作为产酶水平的指标。结果:碳源种类对酶合成水平影响不大。以葡萄糖为碳源培养,4％浓度时酶合成水平最高,≥5％的高浓度下酶合成才有部分被阻遏。ATP、三羧酸循环中间物对酶合成有一定的阻遏作用。结论:芽胞杆菌EV23产的碱性纤维素酶为组成型酶,酶的抗阻遏合成有一定限度。