简介:目的构建白假丝酵母菌天冬氨酸蛋白酶真核表达质粒pcDNA3.1/SAP2.为以其作为基因疫苗进行免疫动物实验奠定物质基础。方法从白假丝酵母菌中提取基因组DNA,以其为模板采用聚合酶链反应(PCR)法获取SAP2基因,将真核表达质粒pcDNA3.1(+)myc-HisC和SAP2基因行EcoRI和XhoI双酶切,琼脂糖凝胶纯化,连接酶切产物,转化TOP10感受态细菌,筛选菌落和测序鉴定。结果经PCR扩增获得的目的基因分子量与预计相同,并定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)myc-HisC,电泳获得预期的SAP2条带,测序证实为正确的SAP2序列。结论利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)myc-HisC可以方便而高效地构建pcDNA3.1/SAP2重组质粒,该质粒能直接激活抗原提呈细胞,可以使重组质粒具有较强的免疫原性和免疫反应性。
简介:目的:检测人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达状况及构建pcDNA3.1-FHIT真核表达载体。方法:RT-PCR法检测三种不同类型人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达,构建真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT,通过酶切法、PCR扩增法和DNA序列分析鉴定重组质粒后,用脂质体转染至FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,经G418筛选后RT-PCR鉴定。结果:FHIT基因在人胃癌细胞系BGC-823中呈阳性表达,在MGC-803、MKN-45细胞系中呈阴性表达。FHIT基因cDNA正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并成功转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45。结论:FHIT基因在不同类型人胃癌细胞系中表达各异。成功构建pcDNA3.1-FHIT,并转染到FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45,使其FHIT基因阳性表达。
简介:国家统计局28日发布的2005年国民经济和社会发展统计公报显示,2005年我国粮食产量达到48401万吨,比上年增加1454万吨,增产3.1%。
简介:【中国驻哈萨克斯坦大使馆经商参处】据哈萨克斯坦央行数据统计显示,2017年7月,哈存款总额为8.57万亿坚戈(约257.29亿美元),环比减少3.1%.其中,法人存款9.69万亿坚戈(约290.92亿美元),环比减少3.6%;自然人存款7.94万亿坚戈(约238.38亿美元),环比增长1.8%.币种方面,法人本币存款5.49万亿坚戈(约164.83亿美元),与上月持平,外币存款4.13万亿坚戈(约123.99亿美元),环比减少7.9%;自然人本币存款3.59万亿坚戈(约107.78亿美元),环比增长1.4%,外币存款4.35万亿坚戈(约130.59亿美元),环比增长2.1%.美元化水平由49.5%降至48.6%.非银行法人坚戈定期存款平均利率为8%,自然人存款利率为12.1%.
简介:目的构建大鼠神经营养因子3(NT-3)基因真核表达载体并观察其在真核细胞内的表达情况。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从大鼠脑组织总RNA中扩增NT-3基因cDNA序列,将其克隆到真核表达载体pcDNA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以阳离子脂质体Li-pofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和westernblot鉴定NT-3在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为822bp的特异片段,重组质粒pcDNA3/NT-3酶切后产生822bp和5.2kb的片段,DNA测序证实822bp片段的碱基序列与大鼠NT-3基因序列完全一致,成功构建了pcDNA3/NT-3重组质粒。将其转染真核细胞后,免疫细胞化学、westernblot结果表明NT-3能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒载体pcDNA3/NT-3,为后续的研究奠定基础。
简介:Afullydifferentialcomplementarymetaloxidesemiconductor(CMOS)lownoiseamplifier(LNA)for3.1–10.6GHzultra-wideband(UWB)communicationsystemsispresented.TheLNAadoptscapacitivecross-couplingcommon-gate(CG)topologytoachievewidebandinputmatchingandlownoisefigure(NF).Inductiveseries-peakingisusedfortheLNAtoobtainbroadbandflatgaininthewhole3.1–10.6GHzband.Designedin0.18μmCMOStechnology,theLNAachievesanNFof3.1–4.7dB,anS11oflessthan–10dB,anS21of10.3dBwith±0.4dBfluctuation,andaninput3rdinterceptionpoint(IIP3)of–5.1dBm,whilethecurrentconsumptionisonly4.8mAfroma1.8Vpowersupply.ThechipareaoftheLNAis1×0.94mm2.