简介：目的：观察不同训练强度对运动员血浆游离DNA（cf-DNA）的影响并探讨其可能机制,以期为运动训练负荷监控提供新型标志物。方法：60名田径运动员随机分为三组：低强度训练组,中强度训练组和高强度训练组,在标准400m跑道上,分别进行60%、75%和90%HRmax（最大心率）强度训练（跑步）20min,测定训练前后cf-DNA、外周血淋巴细胞凋亡率、淋巴细胞促凋亡因子（Bax）和抗凋亡因子（Bcl-2）蛋白的表达。结果：低强度训练组和中强度训练组各指标在训练前后均无显著性变化。高强度训练组训练后即刻,cf-DNA升高了110.0%（102.23±21.37pg/μLvs48.67±12.72pg/μL,P〈0.01）,淋巴细胞凋亡率升高了72.5%（7.16±1.05%vs4.15±0.55%,P〈0.01）,Bax/Bcl-2比值升高了82.6%（0.42±0.10vs0.23±0.07,P〈0.01）。结论：cf-DNA具有训练强度依赖性,可能是运动训练负荷监控与组织损伤早期、敏感的新型标志物;外周血淋巴细胞凋亡参与了高强度训练后cf-DNA的升高。

简介：据统计，我国每年约有100万缺陷儿出生，不但影响了人口素质，也给社会和家庭带来了沉重的经济和精神负担。进行产前筛查和诊断是减少和避免出生缺陷的有效干预手段。传统的产前诊断取材主要包括绒毛、脐血和羊水等，这些胎儿样本均要通过有创性技术获得，增加了感染、流产、早产甚至胎儿宫内死亡的风险。近年来的研究发现在妊娠母体的血浆中存在游离胎儿DNA（cell—freefetalDNA）且含量相对丰富，这一发现为开展无创性的产前诊断提供了新的途径。本文将针对母体血浆中胎儿游离DNA的生物学特性，尤其是在遗传性疾病产前诊断中的研究新进展作一综述。

简介：孕妇血浆中胎儿游离DNA与抗ss-DNA及抗ds-DNA抗体的相关性 ,　　目的探讨孕妇血浆中胎儿游离DNA及抗DNA抗体与子痫前期的相关性,各组孕妇血浆中胎儿游离DNA水平和抗ss-DNA及抗ds-DNA抗体水平比较（略）

简介：目的建立一种孕早早期、简便、快速且无创伤性检测胎儿常见B-地中海贫血突变的导流杂交检测技术，用于B-地中海贫血的产前诊断方法。方法采用PCR技术与低密度基因芯片导流杂交技术相结合，设计3组PCR引物单管多重PCR体系及18种DNA探针，用于快速检测100例妊娠6～14W贫血孕妇血浆游离胎儿DNA中缺失型B-地中海贫血。结果40例贫血孕妇血浆中游离胎儿DNA中，检出10例β-地中海贫血突变，分别为4例杂合子CD41／42（-TTCT），3例-28（A→G），3例CD17（A→T）突变型。结论采用该检测方法能快速准确检测出常见β-地中海贫血的突变，对于防止新的患儿出生、提高人口素质、减轻社会负担有着重要的作用。

简介：摘要目的探讨数字PCR方法检测肺癌患者中血浆游离DNA中T790M突变的效果。方法收集40例经穿刺活检证实存在T790M突变的晚期肺腺癌耐药患者和20例正常人的外周血标本并提取血浆游离DNA，分别采用ARMS法和数字PCR法检测血浆游离DNA中的T790M突变情况。结果40例患者标本中数字PCR法检测到32例T790M突变阳性，ARMS发检测到27例T790M突变阳性。20例正常人标本中数字PCR和ARMS法均未检测到T790M突变。结论数字PCR法可以作为一种新的检测血浆游离DNA中T790M突变的方法。

简介：摘要目的探讨血浆中细胞游离DNA(cfDNA)浓度和cfDNA完整性指标作为一种非侵入性方法用于术前甲状腺癌诊断的作用。方法收集2017年2月至4月郑州大学第一附属医院甲状腺外一科收治的75例甲状腺肿瘤患者血浆，其中良性甲状腺瘤患者31例，恶性甲状腺瘤患者44例，用ALU-荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测良恶性肿瘤患者血浆中cfDNA浓度和cfDNA完整性指标，并比较其在这两组中的差异。用受试者工作特征(ROC)曲线研究将血浆中cfDNA浓度和cfDNA完整性指标作为恶性甲状腺肿瘤诊断的可行性。分类资料的比较采用χ2检验。结果恶性甲状腺肿瘤患者血浆中以ALU115为引物定量的cfDNA总浓度为4 132 μg/L(1 055～9 372 μg/L)，良性组1 491 μg/L(387～3 031 μg/L)；cfDNA完整性指标为0.65(0.56～0.83)，良性组0.39(0.25～0.52)；恶性组均显著高于良性组(P<0.01，P<0.01)。ROC曲线显示当联合超声检查和血浆cfDNA完整性指标对恶性肿瘤进行诊断时，其灵敏度、特异性、准确率、阳性预测值PPV和阴性预测值NPV分别为95.0%、94.0%、95.0%、89.4%和73.0%。均显著高于以超声、cfDNA总浓度和cfDNA完整性指数单独诊断。结论对于甲状腺肿瘤患者，应首先使用甲状腺超声检查，对于怀疑恶性甲状腺肿瘤的患者，血浆中cfDNA完整性指数有助于恶性甲状腺肿瘤的诊断，从而减少细针穿刺病理活检等有创检查。

简介：水环境DNA的研究及应用近年来逐渐被大家所认识。为了探讨水环境DNA浓度是否受季节以及地理位置的影响，该文利用实时荧光定量PCR技术对同一位置不同季节以及同一季节不同位置的南京市玄武湖水中游离DNA的浓度进行了比较与分析。结果发现，不同季节的水样中DNA会存在一定的差异，但是当温度上升到一定水平之后，水环境DNA的浓度便不再受温度的影响而变化；此外，湖水中不同位置的DNA浓度也存在一些差异。可见，水环境DNA的浓度能够较好反映特定水体的季节变化和位置信息，为相关生态环境保护和物种资源调查提供了新的方法和思路。

简介：摘要由致病性拷贝数变异(pathogenic copy number variations, pCNV)导致的基因组病是出生缺陷的一个重要遗传学病因。近年来，随着基于孕妇血浆胎儿游离DNA高通量测序技术的发展、生物信息分析流程的完善以及大样本数据的积累，无创产前筛查(noninvasive prenatal screening, NIPS)胎儿pCNV疾病已开始应用于临床，国内对此技术的规范应用亟需专业的指导意见。基于此，本组专家就筛查的目标疾病和全流程临床规范应用细节达成技术共识，以期达到NIPS筛查pCNV疾病规范应用的目的。

简介：摘要感染性疾病是临床常见疾病，发病率和病死率高，快速明确致病病原微生物，以指导合理的治疗方案仍是临床急需解决的重要课题。随着宏基因组二代测序(mNGS)技术在感染性疾病病原微生物检测方面的广泛应用，血浆游离DNA(cfDNA)mNGS作为一种无创性检测手段在病原微生物检测方面显示出巨大的潜力，成为诊断感染性疾病和指导治疗的新兴手段，但目前仍在研究的早期阶段。本文介绍了血浆cfDNA的生物学特点、血浆cfDNA mNGS在感染性疾病诊断中的研究进展及其在感染性疾病诊断中的应用和挑战。

简介：目的：进一步了解乙肝产妇的母乳中HBVDNA含量及其传染性，更好地指导母乳喂养。方法：利用荧光定时定量PCR检测技术，对45例乙肝血清学阳性的产妇进行血浆及乳汁中HBVDNA的定量检测。结果：45例产妇血浆和乳汁中HBVDNA的检出率分别为73%（33、45）和67%（30、45），其HBVDNA含量的对数值具有良好的相关性，（r=0.837，n=45，P<0.01），HBeAg（+）与HBeAb(+）两组间比较血浆及乳汁HBVDNA的含量，两者存在显著性差异（P<0.01）。HBeAg(+）组含量高于HBeAb（+）组。结论：乳汁和血浆中HBVDNA含量具有较好的相关性，血浆中HBVDNA高拷贝的产妇最好不要进行母乳喂养。产妇血浆中HBeAg与乳汁及血浆中HBVDNA含量都具有明显关系，它的存在提示血浆及乳汁中的HBVDNA含量较高。

简介：摘要目的通过分析孕妇外周血游离DNA（cf-DNA）检测结果的随访资料及相关的妊娠结局，评估cf-DNA检测在产前筛查中的价值。方法收集2011年8月至2017年12月于南京医科大学附属妇产医院进行cf-DNA检测的孕妇的临床资料，包括孕妇的一般情况、cf-DNA检测结果及随访结果。并分析cf-DNA检测结果为常见染色体三体（包括21三体、18三体、13三体）高风险和低风险孕妇的妊娠结局，评价cf-DNA检测的价值，包括敏感度、特异度及阳性预测值、阴性预测值。结果（1）本研究共纳入了43 615例行cf-DNA检测的孕妇，其中44例（0.10%，44/43 615）检测失败；检出结果为常见染色体三体高风险314例（0.72%，314/43 571），低风险43 257例（99.28%，43 257/43 571）。（2）cf-DNA检测结果为常见染色体三体高风险的314例孕妇中，277例（88.21%，277/314）完成随访，其中228例（82.31%，228/277）孕妇接受了侵入性产前诊断为低风险的43 257例孕妇中，36 826例（85.13%，36 826/43 257）完成随访，其中572例（1.55%，572/36 826）妊娠结局不良，包括4例为cf-DNA检测结果假阴性。（3）在完成随访的37 103例孕妇中，21三体、18三体、13三体的敏感度分别为97.96%、96.67%、100.00%，特异度分别为99.96%、99.95%、99.95%，阳性预测值分别为90.57%、63.04%、17.39%，阴性预测值分别为99.99%、99.98%和100.00%。结论cf-DNA检测在胎儿常见染色体三体的产前筛查中具有极高的敏感度和特异度，但仍有一定数量的cf-DNA检测结果为常见染色体三体高风险的孕妇拒绝行侵入性产前诊断以验证cf-DNA检测结果。常见染色体三体低风险的孕妇，因未行侵入性产前诊断，导致部分孕妇出现不良妊娠结局时，无法获得胎儿的染色体核型信息。

简介：摘要器官移植术后移植物排斥反应与损伤的监测一直未能得到很好的解决。细胞游离DNA(cfDNA)是一种可以在血液、尿液等体液中检测到的片段化、降解DNA。移植术后发生排斥反应时体液中cfDNA特异性升高，甚至在穿刺活检病理确诊排斥反应前数周，该指标已显著升高。有研究表明，供者来源细胞游离DNA(dd-cfDNA)水平与移植物损伤的严重程度和敏感度成正比，可能会成为移植术后检测移植物损伤或急性排斥反应的无创性动态指标。本文对cfDNA在器官移植监测中的研究进展作一综述。

简介：摘要目的探讨母体外周血游离DNA（cell-free DNA, cfDNA）检测失败的影响因素及其妊娠结局。方法回顾性选取2017年4月至2019年4月在北京大学第三医院接受cfDNA检测的5 195例孕妇，按照cfDNA首次检测是否得到有效结果分为cfDNA检测成功组（5 107例）及cfDNA检测失败组（88例）。采用Mann-Whitney U检验及χ2检验对比cfDNA检测成功与失败孕妇的临床特征，通过多因素logistic回归分析cfDNA检测失败的危险因素及体重指数（body mass index, BMI）对检测成功率的影响，评估重采血检测的可行性及重采血检测失败的影响因素。结果首次检测失败率为1.7%（88/5 195），失败者中85例选择重采血检测，74例（87.1%，74/85）获得了有效的cfDNA检测结果，11例（12.9%，11/85）仍无有效结果，cfDNA检测最终失败率为0.2%（11/5 195）。多因素回归分析显示孕妇年龄增加（OR=1.086，95%CI：1.023~1.152，P=0.006）、BMI增加（OR=1.083，95%CI：1.021~1.149，P=0.008）及双胎妊娠（OR=3.093，95%CI：1.715~5.577，P<0.001）是cfDNA检测失败的危险因素，而胎儿游离DNA（cell-free fetal DNA, cffDNA）浓度高（OR=0.758，95%CI：0.720~0.761，P<0.001）是检测失败的保护因素。进一步按孕妇采血检测cfDNA时的BMI分组，发现超重组（BMI 25~29.9 kg/m2）和肥胖组（BMI ≥30 kg/m2）孕妇发生cfDNA检测失败的风险分别为正常体重组（BMI 18.5~24.9 kg/m2）的3.626倍（OR=3.626，95%CI：2.298~5.724，P<0.001）和4.064倍（OR=4.064，95%CI：1.779~9.284，P=0.001）。重采血检测的成功率随母体BMI的增加而降低，但与2次采血的时间间隔无关（OR=0.840，95%CI：0.699~1.245，P=0.065）。74例重采血检测获得有效结果的孕妇中，检测结果高风险7例，经羊水细胞染色体核型分析证实1例45,X和1例47,XXY。11例重采血检测失败的孕妇中有8例进行了产前诊断，胎儿染色体核型均正常；其余3例未行产前诊断，但均分娩了表型正常的新生儿。cfDNA检测失败组与成功组间妊娠丢失率差异无统计学意义[9.1%（8/88）与2.5%（128/5 107），P=0.090]。结论孕妇年龄增加、BMI增加、cffDNA浓度低、双胎妊娠更容易发生cfDNA检测失败。肥胖孕妇可以适当推迟采血孕周以降低cfDNA检测的失败率。对于初次检测失败的孕妇，推荐重采血进行cfDNA检测，重采血检测失败或高风险者进行产前诊断。

简介：摘要目的探讨血浆供体来源的细胞游离DNA（donor-derived cell-free DNA，dd-cfDNA）片段在鉴别移植肾T细胞介导的排斥反应（T cell-mediated rejection，TCMR）和抗体介导的排斥反应（antibody-mediated rejection，ABMR）中的价值。方法回顾性纳入2017年12月1日至2019年7月18日在浙江大学医学院附属第一医院经肾活检确诊的移植肾急性排斥反应患者。根据2017年Banff移植肾排斥反应病理分类诊断标准将患者分为ABMR组和TCMR组，后者又分为TCMRⅠ型亚组和TCMRⅡ型亚组。采用二代测序+目标区域捕获的方法检测入选者外周血浆dd-cfDNA水平。比较两组患者人口学及临床病理指标的差异。采用受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC曲线）评价血浆dd-cfDNA和血肌酐水平对鉴别两种移植肾ABMR和TCMR的诊断价值。结果共60例移植肾急性排斥反应患者入选本研究，TCMR组42例，ABMR组18例。ABMR组患者血浆dd-cfDNA百分比较TCMR组显著升高[2.33（1.19，4.30）%比0.98（0.50，1.82）%，P=0.001]；ABMR组dd-cfDNA绝对值亦较TCMR组显著升高[0.94（0.60，2.27）ng/ml比0.43（0.20，0.96）ng/ml，P=0.003]。ROC曲线分析结果显示，dd-cfDNA百分比鉴别诊断TCMR和ABMR的曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.76（95%CI 0.64~0.88），阈值为1.11%，敏感性88.89%，特异性59.52%；dd-cfDNA绝对值鉴别诊断TCMR和ABMR的AUC为0.74（95% CI 0.61~0.86），阈值为0.53 ng/ml，敏感性88.89%，特异性54.76%。TCMR亚组与ABMR组血浆dd-cfDNA水平的比较结果显示，TCMR两亚组间dd-cfDNA百分比及绝对值水平的差异均无统计学意义（均P>0.05）；ABMR组dd-cfDNA百分比显著高于TCMRⅠ型亚组（P=0.008）和TCMRⅡ型亚组（P=0.030）。ABMR组dd-cfDNA绝对值显著高于TCMRⅠ型亚组（P=0.003）。结论血浆dd-cfDNA水平检测对鉴别ABMR和TCMR两种排斥反应类型有辅助诊断价值。

简介：摘要目的设计一种能够基于原有的分析数据、结合游离DNA片段大小及计数的新的分析方法。方法选取180例孕妇血样进行无创产前检测(non-invasive prenatal testing，NIPT)常规的高通量测序，探索游离DNA片段分子量大小与胎儿DNA含量的关系，提出一种新的结合游离DNA片段大小的Z值的算法。以羊水细胞染色体核型分析结果为金标准，比较两种算法的判断结果。结果当以150 bp为分割值时，小分子片段比例与胎儿DNA含量呈正相关。对高通量测序数据用新旧两种算法进行计算，发现基于计数的传统分析的敏感度为75.00%，特异度为98.86%；基于以150 bp为分割点的结合游离DNA片段大小及计数的分析敏感度和特异度在本次实验中都达到了100%。结论在结合游离DNA片段大小及计数的新方法中选取150 bp作为分子大小分割点，可能比传统基于计数的算法更为合理、有效。

简介：摘要胎盘滋养层细胞具有凋亡细胞和胚胎的双重特性，其释放的游离DNA(cell free DNA，cfDNA)存在于孕妇的外周血中，其过程也受到母体因素的影响。妊娠相关的疾病包括子痫前期、妊娠期糖尿病、先兆早产、巨大儿、胎儿生长受限等对产妇生命或妊娠结局造成了严重的威胁，早期筛查和及时干预对降低这类风险具有重要意义。本文就通过产妇外周血cfDNA筛查妊娠相关疾病的研究进展作一综述。

简介：摘要膀胱癌是泌尿系统常见的癌症，目前的诊治方法尚不令人满意。尿液中的游离DNA能够提供关于癌症的全面而重要的信息，因为它携带了来自细胞的遗传信息，这些信息直接流入尿液并从循环中运输。膀胱癌患者的尿游离DNA中携带有肿瘤疾病信息，提示其具有检测、监测以及预测膀胱癌患者的能力。尿游离DNA分析弥补了当前检测技术的不足并加强了诊断和检测能力，在转化为临床实践方面具有非常广阔的前景。本文就尿游离DNA在膀胱癌临床诊治中的应用研究作一综述。

简介：摘要单基因遗传病种类多而复杂，且有不断增长的趋势，总体发病率较高，临床表现各异，通过产前筛查和诊断，及早阻止致死或严重致残的单基因遗传病患儿的出生，是行之有效的防控策略。基于胎儿游离DNA的无创产前单基因遗传病检测技术已应用于临床，检测的疾病种类不断增加，技术也在不断取得突破，本文就该领域的研究进展做一综述。

简介：摘要循环游离DNA的液体活检已经成为评估癌症的辅助方法。由于该方法具有微创、简便等优点，其在乳腺癌的筛查、诊断、监测治疗和预后及耐药性检测等方面的作用日益突出。现对循环游离DNA(cell free DNA，cfDNA)在乳腺癌的临床应用及相关研究进展进行综述。

简介：一项新的研究发现，在行食管切除术的食管癌患者中，循环血液中DNA水平可能有助于衡量切除的完整性，以判断是否存在残余肿瘤或早期复发。