简介:摘要目的构建斑马鱼脑出血模型,并以此筛选诱导斑马鱼脑出血的相关基因。方法通过吗啉代寡核苷酸(MO)技术和单细胞显微注射技术构建斑马鱼脑出血模型,并从宏观、微观角度多重验证。首先,造模实验采用注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼作为对照组,实验组在AB斑马鱼胚胎单细胞时期分别注射神经嵴源性细胞(NCDCs)发育相关基因的MO,包括col8a1 MO、tfap2α MO、msx1a MO、msx2 MO、dkk1a MO等,于显微镜白光视野下初步验证模型。其次,采用Tg(flk1:GFP;gata1:dsRed)双转基因斑马鱼进行模型验证,该转基因鱼用绿色荧光蛋白(GFP)标记血管内皮细胞,用红色荧光蛋白(dsRed)标记血红细胞,能够更清晰地观察到斑马鱼脑出血的部位。在斑马鱼胚胎单细胞时期注射Control MO 作为对照组,注射col8a1 MO作为实验组,正常培养至受精后48 h通过激光共聚焦观察红细胞渗漏情况,构建荧光视野可观察的脑出血模型。最后,采用Tg(flk1:GFP)转基因斑马鱼进行基于血脑屏障的模型验证,通过Dextran-Rhodamin和DAPI染料的渗漏现象进一步明确斑马鱼血脑屏障的破坏与脑出血的发生,并进行定量统计,从而验证NCDCs发育相关基因与脑出血表型的关系,证明造模有效。结果与注射Control MO的正常野生型AB品系斑马鱼对照组相比,col8a1、tfap2α和msx1基因突变的实验组斑马鱼有明显的脑出血现象,出血比例分别为18.18%(52/286)、23.04%(62/251)、35.94%(23/64),而msx2和dkk1a基因突变的斑马鱼极少观察到脑出血,出血比例仅分别为1.03%(1/97)和1.15%(1/87)。注射Control MO与col8a1 MO的Tg(flk1:GFP;gata1:dsRed)双转基因斑马鱼红细胞渗漏发生率分别为0.37%(1/273)与18.18%(52/286)(P<0.001)。注射Control MO与col8a1 MO组Tg(flk1:GFP)转基因斑马鱼DAPI阳性的细胞核数分别为(10.05±5.27)个与(60.35±3.96)个(P<0.001);Dextran-Rhodamin染料渗漏引起的中脑实质荧光示踪强度值分别为2.54±4.70与5.13±3.52(P<0.001),两组比较差异有统计学意义。结论本研究成功构建了斑马鱼脑出血模型,并筛选出col8a1、tfap2α、msx1等诱导斑马鱼脑出血的相关基因。
简介:摘要:随着建筑行业飞速发展,工程建设项目投入越来越大,项目规模也越来越大,工程实施前,需要编制施工总进度计划,施工总进度计划作为工程的进度规划,可为工程施工人力、物资、机械、资金等计划提供参照。编制施工进度计划的软件很多,常见的有excel、project、斑马•梦龙,个人认为利用斑马•梦龙软件编制施工进度计划,既高效又实用,值得推广,下面谈谈如何利用斑马•梦龙软件编制施工总进度计划。
简介:摘要培养学生的质疑能力能够开发学生的创新思维和想象空间,因此教师在教学过程中要运用正确的教学方法从而达到“授之以渔”的目的。当然在质疑教学中还要注意一些问题,以至使课堂教学效果达到事半功倍。
简介:摘要水库养鱼使用传统有机肥与化肥养鱼。这两种肥料来源广泛,易于获得。在利用自然资源、增收节支等方面曾为传统渔业做出过很大贡献。随着“两高一优”(高产、高效、优质)现代渔业的发展,其局限性与缺陷逐渐亦显而易见污染水环境、病害流行、利用率低、鱼类品质差等问题。以高效氮磷源、微量元素、发酵有机物、水质改良剂、有益微生物等为主要成分的生物渔肥,是一种新的生物技术产品。其中部分发酵有机物、生物小肽、氨基酸可以直接被鱼类利用;其它营养成分可培育鱼类喜食的饵料生物;有益微生物大量繁殖形成的有益微生物菌团直接作为鱼类的饵料,生物鱼肥能调节水质、改良底质、提高饲料转化率、提高鱼体免疫力、防止病害发生、避免泛塘。生产实践表明施用生物鱼肥以后,水体的浮游生物量显著增多,鱼类增产、水面增效十分显著。
简介:摘要近年来,随着社会经济的飞速发展,我国电力自动化市场也取得了飞跃式的发展,每个行业对电力的需求量逐渐加大,对其要求也就越来越高,电力调度的重要性也日益被认可和重视。电力调度是一个复杂的系统,电力调度作为电力企业生产运行及处理事故的指挥者和协调者,保障着电网的安全、有效运行,许多发电厂通过输电、变电、配电、供电网络向广大用户供电。但是在电力调度运行中经常会出现许多人为或者不可抗因素造成的事故,无法确保电力的正常运行,所以,加强电力调度运行的安全性、可靠性至关重要,本文简单介绍电力调度,以及当下电力运行过程中所出现的问题,并分析、总结出电力调度安全风险的防范措施。