简介:摘要:新能源汽车的销量在不断增加,新能源的售后市场也越来越大。随着我国新能源汽车保有量的快速提升,新能源汽车的售后维修质量与效率问题日益凸显。对新能源维修技师的技术和人员需求也越大。新能源的控制逻辑越来越复杂、维修难度越来越高。本文深度研究了2019款比亚迪E5动力系统的控制逻辑。为维修人员提供解决故障的整体思路,使维修人员快速的分析故障原因与解决故障问题,提高维修质量和客户的满意度。
简介:摘要:宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一,其致病因子之一是人乳头瘤病毒(HPV)的高风险型感染。HPV E6和E7基因的活化对于宫颈癌的发展起着重要的作用,因此,检测HPV E6/E7 mRNA的表达水平在宫颈癌中的诊断和治疗中具有重要的意义。本文将详细介绍HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌中的研究进展,包括其原理、检测方法、临床应用。
简介:《中国图书馆图书分类法》(简称《中图法》),自1975年出第一版以来,经过两次修订,已于1990年出版了第三版。它的问世是在十多年的图书馆文献分类实践的基础上,进一步加以充实、完善和提高。因此,《中图法》第三版受到了图书馆等文献工作部门的欢迎,它必将促使文献分类工作更趋于科学、准确和统一。
简介:ToleamwhetherHPV16E6/E7genescorrelatewithcervicalcarcinomaandprecancerouslesions.MethodsAmplificationandcloningofHPV16E6/E7geneswereperformedbyPCRandmolecularbiologicaltechniquesfortheirsequences.Cervicalcancer,CINⅡ-Ⅲandcervicitiswereconfirmedbypathologicdetections.ResultsDetectionratesofHPV16E6/E7inbiopsiesofcervicalcarcinoma,CINⅡ-Ⅲandcervicitiswereindividually70%,75%and65%.StatisticresultsshowthatthereisnodifferenceamongtheminHPV16E7detection.AlsotherisnodifferencebetweencervicalcancerandCINⅡ-ⅢinHPV16E6detection,however,bothwerehigherdetectionsthanincervicitisstatistically.ConclusionHPV16E6/E7genescorrelatewithcervicalcarcinomaandprecancerouslesions.E6genemightespeciallyfunctiononoccurrenceofcervicalcarcinomafromprecancerouslesions.
简介:摘要目的研究宫颈鳞癌患者外周血HPV16 E6和E7特异性免疫反应与临床特征和预后关系。方法收集2013—2015年间新疆医科大学附属肿瘤医院经病理明确诊断的72例宫颈鳞癌初治患者,并同期入组75例体检者作为健康对照。采用酶联免疫斑点法检测患者治疗前外周血中经抗原重叠肽E6和E7刺激的T细胞特异性免疫反应。χ2检验和非参数检验分析宫颈鳞癌组和健康对照组的特异性免疫反应的频率和强度表达差异;Spearman法检验抗原特异性免疫反应和T细胞亚群相关性;log-rank法和Cox模型用于单因素和多因素预后分析。结果宫颈鳞癌组HPV16 E6和E7特异性T细胞免疫反应频率均高于健康对照组(51.39%∶29.33%,P=0.006和45.83%∶25.33%,P=0.009),同时免疫反应强度也均高于健康对照组(20.00 SFC/106∶10.76 SFC/106,P<0.001和16.17 SFC/106∶10.72 SFC/106,P=0.017)。宫颈鳞癌组HPV16 E6特异性T细胞免疫反应强度和外周血CD4+/CD8+呈正相关(r=0.279,P=0.018);HPV16 E7抗原特异性T细胞免疫和外周血NK细胞占比和反应强度呈正相关(r=0.274,P=0.020)。单因素和多因素分析均显示治疗模式(放疗与放化疗HR=2.918,95%CI为1.454~5.854,P=0.003)和E6特异性免疫应答(应答与无应答HR=0.491,95%CI为0.243~0.990,P=0.047)是影响患者预后因素。E6特异性免疫应答组患者5年总生存率明显高于无应答组(64%∶41%,P=0.041)。结论HPV16 E6特异性T细胞免疫反应强度与CD4+/CD8+呈正相关,无应答与单纯放疗导致宫颈鳞癌患者预后不良。
简介:摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因,探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象,设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA,sgRNA),将其克隆入CRISPR/Cas9质粒,并应用其将E6、E7基因敲除,随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果,并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒,经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后,可以引发靶点DNA的突变,致使E6和E7基因密码子改变,无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验,pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比,P=0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比,P=0.0007),促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复,细胞的恶性度降低。
简介:摘要目的构建人乳头状瘤病毒(HPV)16 E6/E7基因稳定表达的人永生化角质形成细胞(KC),为研究HPV16 E6/E7诱导的细胞永生化及恶性转化机制提供细胞模型。方法两步消化法分离培养原代人包皮角质形成细胞(HFK),利用慢病毒感染技术对细胞稳定转染HPV16 E6/E7基因,连续培养30代以上,筛选出永生化KC,分为3组:①空白对照组:传代2次的原代HFK;②实验组:传代2次的原代HFK感染LV5-HPV16 E6/E7,感染细胞记录为A0代,感染后以传代次数记录(A1、A2……);③阳性对照组:HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western印迹实验分别检测空白对照组、实验组、阳性对照组HPV16 E6/E7 mRNA、蛋白及CK14蛋白的表达,CCK-8及Transwell Insert方法检测细胞的增殖及侵袭能力。裸鼠致瘤实验检测实验组A30、阳性对照组SiHa细胞的致瘤能力。结果成功分离原代HFK。LV5-HPV16 E6/E7重组质粒感染原代HFK后,空白对照组细胞无荧光表达,连续传代后出现衰老表现,实验组A30细胞体积、形态较原代HFK无明显变化,且荧光表达率为100%。与空白对照组相比,实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E6 mRNA表达水平显著升高(t值分别为7.12、8.07、6.53、5.66;P值分别< 0.001、< 0.001、= 0.001、= 0.005);与空白对照组相比,实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E7 mRNA表达水平也显著升高(t值分别为3.20、4.29、3.75、4.22;P值分别为0.024、0.008、0.013、0.014)。空白对照组未见HPV16 E6/E7蛋白的表达,而A30及SiHa细胞可见HPV16 E6/E7蛋白的表达。CCK-8实验显示,实验组A10、A20、A30细胞增殖水平显著高于空白对照组(t值分别为6.49、7.55、9.43;P值分别为0.003、0.002、0.001),而A1的增殖水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(t = 2.40,P = 0.074)。Transwell Insert侵袭实验显示,A30不能穿过基底膜,SiHa细胞可穿过基底膜被染成蓝色。裸鼠接种A30细胞2个月后无肉眼可见肿瘤,组织学亦显示无肿瘤形成,裸鼠接种SiHa细胞后可于皮下形成肿瘤。结论通过采用慢病毒技术转染HPV16 E6/E7基因成功建立人永生化角质形成细胞,可作为HPV相关研究中的理想细胞模型。
简介:摘要目的探讨在宫颈细胞学ASC-US分流管理中高危型人乳头瘤病毒E6/E7的临床检测价值。方法选择在2016年4月-2017年4月期间来本院妇科门诊进行宫颈TCT检查结果为ASC-US的50例患者作为研究对象,对所有患者采取HR-HPVDNA分型检测与E6/E7mRNA检测,同时进行宫颈活检与阴道镜检查。对HR-HPVDNA与E6/E7mRNA检测结果的特异性与敏感度进行比较与分析。结果对于CIN2+,E6/E7阳性率为52.5%,HPV阳性率为86.9%;对于CIN2-,HPVDNA检测CIN2+敏感度为87.0%,低于HPVDNA敏感度(91.3%),差异无统计学意义(P>0.05);前者特异性为67.5%,高于HPVDNA特异性(25.0%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论E6/E7表达与宫颈病变关系密切,HPVE6/E7mRNA检测可反映病毒的致癌能力,对细胞学检查为ASC-US患者有一定的分流价值。
简介:摘要目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测在液基薄层细胞学检测(TCT)异常的绝经女性宫颈病变筛查中的临床研究。方法本研究为回顾性研究,选取2019年1月至2021年4月北部战区总医院妇产科收治的502例TCT检查结果异常的患者,年龄(56.05±8.46)岁,年龄范围为45~74岁。所有患者进行HPV E6/E7 mRNA、HR-HPV检测及病理检查。结果502例患者的病理结果中,正常及炎症102例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)64例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)320例,宫颈癌16例。HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV在不同病理类型的阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.001),两者在正常及炎症、LSIL中,差异有统计学意义(P<0.001),在HSIL中,差异无统计学意义(P>0.05)。在病理诊断为LSIL及以下中,HPV E6/E7 mRNA的阳性率(53.1%+39.2%)低于HR-HPV(95.3%+66.7%),差异有统计学意义(P<0.001),在HSIL及以上病理结果中,HPV E6/E7 mRNA的阳性率(100%+98.1%)高于HR-HPV(100%+95.6%),差异无统计学意义(P>0.05)。病理诊断在LSIL及以下与HSIL及以上比较,HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率前者低于后者,HR-HPV检测的阳性率前者低于后者,差异均有统计学意义(P<0.001)。HPV E6/E7 mRNA在病理诊断为HSIL及以上病变的特异度[55.4%(92/166)]、阳性预测值[80.9%(330/408)]、阴性预测值[97.9%(92/94)]均高于HR-HPV[22.3%(37/166)、71.4%(322/408)、72.5%(37/51)],差异有统计学意义(P<0.05),灵敏度[98.2%(330/336)]低于HR-HPV[98.8%(332/336)],差异无统计学意义(P>0.05)。结论HPV E6/E7 mRNA与宫颈病变病理诊断高低有相关性,联合TCT检测在绝经后女性宫颈病变筛查中有较高诊断价值。
简介:摘要子宫颈癌是影响全球女性健康的第4大恶性肿瘤,也是我国女性第6位高发恶性肿瘤。绝大多数子宫颈癌及癌前病变是由高危型HPV持续感染引起的。近年来,随着对HPV致癌的分子学机制研究的不断深入,发现HPV E6和(或)E7(E6/E7)基因的激活与子宫颈病变的发生、维持及进展有密切关系,故其作为潜在的治疗靶点受到了学者们的广泛关注。本文从治疗性疫苗、基因编辑治疗、免疫治疗和植物药治疗几个方面综述目前靶向HPV E6/E7基因的治疗在子宫颈癌及其癌前病变中应用的研究进展,希望为临床治疗子宫颈癌及其癌前病变提供新的研究思路和策略。