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  • 简介:目的探讨血小板裂解物体外培养、扩增人骨髓基质干细胞可行性。方法将富含血小板血浆以冻融裂解法处理,培养人骨髓基质干细胞;体系中加入不同浓度裂解物,MTT法检测细胞体外增殖情况;流式细胞仪分析细胞表型特征,并应用细胞化学染色法观察细胞体外成骨和成脂肪能力。结果血小板裂解物培养骨髓基质干细胞呈典型成纤维细胞形态,均一呈现CD14、CD31、CD34、CD45及HLA-DR阴性和CD73、CD90、CD105、CD166阳性,具备体外成骨、成脂分化能力。此外,与经筛选胎牛血清比较,低浓度血小板裂解物即具有支持骨髓基质干细胞扩增能力。结论血小板裂解物可替代胎牛血清,用于骨髓基质干细胞体外扩增

  • 标签: 骨髓基质细胞 血小板 细胞培养 扩增
  • 简介:目的构建以rAAV为载体、GFP为报告基因和HIF-1α为靶基因RNA干扰。方法提取人基因组DNA,PCR扩增人H1启动子,插入载体质粒pAAV-hrGFPCMV启动子前方MluⅠ单克隆位点,构建成pH1—hrGFP;根据HIF-1α有效干扰位点,合成两条分别为58bp互补寡核苷酸链,通过体外退火形成双链,然后插入pH1-hrGFPH1启动子尾部XbaⅠ和MunⅠ位点,构建成pH1—siRNA;将载体质粒pH1-siRNA和辅助质粒pRC、pHelper共转染HEK293细胞,反复冻溶后收集上清,浓缩纯化,电镜观察病毒形态和ELISA法测定病毒滴度。结果构建pH1-hrGFP质粒,通过切、PCR检测以及测序鉴定均正确;构建pH1—siRNA,通过切及测序鉴定也正确;包装rAAV经电镜检测形态正常,滴度达1.2×10^12v.p/mL。结论成功构建了rAAV介导HIF-1α—RNAi表达载体,为今后体内外试验奠定了基础。

  • 标签: 重组腺相关病毒 缺氧诱导因子 小干扰RNA4
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  • 简介:摘要辐射旁效应是指受辐射细胞产生信号,并诱导未受辐照细胞产生反应,即受辐射和未受辐射细胞之间通讯以及这两种细胞内信号转导效应。辐射对肿瘤细胞造成杀伤作用同时,也会产生辐射旁效应给邻近正常组织带来潜在危险。研究发现,电离辐射可直接改变miRNAs表达,并影响未受辐射邻近组织中基因表达,因此,miRNAs可能是受辐射细胞和未受辐射细胞之间信号通路调节重要物质。本文就miRNAs在辐射旁效应中作用进行综述。

  • 标签: miRNAs 辐射旁效应 外泌体
  • 简介:摘要目的观察组织蛋白L(CTSL)阻断前后三氯乙烯(TCE)致敏小鼠肾小球中补体片段3(C3)和内皮细胞损伤相关蛋白表达情况,探讨CTSL在TCE致敏小鼠肾脏损伤中作用。方法于2018年6月,将41只SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组(n=5)、溶剂对照组(n=5)、TCE组(n=15)和TCE+CTSLi组(n=16),建立TCE致敏小鼠模型,通过腹腔注射CTSL抑制剂(CTSLi)对小鼠进行预处理,采用TCE对小鼠进行初次激发和末次激发,根据皮肤致敏反应评分将小鼠分为致敏阳性组和致敏阴性组。于末次激发后72 h检测小鼠肾功能指标,观察小鼠肾脏组织病理学改变情况,并检测肾小球C3和内皮细胞损伤相关蛋白[血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、紧密连接蛋白5(Claudin-5)和多配体蛋白聚糖1(Syndecan-1)]表达水平。结果TCE组和TCE+CTSLi组小鼠致敏率分别为53.3%(8/15)和50.0%(8/16),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。TCE致敏阳性组小鼠血清肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)水平明显高于溶剂对照组和TCE致敏阴性组(P<0.05),而TCE+CTSLi致敏阳性组小鼠血清CRE、BUN水平明显低于TCE致敏阳性组(P<0.05)。TCE致敏阳性组小鼠肾脏可见明显空泡变性及细胞水肿,TCE+CTSLi致敏阳性组小鼠上述病理损害程度明显改善。TCE致敏阳性组肾小球C3片段和VCAM-1表达明显高于溶剂对照组和TCE致敏阴性组(P<0.05),而TCE+CTSLi致敏阳性组C3片段和VCAM-1表达明显低于TCE致敏阳性组(P<0.05)。Western blot检测结果提示,TCE致敏阳性组小鼠肾小球Claudin-5、Syndecan-1蛋白相对表达水平较溶剂对照组和TCE致敏阴性组明显降低(P<0.05)。与TCE致敏阳性组比较,TCE+CTSLi致敏阳性组小鼠肾脏Syndecan-1蛋白相对表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Claudin-5蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05);结论CTSL可能通过切割补体C3,激活补体系统,通过破坏内皮细胞结构蛋白Syndecan-1及过表达黏附分子VCAM-1,介导TCE致敏过程中小鼠肾小球结构和功能损害,抑制CTSL表达可能是保护小鼠肾小球结构和功能完整性有效手段。

  • 标签: 三氯乙烯 组织蛋白酶L 补体片段3 血管细胞粘附分子1 紧密连接蛋白5 多配体蛋白聚糖1
  • 简介:聚合链式反应(PCR)技术问世和发展是分子生物学研究领域中最重要进步之一.在PCR技术中,DNA聚合起着至关重要作用,从某种意义上说,DNA聚合研究进展决定着PCR技术发展趋势和应用范围,研究者们一直在努力探寻着学性能好、保真度高PCR用DNA聚合.高中生物人教版选修1和选修3都对PCR技术原理和过程作了详尽介绍,但对热稳定DNA聚合描述极少,仅仅提及Taq.因此,有必要对PCR用DNA聚合基本类型和特点进行分析归纳.

  • 标签: 聚合酶链式反应 PCR技术 DNA 分子生物学 发展趋势 研究者
  • 简介:传统概念受到挑战,有确凿试验证据证实能作为催化剂还有RNA和DNA。

  • 标签: RNA催化剂 DNA催化剂
  • 简介:一谭方一听说吃饭就开始发憷。前两天,他和一名同事跟随支队长刘成岭到青县公安局指导案件侦破。有刘成岭坐镇和统筹,案件很快就破了。县局摆宴庆功,抒发众将士心中高兴。当晚,县公安局马局长当仁不让在主陪落座,亲热地把刘成岭拉到身边,然后招呼谭方他们就位。马局长催促服务员赶快打开酒瓶,亲自为刘成岭倒上满满一玻璃杯。等马局长酒瓶移过来,谭方忙用手虚掩酒杯,说马局我不会喝酒。

  • 标签: 轻微伤 派出所
  • 简介:摘要:随着我国社会主义市场经济体制不断完善,企业在大政策环境下拥有更多机遇,企业之间兼并重组现象也不断出现,企业重组改制中必须进行资产重组,然而目前资产重组还存在很多问题和风险,本文基于对企业重组改制中资产重组现况及内在问题,提出了具有针对性建议和对策,希望能为资产重组实践提供理论指导意见。

  • 标签: 企业重组 审计 资产重组
  • 简介:摘要目的探究螺旋CT结合重组技术对输尿管结石诊断价值。方法基于本院自2013年7月-2015年7月期间接收60例输尿管结石诊断患者临床资料,按照临床诊断方式不同,随机将这60例患者分为观察组(采用螺旋CT+重组技术诊断方式)和对照组(单纯进行螺旋CT诊断),两组各30例,观察比较两组患者诊断成功率。结果观察组30例患者临床诊断成功率为96.67%,包括29例患者临床诊断无误,1例患者误诊,0例患者漏诊,对照组30例患者临床诊断成功率为63.33%,包括19例患者临床诊断无误,7例患者误诊,4例患者漏诊,两组患者诊断效果差异显著(P<0.05),具有统计学意义。结论螺旋CT结合重组技术对输尿管结石诊断价值在于更加清晰直观显示出输尿管结石具体情况(包括梗阻程度),全面的提升诊断成功率,降低诊断失误。

  • 标签: 螺旋CT 重组技术 输尿管结石 诊断 价值
  • 简介:韩国基础油生产商SK公司于2007年5月下旬进行业务重组,将SK公司分解为SK控股公司和SK能源化学公司,两家公司分别在韩国证券交易所上市。重组未对基础油生产有任何影响。基础油隶属于SK能源化学公司。SK公司子公司包括SK能源化学公司、SK电讯公司、SK网络公司、SKE&S公司、SKC公司、SK造船公司和K-电力公司。SK能源化学公司将注重于其能源、化工、开发和生产业务。

  • 标签: 公司重组 韩国公司
  • 简介:随着政府出台相关企业发展政策增加,企业间竞争越来越激烈,许多企业在竞争中不断更新或被淘汰,债务问题也随之增多,相应解决办法也随之产生。目前,债务重组已变成多数企业解决债务问题主要方法。因此,新会计准则实施对债务重组会计核算提供了理论基础并提出了更高要求。本文首先说明了债务重组内涵和主要重组方式,在此基础上,以举例方式重点探讨了新会计准则下债务重组会计处理。

  • 标签: 债务重组 会计业务 会计核算
  • 简介:业务流程重组(BPR)自20世纪90年代提出后曾一度成为风靡全球管理理论和实践。通过面向客户需求流程重组,很多企业进行了大刀阔斧变革。长城战略咨询结合自身管理实践,认为只有将BPR作为战略管理工具,企业战略引导业务流程,业务流程支持公司战略,最终才能实现企业目标和管理变革。文中探讨了企业商业模式、效率、组织柔性和灵活性与流程关系,提供了BPR典型案例和实施经验。

  • 标签: 业务流程重组 20世纪90年代 企业战略 管理实践 理论和实践 客户需求
  • 简介:英国电信(BT)是英国最大电话公司,1984年由一个国有公司转为私有化以来,一直被看作是此类操作成功楷模之一。然而2001年第一季度财务报告显示,该公司17年来首次出现季度亏损。公司在第三代移动电话网络上过度投资是此次亏损主要原因,其数额达到28亿英磅。英国电信斥资11亿6千万英磅在德国建立移动电话网络,目前亏损额已经达到了30亿美元。在过去一年中,

  • 标签: 英国电信公司 第三代移动电话 财务报告 国有公司 移动电话网络 过度投资
  • 简介:<正>业扩流程分析多年来,业扩流程时间长、环节多、流程复杂、收费透明度不高,一直是客户最关注问题之一,也是影响供电企业增供扩销、提高客户满意度重要因素。业扩报装服务流程时限较长,难以满足客户早投运早生产用电要求,难以对客户需求产生快速响应,不能适应优质服务战略需要,严重影响企业为用户提供更快捷、方便和高质量服务。

  • 标签: 流程重组 增供扩销 供电企业 客户忠诚度 报装 流程创新