简介：摘要目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)在体内外对小鼠全层皮肤缺损创面巨噬细胞表型的调控及对创面愈合相关炎症因子的影响。方法(1)取遵义医科大学附属医院妇产科5名足月分娩健康孕妇产后弃用的新鲜羊膜，酶消化法分离纯化培养hAMSC，取第3代细胞，经成骨、成脂诱导分化鉴定；取第4代细胞，经hAMSC表面标志物鉴定。取10只C57BL/6小鼠(均为雄性，6～8周龄，性别、鼠龄下同)，腹腔灌洗法提取小鼠腹腔巨噬细胞，用含γ干扰素的DMEM培养基培养诱导制备M1型巨噬细胞。将M1型巨噬细胞分为hAMSC＋巨噬细胞组及单纯巨噬细胞组。hAMSC＋巨噬细胞组每孔巨噬细胞加入1×104个第4代hAMSC后加入DMEM培养基2 mL，常规培养；单纯巨噬细胞组每孔巨噬细胞仅加入2 mL DMEM培养基常规培养。于培养1、7 d，酶联免疫吸附测定法检测2组细胞培养上清液中白细胞介素12(IL－12)、精氨酸酶1及IL－10含量(样本数为6)。(2)取56只C57BL/6小鼠，建立背部全层皮肤缺损创面模型，按随机数字表法分为hAMSC组和磷酸盐缓冲液(PBS)组，每组28只。hAMSC组小鼠于创周皮下注射100 μL采用PBS悬浮的含1×107个/mL hAMSC的细胞悬液，PBS组小鼠创周仅注射100 μL PBS。于注射后1、3、7、14 d，2组分别取7只小鼠，处死后行苏木精－伊红染色组织病理学观察，免疫荧光染色检测创面巨噬细胞表面标志物[CD68与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)双阳性、CD68与精氨酸酶1双阳性]表达，实时荧光定量反转录PCR检测创面IL－10、巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP－1α)、MIP－2的mRNA表达。对数据行析因设计方差分析、t检验、Bonferroni校正。结果(1)培养1 d，2组细胞培养上清液中IL－12、精氨酸酶1含量相近(t＝0.448、0.536，P>0.05)，hAMSC＋巨噬细胞组细胞培养上清液中IL－10含量明显低于单纯巨噬细胞组(t＝14.722，P<0.01)。培养7 d，hAMSC＋巨噬细胞组细胞培养上清液中IL－12含量明显低于单纯巨噬细胞组(t＝13.226，P<0.01)，精氨酸酶1和IL－10含量明显高于单纯巨噬细胞组(t＝30.172、31.406，P<0.01)。(2)注射后1 d，2组小鼠创面均有大量炎性细胞浸润；注射后3 d，2组小鼠创面炎性细胞浸润均增多，hAMSC组炎性细胞浸润较PBS组少；注射后7 d，2组小鼠创面炎性细胞浸润均减少，hAMSC组炎性细胞浸润较PBS组少；注射后14 d，2组小鼠创面均未见明显炎性细胞浸润。(3)注射后1、14 d，2组小鼠创面CD68与iNOS双阳性细胞百分比、CD68与精氨酸酶1双阳性细胞百分比相近(t1 d＝0.134、0.693，t14 d＝1.146、2.585，P>0.05)；注射后3、7 d，hAMSC组小鼠创面CD68与iNOS双阳性细胞百分比明显低于PBS组(t＝6.396、4.787，P<0.01)，CD68与精氨酸酶1双阳性细胞百分比明显高于PBS组(t＝3.928、4.473，P<0.01)。(4)注射后1 d，2组小鼠创面IL－10的mRNA表达相近(t＝2.005，P>0.05)；注射后3、7、14 d，hAMSC组小鼠创面IL－10的mRNA表达明显高于PBS组(t＝7.758、124.355、80.823，P<0.01)。注射后1、3、7、14 d，hAMSC组小鼠创面MIP－1α和MIP－2的mRNA表达(0.341±0.212、0.648±0.004、0.611±0.106、0.763±0.049，1.377±0.099、1.841±0.042、1.181±0.035、0.553±0.028)均明显低于PBS组(3.853±0.035、6.914±0.163、3.648±0.113、2.250±0.046，11.119±0.495、8.634±0.092、5.722±0.021、4.862±0.036，t＝43.198、101.904、51.845、58.231，51.074、177.501、291.752、251.614，P<0.01)。结论hAMSC具有促进小鼠全层皮肤缺损创面M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化的生物学效应；可以上调抗炎及抗纤维化因子IL－10的表达，下调重要的炎症反应介导因子MIP－1α和MIP－2的表达。

简介：

简介：摘要目的探讨重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM－CSF)凝胶对手足部Ⅲ度冻伤创面的治疗效果。方法2013年11月—2017年4月，吉林大学第一医院收治45例(共71个创面)符合入选标准的手足部Ⅲ度冻伤患者，对其进行前瞻性随机对照研究。按随机数字表法将患者分为rhGM－CSF组24例(35个创面)和对照组21例(36个创面)。rhGM－CSF组患者中男20例、女4例，年龄(38±13)岁；对照组患者中男19例、女2例，年龄(36±14)岁。2组患者均进行复温、抗炎止痛、抗感染、抗凝、溶栓等全身治疗，rhGM－CSF组患者和对照组患者创面分别外涂rhGM－CSF凝胶和芦荟抑菌胶，每平方厘米创面外涂10 mg，每24小时换药1次，直至创面完全愈合。治疗1、3、7、14 d，对创面炎症反应进行评分；治疗前及治疗6、12 d，取创面分泌物行细菌培养并计算细菌阳性检出率；观察用药后的药物不良反应；记录创面完全愈合时间。对数据行Fisher确切概率法检验、重复测量方差分析、t检验及Bonferroni校正。结果治疗1、3 d，2组患者创面炎症反应评分相近(t＝0.37、2.93，P>0.05)；治疗7、14 d，rhGM－CSF组患者创面炎症反应评分明显高于对照组(t＝5.77、5.83，P<0.01)。治疗前，2组患者创面分泌物细菌培养结果均为阴性。治疗6、12 d，rhGM－CSF组患者创面分泌物细菌阳性检出率分别为5.71%(2/35)、22.86%(8/35)，略低于对照组的13.89%(5/36)、30.56%(11/36)，差异无统计学意义(P>0.05)。rhGM－CSF组患者未出现药物不良反应。对照组患者中1例出现药物不良反应，表现为创面红肿，创周皮肤片状红斑，经生理盐水冲洗后缓解。rhGM－CSF组患者创面完全愈合时间为(12.3±0.5)d，明显短于对照组的(16.5±0.8)d(t＝24.89，P<0.05)。结论外用rhGM－CSF凝胶治疗手足部Ⅲ度冻伤创面可缩短创面愈合时间、减少创面炎症反应，临床应用安全。

简介：[摘要]目的：探讨红外线结合外用重组人粒细胞巨噬细胞刺因子在促进腰椎术后伤口愈合中的应用。方法：选择2022年8月-2023年6月我院腰椎手术患者60例为研究对象，依据研究方法的不同分为对照组和观察组，每组各30例。对照组予以换药治疗，观察组予以红外线结合外用重组人粒细胞巨噬细胞刺因子治疗。比较两组治疗效果。结果：观察组总治疗有效率为96.67%，高于对照组的76.67%（P＜0.05）。结论：红外线结合外用重组人粒细胞巨噬细胞刺因子在促进腰椎术后伤口愈合中的应用效果显著，值得进一步推广。

简介：摘要目的观察脱细胞真皮基质(ADM)对巨噬细胞特征性标志物表达的影响。方法实验分组：A组，巨噬细胞组；B组，ADM(5 μg/μl)与巨噬细胞共培养组；C组，脂多糖(LPS，100 ng/ml)及γ-干扰素(IFN-γ)(10 ng/ml)联合诱导巨噬细胞组；D组，白细胞介素-4(IL-4，10 ng/ml)诱导巨噬细胞组；E组，LPS(100 ng/ml)及IFN-γ(10 ng/ml)联合诱导巨噬细胞后再与ADM(5 μg/μl)共培养组。采用实时反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测不同组巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS)、分化抗原86(CD86)、甘露糖受体(CD206)和精氨酸酶-1(Arg-1) mRNA和蛋白的相对表达水平，组间比较采用t检验，多组间采用单因素方差分析。结果RT-PCR检测结果显示，M1型巨噬细胞标志物iNOS、CD86的表达在C组中最高(2.82±0.07、3.07±0.24，FiNOS＝210.3，FCD86＝85.6，P<0.01)。M2型巨噬细胞标志物CD206、Arg-1的表达在D组中最高(3.30±0.26、3.23±0.32，FCD206＝115.4，FArg-1＝71.2，P<0.01)。B组与A组比较，M1型和M2型巨噬细胞标志物的表达差异无统计学意义(t＝1.706，P>0.05)。E组与C组比较，M1型巨噬细胞标志物iNOS、CD86的表达量下降，分别由C组的2.82±0.07、3.07±0.24下降到E组的2.21±0.10、1.96±0.04；而M2型巨噬细胞标志物CD206、Arg-1的表达量增高，分别由C组的1.01±0.16、0.97±0.16上升到E组的1.87±0.14、1.91±0.14；两组差异有统计学意义(tiNOS＝8.523，tCD86＝7.702，tCD206＝7.028，tArg-1＝7.904，P<0.05)。Western blot检测结果与RT-PCR的检测结果趋势一致。结论ADM有诱导巨噬细胞从M1型向M2型极化的作用。

简介：摘要目的探究白术内酯-1（ATL-Ⅰ）对矽肺患者肺泡巨噬细胞的作用。方法于2019年12月，利用随机抽样的方法，选择2019年7至9月在中国煤矿工人北戴河疗养院进行治疗的12例男性矽肺患者，收集其肺泡巨噬细胞分为对照组、ATL-Ⅰ组（100 μmol/L）以及二甲基亚砜（DMSO）组（100 μmol/L）。采用酶联免疫吸附试验检测炎症因子白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达水平，用蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（LC3）、自噬底物蛋白p62、溶酶体关联膜蛋白2（LAMP2）、凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3和核因子κB（NF-κB）及其磷酸化型（p-NF-κB）的表达水平。结果与对照组和DMSO组比较，ATL-Ⅰ组肺泡巨噬细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的表达明显降低（P<0.05），且p-NF-κB、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值也明显降低（P<0.05）；但ATL-Ⅰ组NF-κB、LAMP2、p62以及Cleaved caspase-3表达与对照组和DMSO组差异均无统计学意义（P>0.05）；对照组与DMSO组的上述指标表达差异均无统计学意义（P>0.05）。结论ATL-1可能减少矽肺患者肺泡巨噬细胞炎症因子的释放，抑制自噬的活性，但未能降低其凋亡水平。

简介：目的通过对维持性血液透析患者血清中巨噬细胞集落刺激因子（macrophagecolonystimulatingfactor，M—CSF）水平及骨密度（bonemineraldensity，BMD）的检测，探讨血清M-CSF水平与维持性血液透析患者BMD的关系，以及影响BMD的相关因素。方法选择华中科技大学同济医学院附属同济医院血液透析中心维持性血液透析患者50例为观察组，另选择健康体检者8例为健康对照组。收集入选者的临床资料包括性别、年龄、血红蛋白、血钾、血磷、血钙、甲状旁腺素、尿素氮、尿酸和血肌酐的情况。用ELISA法检测2组患者透析前血清M-CSF浓度。用骨密度仪检测所有患者BMD，结果以T-Score表示。Spearman分析BMD、M-CSF与各临床指标的相关性。血液透析患者分别按照BMD值分为骨质疏松组、骨量减少组和骨密度正常组，分析不同组别中BMD值与M-CSF的相关性。结果①观察组患者M-CSF水平与健康对照组比较明显升高（P〈0．0001）；Spearman相关性分析发现BMD与年龄呈负相关（r=-0．2756，P=0．0264），与性别（r=0．3701，P=0．0041）呈正相关，女性患者骨质疏松的发生率更高。②观察组M-CSF与BMD进行spearman相关性分析，发现按照T-Score分组后，骨质疏松组M-CSF与BMD呈负相关（r=-0．3842，P=0．0522）；骨密度正常组（r=-0．1324，P=0．3490）和骨量减少组（r=-0．02999，P=0．4501）M-CSF与BMD无明显相关。结论M-CSF与BMD呈负相关，随着血清M-CSF水平的升高，骨密度逐渐下降，骨质疏松发生率增加。维持性血液透析患者血清M-CSF水平升高与患者骨质疏松的发生及进展有关。

简介：摘要目的观察去分化脂肪细胞(DFAT)对巨噬细胞极化的影响。方法分别向培养液中加入脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4)，诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。分离培养C57BL/6小鼠DFAT，并对其进行多向分化诱导，通过油红O染色、茜素红染色进行成脂、成骨干性鉴定，利用Transwell小室将DFAT与巨噬细胞共培养24 h，在显微镜下观察巨噬细胞形态变化，通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测M1型巨噬细胞相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、人巨噬细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)和M2型巨噬细胞相关基因精氨酸酶-1 (Arg-1)、壳酶蛋白(Ym-1)、白细胞介素-10(IL-10)表达量的变化。组间比较采用t检验。结果加入LPS或IL-4刺激，可诱导RAW264.7向M1或M2型巨噬细胞极化。将DFAT细胞与巨噬细胞共培养发现，DFAT细胞可使巨噬细胞的形态发生明显变化，M1组和对照组M0组比较，M1型巨噬细胞相关基因TNF-α的表达显著增高(5.02±0.71比1.00±0.02，t＝5.648，P<0.01)、iNOS的表达显著增高(7.44±1.56比1.00±0.06，t＝4.143，P<0.01)、MCP1的表达显著增高(19.64±2.48比1.00±0.04，t＝7.510，P<0.01)；M2组M0组比较，M2型巨噬细胞相关基因Arg1的表达增高(165.40±45.72比1.00±0.07，t＝3.597，P<0.05)、IL-10的表达增高(6.86±1.91比1.00±0.07，t＝3.055，P<0.05)、YM-1的表达增高(5.17±2.27比1.00±0.03，t＝1.834，P<0.05)；DM1组较于M1组，TNF-α的表达显著降低(0.93±0.40比5.02±0.71，t＝4.979，P<0.05)、iNOS的表达显著降低(1.61±0.83比7.44±1.56，t＝3.302，P<0.05)，MCP1的表达显著降低(2.22±1.27比19.64±2.48，t＝6.244，P<0.05)；而DM2组与M2组比较，Arg-1的表达显著增高(493.10±55.37比165.40±45.72，t＝4.563，P<0.05)、IL-10的表达显著增高(87.84±26.90比6.86±1.92，t＝3.002，P<0.05)、YM-1的表达显著增高(49.11±11.07比5.18±2.28，t＝3.887，P<0.05)。结论DFAT细胞可抑制巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化，促进其向M2型巨噬细胞极化。

简介：摘要目的寻找脓毒症相关性急性肾损伤（AKI）的关键基因，为脓毒症相关性AKI的治疗提供理论和实验依据。方法①生物信息学分析：对基因表达数据库（GEO）中GSE30718和GSE53773数据集进行生物信息学分析，这两个数据集记录了肾移植手术前后对移植肾进行规律性肾活检的基因芯片数据，一部分患者在肾移植后发生了AKI。对两个数据集中AKI相关基因表达差异进行分析，找到在两个数据集中差异一致且受试者工作特征曲线下面积（AUC）较高的基因作为目的基因，进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验：体外培养人近端肾小管上皮细胞株HK2，使用10 mg/L脂多糖（LPS）孵育6 h制备LPS-HK2细胞模型（LPS模型组），并设空白对照组；使用小干扰RNA（siRNA）技术对LPS-HK2细胞中通过生物信息学分析得出的目的基因进行敲减（基因敲减组），并设置基因阴性对照组。采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测HK2细胞中目的基因的表达；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中炎症因子水平；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测细胞中凋亡关键蛋白的表达。结果①生物信息学分析结果：两个数据集间有325个基因呈现相同的表达趋势，其中144个显著下调，181个显著上调，而分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）在两个数据集中表达差异的统计学意义均较大；进一步受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析证实，GSE30718和GSE53773数据集中SLPI表达量对AKI的诊断效能均较大，AUC分别为0.83和0.92。故选择SLPI作为目的基因进行后续细胞验证实验。②细胞验证实验结果：RT-qPCR结果显示，LPS模型组细胞中SLPI表达较空白对照组显著升高（2-ΔΔCT：1.80±0.14比1.00±0.11，P<0.01），变化趋势与生物信息学分析结果相符。进一步敲减SLPI基因分析显示，基因敲减组LPS-HK2细胞培养液中炎症因子水平较阴性对照组显著上调〔白细胞介素-6（IL-6，ng/L）：509.58±27.08比253.87±75.83，IL-1β（ng/L）：490.99±49.52比239.67±26.97，肿瘤坏死因子-α（TNF-α，ng/L）：755.22±48.66比502.06±10.92，均P<0.01〕，说明SLPI可抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应；基因敲减组LPS-HK2细胞凋亡关键蛋白Bax、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达均较阴性对照组显著升高〔Bax蛋白（Bax/GAPDH）：1.38±0.12比1.00±0.10，caspase-3蛋白（caspase-3/GAPDH）：1.44±0.15比1.00±0.11，均P<0.05〕，而Bcl-2表达显著降低（Bcl-2/GAPDH：0.83±0.08比1.00±0.05，P<0.05），说明SLPI可抑制细胞在炎症反应中的凋亡。结论SLPI能抑制LPS诱导的HK2细胞炎症反应和凋亡，可能参与肾小管细胞在脓毒症反应中的保护机制，成为脓毒症相关性AKI治疗的潜在靶点。

简介：1急性肺损伤基本概念急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)是指机体遭受严重创伤、休克、严重感染等打击后,出现的进行性呼吸困难和顽固性低氧血症的综合征。ALI的诊断标准:①急性起病;②低氧血症,PaO_2/FiO_2≤300mmHg;③胸片显示双肺浸润阴影;④肺动脉嵌入压(PAWP)≤18mmHg或临床除外心源性因素。ALI是急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的早期阶段,而ARDS是多器官功能障碍综合征(multipleorgandysfunctionsyndrome,MODS)在肺部的表现和主要组成部分。MODS晚期可发展为多

简介：摘要目的探讨人诱导多能间充质干细胞来源外泌体（iMSC-Exos）对肺泡巨噬细胞（AM）焦亡的作用及机制。方法通过旋转超滤法提取人诱导多能间充质干细胞（iMSC）培养上清液中的外泌体，并利用透射电镜、蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）、高分辨率可调电阻脉冲对提取的外泌体进行鉴定。体外培养大鼠AM细胞株NR8383，取对数生长期细胞分为3组：对照组在AM上清液中加入等量磷酸盐缓冲液（PBS）；脂多糖/三磷酸腺苷（LPS/ATP）组AM经500 μg/L的LPS刺激23 h后再加入5 mmol/L的ATP刺激1 h诱导细胞焦亡；iMSC-Exos组将100 mg/L iMSC-Exos与NR8383细胞共孵育3 h后再给予LPS和ATP刺激。采用细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8）和乳酸脱氢酶（LDH）分析检测细胞毒活性；采用免疫荧光法观察细胞凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1（caspase-1）表达；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测AM释放炎性因子白细胞介素（IL-1β、IL-18）水平；采用Western blotting法检测NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体途径及焦亡相关蛋白消皮素D（GSDMD）表达。结果提取的外泌体经透射电镜观察为圆形囊泡，Western blotting显示外泌体标志物CD63、CD9呈阳性表达，高分辨率可调电阻脉冲检测显示粒子平均直径130 nm，提示外泌体提取成功，能被AM吞噬。与对照组相比，LPS和ATP刺激后，细胞活性下降〔（0.56±0.05）%比（1.06±0.07）%，P<0.01〕，坏死物质LDH释放增加（U/L：1 218.86±22.73比188.30±1.61，P<0.01），炎性因子分泌增加〔IL-1β（ng/L）：958.91±32.78比194.63±5.14，IL-18（ng/L）：870.89±21.86比288.85±24.48，均P<0.01〕，细胞凋亡率〔（55.35±6.19）%比（12.01±1.32）%，P<0.01〕及caspase-1表达均升高（荧光强度：41.06±3.65比2.80±0.54，P<0.01），提示LPS联合ATP可成功诱导细胞焦亡。与LPS/ATP组相比，给予iMSC-Exos预处理后，AM活性增加〔（0.81±0.05）%比（0.56±0.05）%，P<0.01〕，LDH释放减少（U/L：535.05±42.55比1 218.86±22.73，P<0.01），炎性因子分泌减少〔IL-1β（ng/L）：381.82±19.50比958.91±32.78，IL-18（ng/L）：533.77±31.54比870.89±21.86，均P<0.01〕，细胞凋亡率〔（19.74±2.96）%比（55.35±6.19）%，P<0.01〕和caspase-1表达均下降（荧光强度：12.16±1.31比41.06±3.65，P<0.01），同时NLRP3炎症小体途径及焦亡相关蛋白GSDMD表达水平受到显著抑制〔NLRP3蛋白（NLRP3/β-actin）：0.62±0.06比1.89±0.11，活化的caspase-1蛋白（cleaved caspase-1/β-actin）：0.42±0.07比1.22±0.17，GSDMD蛋白（GSDMD/β-actin）：0.57±0.05比1.22±0.05，均P<0.01〕。结论iMSC-Exos抑制了LPS/ATP诱导的AM焦亡和炎性因子表达，可能与靶向抑制NLRP3炎症小体途径有关，提示iMSC-Exos能抑制AM焦亡，发挥抗炎效应。

简介：目的观察低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）诱生的未成熟树突状细胞（GM^lowDC）对异体抗原的摄取能力，以及负载异体抗原后细胞表型和功能的改变。方法对处于增殖期的C57BL／6小鼠单个核细胞（MNC）作氚标记亮氨酸（^3H·Leu）掺入处理，制备^3H—Leu标记的抗原上清液。将此抗原上清液分别与昆明小鼠GM^lowDC和成熟树突状细胞（DC）孵育30、60、90min，检测细胞每分钟放射性荧光闪烁计数（cpm）值；用流式细胞仪检测负载异体抗原前后GM^lowDC表面I^A／I^E、CD80分子的表达情况。分离C57BL／6小鼠的T淋巴细胞，根据加入的刺激因素分组并进行同种混合淋巴细胞反应（MLR）：对照组（不加刺激因素）、GM^lowDC组、GM^lowDC＋异体抗原组、GM^lowDC＋异体抗原＋细胞毒性T淋巴细胞相关抗原41g（CTLA-4Ig）组。检测各组细胞cpm值，计算刺激指数（SI）。结果加入异体抗原上清液后30、60、90min，GM^lowDC的cpm值均明显高于同时相点的成熟DC（P〈0．05或0．01）。负载异体抗原前，GM^lowDC细胞表面I^A／I^B的表达率为（32±8）％．CD80的表达率为（25±10）％；负载后两者分别为（54±10）％、（7l±18）％．均明显升高（P〈0，05或0．01）。MLR：GM^lowDC＋异体抗原组细胞cpm值明显高于对照组（P〈0．05），SI〉2．0；GM^lowDC组以及GM^lowDC＋异体抗原＋CTLA-4Ig组细胞cpm值与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），SI均〈2．0。结论GM^lowDC具有较强的抗原摄取能力，负载抗原后，细胞在表型及功能上渐趋成熟。应用CTLA-4Ig可阻断其免疫应答效应，建立免疫耐受。

简介：摘要目的分析全身型幼年特发性关节炎（SOJIA）合并巨噬细胞活化综合征（MAS）患儿细胞因子谱，探讨其在早期诊断MAS中的临床意义。方法回顾性分析浙江省台州医院2013年1月至2018年3月157例SOJIA患儿的临床资料，其中合并MAS 15例（SOJIA合并MAS组），未合并MAS 142例（单纯SOJIA组）。采用流式细胞微球芯片技术检测患儿外周血白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α和干扰素（IFN）-γ。分析MAS患儿细胞因子谱的特点。结果SOJIA合并MAS组IL-10和IFN-γ明显高于单纯SOJIA组[40.5（7.9，236.9）ng/L比4.1（2.0，98.7）ng/L和55.8（18.5，500.0）ng/L比4.4（1.4，30.1）ng/L]，差异有统计学意义（P<0.01）；两组IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α比较差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析结果显示，SOJIA合并MAS患儿IL-10与IFN-γ呈正相关（r = 0.638，P = 0.011）。受试者工作特征曲线分析结果显示，IFN-γ预测MAS的曲线下面积（AUC）为0.991，95% CI 0.974~1.000，最佳临界值18.45 ng/L，灵敏度为92.5%，特异度为95.1%；IL-10预测MAS的AUC为0.944，95% CI 0.893~0.996，最佳临界值7.75 ng/L，灵敏度为91.7%，特异度为81.7%。结论SOJIA患儿IL-10和IFN-γ明显升高有助于MAS的早期诊断。

简介：摘要目的分析全身型幼年特发性关节炎（SOJIA）合并巨噬细胞活化综合征（MAS）患儿细胞因子谱，探讨其在早期诊断MAS中的临床意义。方法回顾性分析浙江省台州医院2013年1月至2018年3月157例SOJIA患儿的临床资料，其中合并MAS 15例（SOJIA合并MAS组），未合并MAS 142例（单纯SOJIA组）。采用流式细胞微球芯片技术检测患儿外周血白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α和干扰素（IFN）-γ。分析MAS患儿细胞因子谱的特点。结果SOJIA合并MAS组IL-10和IFN-γ明显高于单纯SOJIA组[40.5（7.9，236.9）ng/L比4.1（2.0，98.7）ng/L和55.8（18.5，500.0）ng/L比4.4（1.4，30.1）ng/L]，差异有统计学意义（P<0.01）；两组IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α比较差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析结果显示，SOJIA合并MAS患儿IL-10与IFN-γ呈正相关（r = 0.638，P = 0.011）。受试者工作特征曲线分析结果显示，IFN-γ预测MAS的曲线下面积（AUC）为0.991，95% CI 0.974~1.000，最佳临界值18.45 ng/L，灵敏度为92.5%，特异度为95.1%；IL-10预测MAS的AUC为0.944，95% CI 0.893~0.996，最佳临界值7.75 ng/L，灵敏度为91.7%，特异度为81.7%。结论SOJIA患儿IL-10和IFN-γ明显升高有助于MAS的早期诊断。

简介：摘要目的观察重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶（GM-CSF）。对混合痔微创术后创面促愈合作用的临床效果。方法选择2015年1月-2015年4月贵阳东大肛肠医院收治的进行混合痔微创术患者216例为临床研究对象，随机分为治疗组和对照组，每组108例。治疗后观察两组的疗效和创面愈合时间。结果治疗组伤口的愈合时间为9-13d，平均12d。有效率为96%；对照组伤口愈合时间为10-16d，平均14d。有效率为78%；（P＜0.01）。结论重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶对混合痔微创术后创面促愈合作用好，有助于促进创面愈合，缩短愈合时间，值得推广。

简介：10%大鼠空白组（A组）血清培养,③YHMEC含药血清+LPS组,含药血清对PMФ活力的影响与同浓度的空白血清+LPS组比较

简介：摘要目的探究尿路致病性大肠埃希菌TcpC N端泛素连接酶片段抑制巨噬细胞吞噬的信号通路。方法生物信息学软件分析TcpC N端泛素连接酶片段氨基酸序列结构与功能，并预测其功能位点。PCR扩增tcpc N端不同长度片段tcpc-330、tcpc-450和tcpc-510基因并构建其原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法纯化目的重组蛋白rTcpC-N110、rTcpC-N150和rTcpC-N170；Detoxi-Gel层析柱去除目的重组蛋白中可能含有的LPS。Western blot和实时荧光定量RT-PCR检测rTcpC-N110、rTcpC-N150、rTcpC-N170和rTcpC-TIR分别孵育巨噬细胞后胞内MyD88蛋白水平和mRNA水平。Western blot检测上述蛋白质孵育巨噬细胞后NF-κB信号通路活化情况。ELISA检测上述蛋白质孵育巨噬细胞后促炎因子水平。结果TcpC N端片段氨基酸序列中第12位半胱氨酸、第104位色氨酸和第106位色氨酸是其泛素连接酶活性的功能位点。所构建的原核表达系统在IPTG诱导下能够有效表达rTcpC-N110、rTcpC-N150和rTcpC-N170，Ni-NTA亲和层析法提纯后均仅见单一蛋白质条带。Detoxi-gel亲和层析柱处理后rTcpC-N110、rTcpC-N150和rTcpC-N170中LPS为阴性。TcpC泛素连接酶片段能够抑制MyD88蛋白水平但不影响其mRNA水平。TcpC泛素连接酶片段显著抑制LPS诱导的NF-κB信号通路p50和p65的磷酸化。TcpC泛素连接酶片段显著抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎因子的产生。结论rTcpC-N110、rTcpC-N150和rTcpC-N170具有抑制MyD88蛋白水平和NF-κB信号通路活化功能，与抑制巨噬细胞固有免疫活性密切相关。

简介：目的：研究连接蛋白43(Cx43)基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法：以脂质体介导，将Cx43cDNA转染于内源性Cx43表达缺失的鼠C6胶质瘤细胞和人TJ905胶质母细胞瘤细胞。采用MTT法及AgNORs(核仁组成区嗜银蛋白)平均数检测细胞增殖、。TUNEL法检测细胞凋亡、划痕标记染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯(GJIC)。应用Western蛋白印迹及免疫组化法检测CX43cDNA转染细胞前后若干与胶质瘤发生密切相关的重要生长因子及受体表达，其中包括IGF1、bFGF、PDGF、IGFBP3、EGFR。结果：胶质瘤细胞转染Cx43cDNA后细胞增殖被抑制，细胞凋亡并未增加；GJIC明显恢复。BFGF、PDGF，IGF1、IGFBP3表达显著下调，但EGFR表达无变化。结论：Cx43基因对胶质瘤细胞增殖的抑制作用与GJIC恢复以及bFGF，PDGF，IGF1，IGFBP3表达下调相关，CX43可望成为胶质瘤基因治疗的靶基因。

简介：本研究探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体α（pemxisomeproliferator-activatedreceptor-α,PPARα）的激动剂对单核细胞株THP-1中组织因子（tissuefactor，TF）表达的影响。用不同浓度的PPARα激动剂非诺贝特（fenofibrate）预处理单核细胞THP-1一定时间，然后分别用RT-PCR和Westernblot法检测由细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的单核细胞TFmRNA和蛋白质表达水平。结果显示：非诺贝特减少了LPS诱导的人单核细胞TFmRNA和蛋白质的表达，并呈剂量依赖性（P〈0．05-0．01）。结论：非诺贝特抑制了THP-1中LPS诱导的TF表达，此机制可能参与了PPARα激动剂的抗动脉粥样硬化作用。

简介：摘要目的探讨高糖环境下基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对巨噬细胞生物学功能的影响及其机制。方法体外建立RAW264.7巨噬细胞系，细胞计数试剂盒(CCK-8)检测SDF-1对巨噬细胞的毒性。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测高糖(22.5 mmol/L)和正常糖(5.5 mmol/L)对巨噬细胞相关蛋白表达的影响。实验分组：A组(对照)、B组(SDF-1)、C组(磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路抑制剂：LY294002)、D组(SDF-1+ LY294002)，Transwell实验检测巨噬细胞的迁移能力，Western blot检测各组相关蛋白的表达变化。两组间比较采用非配对t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果CCK-8实验结果显示，各组间比较差异无统计学意义(F＝0.464，P>0.05)。高糖组巨噬细胞SDF-1、血管内皮生长因子(VEGF)、SDF-1的特异受体(CXCR4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达低于正常糖组(SDF-1、VEGF、CXCR4、MMP-9组间比较，t＝50.510、11.020、27.660、55.350，均P<0.05)。Transwell实验中，A、B、C、D组迁移巨噬细胞数分别为(86.630±4.096)、(144.300±5.044)、(59.000±2.646)、(65.670±4.256)个。与A组比较，B组及C组差异有统计学意义(t＝21.460、5.574，均P<0.05)。此外，SDF-1可以增加巨噬细胞CXCR4、PI3K、蛋白激酶B(Akt)、MMP-9、VEGF的表达，而LY294002可以减少上述蛋白的表达(Western blot检测各蛋白，B组：CXCR4、PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝44.690、5.393、4.640、13.250、8.551，均P<0.05；C组：PI3K、Akt、MMP-9、VEGF组间比较，t＝13.430、5.287、4.381、45.510,均P<0.05)。结论高糖环境可以影响巨噬细胞SDF-1、VEGF、CXCR4及MMP-9的表达，SDF-1可能通过上调PI3K/Akt通路促进巨噬细胞分泌MMP-9及VEGF。