简介:作为一个模式植物,烟草在植物分子生物学研究中发挥着重要的作用。总RNA的提取质量,对于基因表达、基因克隆、cDNA文库建立、RNA原位杂交以及转基因材料鉴定等分子生物学基础研究至关重要。尤其在进行基因克隆及cDNA文库时,只有高质量的RNA,才能保证cDNA第一链合成的完整性。由于烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的含量较高,因此,在应用TRIzolRNA提取试剂盒进行烟草总RNA提取时,所提取的RNA产物中的蛋白质及多糖等杂质含量偏高。因此,针对这一问题,我们对TRIzol法进行了改进,并获得了高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测,利用该方法提取的烟草总RNA,条带清晰、无拖尾现象,28S与18S的比例约为2:1。紫外吸收值的测定表明,所提取的烟草总RNA的A260/A280的值基本达到了1.9以上,说明所提取的RNA的质量较高,可广泛应用于基因的克隆及基因的表达研究。
简介:为研究不同施肥处理条件下烤烟氮磷钾吸收积累规律,进行了田间随机排列试验,结果表明,有机无机配施处理烤烟氮、磷、钾积累量分别为130.64kg/hm2、27.35kg/hm2、230.03kg/hm2,单施有机肥分别为67.25kg/hm2、14.31kg/hm2、114.7kg/hm2,不施肥处理分别为40.08kg/hm2、10.14kg/hm2、82.46kg/hm2。不同施肥处理烟株氮磷钾积累强度均在移栽后60-75d达到最高值。烟株氮、磷、钾在根、茎、叶器官分配顺序:叶〉茎〉根,叶的积累量大于茎、根积累量之和。每生产100kg干烟叶,不施肥处理氮、磷、钾需要量分别为2.63kg、0.65kg、5.31kg,单施有机肥处理分别为3.16kg、0.67kg、5.14kg,有机无机肥配施处理分别为4.26kg、0.89kg、6.65kg。
简介:采用传统统计学、GIS和地统计学的方法分析河南省1982和2009年土壤全磷的时空变异特征。结果表明:1)研究区2个时期土壤全磷半变异函数拟合模型均为球状模型,均存在中等空间相关性;2)土壤全磷平均质量分数由1982年的0.56g/kg增加为2009年的0.66g/kg,增幅为17.86%,平均年增长水平为0.66%,其中豫东地区由0.65g/kg变为0.83g/kg,增幅27.69%位居全省第1位,豫南地区以6.12%增幅最低;3)主要土类中,全磷质量分数以主要分布在平原区的砂姜黑土、水稻土和潮土的增幅最大,增幅分别为29.55%、29.27%和18.46%,主要受秸秆还田以及施用有机肥等人为活动的影响,此外,黄棕壤中全磷平均质量分数有所下降,下降幅度为6.45%。
简介:随着大量生物领域科研人员进入植物RNA研究领域,开展RNA研究,使得以RNA为终产物的基因组研究取得突破性进展,新的RNA基因不断增加,RNA的新功能不断被发现。但由于RNA的不稳定性,使得RNA操作远比DNA操作困难,且尚有大量未知的RNA及其功能等待人们去探索、研究.而这些研究又都基于高质量RNA的提取。因此,根据笔者自身实验经验,及在查阅大量相关文献的基础上。针对植物总RNA提取的一些关键影响因素、消除对策、RNA检测方法及RNA保存方法上进行了系统的阐述,旨在为高质量植物组织总RNA的制备提供理论参考,为RNA分子生物学实验后续研究提供理论支撑。
简介:采用分光光度法,测定沙棘叶中总黄酮的含量,检测波长为415nm。经计算得到芦丁标准曲线的回归方程为y=8.3684×C+0.0049,相关系数R2=0.9996,精密度和稳定性试验的RSD分别为0.040%(n=6)和0.138%(n=6),平均回收率为99.05%,RSD为1.28%(n=5),样品的稳定性试验RSD为1.201%(60min)。此法操作简便,结果准确,灵敏度高,重复性好,是沙棘叶中黄酮含量测定的切实可行方法。结果表明,大通县沙棘叶鲜重总黄酮含量为95.87mg/g,高于其他研究人员对沙棘叶总黄酮含量的所有报道;与见报的其他植物叶片中总黄酮的含量相比,大通沙棘叶总黄酮含量也较高。
简介:以抗坏血酸(VC)和叔丁基羟基茴香醚(BHA)做阳性对照,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(OH·)、超氧阴离子自由基(O2^-·)、还原力、总抗氧化能力、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)阳离子自由基和脂质过氧化抑制能力体外抗氧化活性模型,评价费菜总黄酮的抗氧化活性。结果表明,费菜总黄酮的抗氧化活性随着黄酮浓度的增加呈上升趋势。在高浓度时,费菜总黄酮的DPPH·清除率、OH·清除率及亚铁还原能力试验(FRAP)值均显著大于BHA;当费菜总黄酮浓度高于54.8μg·mL^-1时,对DPPH·的清除率极显著大于VC;当浓度为48.6-68.0μg·mL^-1,OH·清除率与VC差异不大。此外,其他抗氧化指标在测定范围内活性均显著小于VC。费菜总黄酮具有较强的抗氧化活性,可作为健康食品原料开发及利用。