简介:TheeventhappenedintheearlymorninghoursinoneofthefirstdayswhenCalvinCoolidgecameintopower,lateinAugust1923.Heandhisfamilywerelivinginthesamethird-floorsuite(套房)attheWiUardHotelinWashingtonthattheyhadoccupied(住)duringhisvicepresidency(副总统).TheformerPresident'swifewasstilllivingintheWhiteHouse.
简介:MinisterHuangYichengmetwithaseniorAustraliandel-egationheadedbytheHon.SimonCrean,MP,SecretaryofCommonwealthDepart-mentofPrimaryindustries&Energy(DPIE)onAugust8.TwotopleadersinenergysectorsofbothcountriesrecalledwithpleasurefruitfulcooperationachievedafterthesecondChina/AustraliaJointWorkingGrouponEnergymeetingheldlastNovem-
简介:AmissionofHongKongChinaLight&PowerCo.headedbySirWilliamsStones,ManagingDirectorpaidavisittotheMinistryofEnergylastOctoberandwasreceivedbyMr.HuangYicheng,MinisterofEnergy.Duringthemeeting,issuesofcooperativeprojectsbothunderwayandinfuturewerediscussed.Bothsidesagreedthatbetterunder-standingandcooperationoverDayaBayNuclearPowerStationshallcontinuetobemaintainedinordertospeedupandsmoothenitsprogressandtowellprepareforitsfuturecom-
简介:OnMarch19,YuPing,ViceChairmanofCCPITmetaeconomicdelegationledbyDr.AloisRhiel,MinisterofEconomics,Transportation,UrbanandRegionalDevelopmentoftheStateHessen,Germany.ViceChairmanYuPingwelcomedMinisterAloisRhiel'svisittoChina.YuPingsaid,HessenisoneoftheeconomiccentersinGermany,famousforthechemicalandmanufacturingindustries,welldevelopedinfinanceandexhibitionindustries.
简介:摘要目的初步探究PTPRZ1-MET融合基因(ZM)阳性脑胶质瘤细胞(U87-ZM)对MET靶向抑制剂—PLB-1001的耐药机制。方法取U87-ZM细胞,用含有PLB-1001的培养基培养48 h,获得U87-ZM+PLB-1001细胞;培养4个月获得U87-ZM-LT细胞。采用CCK-8法检测U87-ZM和U87-ZM-LT细胞对PLB-1001的敏感性,采用EdU细胞增殖检测法评价U87-ZM+PLB-1001和U87-ZM-LT细胞的增殖活性。采用蛋白质免疫印迹法(WB)评价PLB-1001对U87-ZM和U87-ZM+PLB-1001细胞的抑制效应及各组细胞的细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞Cyclin D1 mRNA的表达水平。结果WB结果显示,U87-ZM与U87-ZM+PLB-1001细胞p-MET蛋白的相对表达量分别为1.22±0.06和0(P<0.05),MET总蛋白的相对表达量分别为1.00±0.06和0.98±0.09(P=0.810)。CCK-8检测显示,PLB-1001对U87-ZM细胞和U87-ZM-LT细胞均具有生长抑制作用,且该抑制作用随PLB-1001浓度的增加而增强,其中U87-ZM细胞的半抑制浓度(IC50)为(13.42±0.74) μmol/L,U87-ZM-LT细胞的IC50为(40.76±1.20) μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。EdU细胞增殖检测显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞中EdU阳性细胞的百分率分别为(23.10±4.32)%、(21.28±1.22)%,均高于U87-ZM+PLB-1001细胞中的(10.25±3.40)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。WB结果显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞Cyclin D1蛋白的相对表达量分别为1.08±0.06、0.94±0.15,与U87-ZM+PLB-1001细胞的0.66±0.08比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。qRT-PCR检测显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞Cyclin D1 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.00、1.14±0.21,与U87-ZM+PLB-100细胞的0.92±0.15比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论相较于PLB-1001短期处理的U87-ZM细胞,PLB-1001长期处理的U87-ZM细胞具有更强的DNA合成活性;U87-ZM细胞对MET靶向抑制剂的耐药机制可能与Cyclin D1蛋白增加有关,可针对该通路深入探索逆转肿瘤耐药的可行方案。
简介:摘要目的初步探究PTPRZ1-MET融合基因(ZM)阳性脑胶质瘤细胞(U87-ZM)对MET靶向抑制剂—PLB-1001的耐药机制。方法取U87-ZM细胞,用含有PLB-1001的培养基培养48 h,获得U87-ZM+PLB-1001细胞;培养4个月获得U87-ZM-LT细胞。采用CCK-8法检测U87-ZM和U87-ZM-LT细胞对PLB-1001的敏感性,采用EdU细胞增殖检测法评价U87-ZM+PLB-1001和U87-ZM-LT细胞的增殖活性。采用蛋白质免疫印迹法(WB)评价PLB-1001对U87-ZM和U87-ZM+PLB-1001细胞的抑制效应及各组细胞的细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组细胞Cyclin D1 mRNA的表达水平。结果WB结果显示,U87-ZM与U87-ZM+PLB-1001细胞p-MET蛋白的相对表达量分别为1.22±0.06和0(P<0.05),MET总蛋白的相对表达量分别为1.00±0.06和0.98±0.09(P=0.810)。CCK-8检测显示,PLB-1001对U87-ZM细胞和U87-ZM-LT细胞均具有生长抑制作用,且该抑制作用随PLB-1001浓度的增加而增强,其中U87-ZM细胞的半抑制浓度(IC50)为(13.42±0.74) μmol/L,U87-ZM-LT细胞的IC50为(40.76±1.20) μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。EdU细胞增殖检测显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞中EdU阳性细胞的百分率分别为(23.10±4.32)%、(21.28±1.22)%,均高于U87-ZM+PLB-1001细胞中的(10.25±3.40)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。WB结果显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞Cyclin D1蛋白的相对表达量分别为1.08±0.06、0.94±0.15,与U87-ZM+PLB-1001细胞的0.66±0.08比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。qRT-PCR检测显示,U87-ZM、U87-ZM-LT细胞Cyclin D1 mRNA的相对表达量分别为1.01±0.00、1.14±0.21,与U87-ZM+PLB-100细胞的0.92±0.15比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论相较于PLB-1001短期处理的U87-ZM细胞,PLB-1001长期处理的U87-ZM细胞具有更强的DNA合成活性;U87-ZM细胞对MET靶向抑制剂的耐药机制可能与Cyclin D1蛋白增加有关,可针对该通路深入探索逆转肿瘤耐药的可行方案。
简介:摘要非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中MET异常(MET alteration)包括MET基因第14号外显子跳跃突变(MET 14跳突)、MET基因扩增、MET基因点突变(主要是激酶区突变)、MET基因融合及MET蛋白过表达等。NSCLC患者中MET 14跳突的发生率为0.9%~4.0%,目前国内外已有针对MET 14跳突的靶向药物获批上市,晚期NSCLC患者应进行包含MET 14跳突的检测以筛选MET抑制剂靶向治疗获益人群;原发MET基因扩增在NSCLC患者中的发生率为1%~5%,继发MET基因扩增在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)耐药患者中发生率为5%~50%,在间变性淋巴瘤激酶TKI耐药患者中发生率约为13%;MET蛋白过表达在NSCLC患者的发生率为13.7%~63.7%。关于MET基因扩增和MET蛋白过表达的多项临床试验正在进行中,显示出其在MET抑制剂临床治疗中作为生物标志物具有重要指导价值。准确检测MET异常是实施MET抑制剂治疗的前提,因MET异常形式和检测方法多,临床检测中面临的问题和挑战多,故需进一步梳理和规范。本编写组结合临床实践经验、文献阅读并组织专家讨论,针对MET异常的3种主要类型(MET 14跳突、MET基因扩增和MET蛋白过表达)制定了本共识,以期指导临床MET检测的实践。
简介:摘要目的研究温石棉对人胸膜间皮细胞MeT-5A细胞毒性与诱导细胞恶性转化的能力。方法于2016年6月,采用乳酸脱氢酶(LDH)法检测温石棉对MeT-5A细胞的细胞毒性;以5 μg/cm2温石棉间断染毒MeT-5A细胞,24 h/次,每周一次,共28次,待细胞呈现锚着不依赖性生长后,用软琼脂集落形成试验判断细胞恶性转化,并计算软琼脂集落形成率,紫外比色法测定糖代谢过程中的关键限速酶活性,包括丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)和己糖激酶(HK)。结果温石棉对MeT-5A细胞具有细胞毒性,细胞相对存活率呈浓度依赖性下降。与未染毒时相比,10、20、40、80 μg/cm2温石棉染毒后MeT-5A细胞相对存活率显著下降(P<0.05)。染毒28次后,温石棉转化组细胞生长速度加快、排列紊乱,失去接触抑制,出现叠层生长,并可在软琼脂上生长,细胞集落形成率为18.33‰±2.49‰,与对照组(0)比较,差异有统计学意义(P<0.01);温石棉转化组细胞PK[(19.51±1.52)U/L]、PFK[(0.12±0.02)U/104个细胞]和HK[(0.26±0.01)U/104个细胞]酶活性水平高于对照组细胞[(25.00±1.04)U/L、(0.15±0.01)U/104个细胞和(0.33±0.01)U/104个细胞](P<0.01)。结论温石棉可诱导MeT-5A细胞发生恶性转化,并升高细胞糖酵解相关激酶PK、PFK、HK酶活性水平。