简介：

简介：小型猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类相似，是人类医学研究的理想模型动物。然而，由于小型猪（尤其是我国自行培育的小型猪）在实验操作过程中不配合，成为限制其应用的主要因素之一，另一方面，由于实验操作的不规范，也常常引发动物的应激反应，并造成实验数据变异增加。以下结合本实验室的应用经验，介绍小型猪的基本实验操作技术。

简介：本文对药物代谢研究中应用实验动物小型猪的进展进行综述。从用于药物代谢研究小型猪的动物品系、小型猪的应用基础研究以及小型猪具体的应用领域,详细介绍了该类实验动物品种在国内外应用研究进展。

简介：动脉硬化（arteriosclerosis）泛指动脉变硬，由于形态特征不同分为三种疾病，动脉粥样硬化是最主要的一种动脉硬化疾病，其病灶累及弹性动脉和较多弹性纤维的肌性动脉，典型的动脉粥样硬化病灶内含有大量的脂质和坏死细胞构成的“粥样”成分。另两种动脉硬化疾病分别为门克伯格氏中膜钙化性硬化（Mfinckebergmedialcalcificsclerosis）和微（小）动脉硬化（arteriolosclerosis）

简介：2010年1月8～11日，广州-东莞首届国际小型猪学术论坛在南方医科大学隆重举行，本次会议由广东省科技厅主办，南方医科大学（原第一军医大学）、广东省实验动物学会、中科院广州生物医药与健康研究院承办。参加此次学术论坛的国内、外专家学者近300多人，分别来自国内28省（自治区、直辖市）和丹麦、菲律宾、加拿大等国。中国实验动物学会常务副理事长兼秘书长秦川教授、中国科技部实验动物项目管理办公室荣瑞章研究员到会祝贺。

简介：分析鉴定ApoCⅢ转基因阳性小型猪.从仔猪尾中提取基因组DNA,通过PCR和Southernblotting等手段进行鉴定;从仔猪肝、小肠、心、肾、肺、脾、胃以及皮肤等冰冻组织以Trizol法提取RNA,以RT-PCR手段进行检测分析.经过对18头仔猪进行PCR分析,显示其中的15头含有人ApoCⅢ基因,随后的测序和Southernblotting亦证实,猪的基因组中已经整合有人ApoCⅢ基因.RT-PCR证实人apoCⅢ基因已经在转基因小型猪的肝脏和小肠中进行了翻译.本研究成功制备了人ApoCⅢ转基因小型猪,可作为高脂血症与动脉粥样硬化疾病之间关系很有价值的研究模型.

简介：随着对小型猪研究的不断深入,其作为人类疾病模型的优势越来越明显,在生物医学研究中的应用数量也越来越多。但是,小型猪在我国的应用时间不长,实验操作上有一定难度,影响了小型猪应用的推广。解放军总医院医学实验动物中心在国家＂十五＂科技攻关项目的支持下建设了小型猪实验应用的基本条件,探索形成了一套实用的小型猪基本实验操作技术。于2008年5月15日至17日在北京与中国实验动物学会联合举办了-小型猪在医学研究中的应用培训班,来自全国从事实验动物学、临床医学、基础医学、畜牧兽医等相关专业工作的50余人参加了培训。本次培训目的旨在普及推广小型猪在医学研究中的应用,发挥我国小型猪品种资源优势,促进交流和合作,推动原创性研究。会议内容涉及我国小型猪的应用进展、小型猪在毒理学研究、口腔医学研究异种移植、人类疾病的小型猪模型及小型猪实验操作等方面。应广大读者要求,征得作者同意,本刊陆续刊出,以飨读者。

简介：很早以前，人们就认识到，人体健康或生命之所以不能维持，往往不是机体所有器官受到损害，而是由于部分组织或个别生命重要器官丧失功能所致，因而产生了更换受损组织或器官的设想。为了实现用新的器官替换功能低下器官的愿望，19世纪的欧洲即已开始尝试器官移植的相关实验研究。然而，人源供体器官异常短缺，许多患者在等待器官的过程中死亡，这使人们将目光转向了异种移植，

简介：目的：比较不同蛋白质提取方法在牙胚蛋白提取中的效果，寻找适合牙齿发育高通量蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。方法：取猪胚胎第40、50、60天第三乳磨牙牙胚，利用碱性碳酸盐溶液提取牙胚初步钙化部分的蛋白，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳比较液氮研磨法和电动研磨器研磨法提取牙胚总蛋白效果，BCA（bicinchoninicacid）蛋白浓度测定法比较RIPA裂解液与尿素溶液提取牙胚总蛋白含量。结果：与液氮研磨法相比，电动研磨法提取蛋白后的聚丙烯酰胺电泳图谱蛋白条带明显更深，蛋白含量高。尿素溶液对牙胚总蛋白的提取量高于RIPA裂解液组，蛋白电泳分离效果均可。结论：采用电动研磨器研磨牙胚，组织损失量小，提取蛋白效果好于液氮研磨；采用尿素溶液提取牙胚总蛋白效果优于RIPA裂解液。初步找到适合下游高通量蛋白质组学分析的牙胚蛋白提取方法。

简介：目的对中国实验小型猪中内源性反转录病毒的存在与mRNA的表达进行检测,摸清中国实验小型猪中内源性反转录病毒的携带情况.方法根据已发表的PERV的序列设计并合成了三对引物,分别用于检测PERV核心蛋白基因(gag)、多聚酶基因(pol)及囊膜基因(env)的存在与表达;同时,根据目前通用的env基因分型方法合成了三对用于分型检测的引物env-A、env-B、env-C.应用PCR、RT-PCR扩增的方法,对来自于中国实验小型猪外周血淋巴细胞的DNA和RNA样品进行了检测.结果在6个被检DNA样品中均检出了PERV特异性DNA的存在;同样,在被检RNA样品中均有PERV特异性RNA的表达,且所表达的PERV均为A型和B型,在所有样品中均未检出C型PERV的表达.结论初步表明中国实验小型猪中存在内源性反转录病毒序列,且能以mRNA的形式表达,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础.

简介：目的探讨一种建立和评价慢性心肌缺血动物模型的简易方法。方法中国实验小型猪22头，开胸游离冠状动脉左回旋支主干，在左旋支近段放置Ameroid缩窄环，制作左旋支慢性闭塞的模型，术后5周行冠状动脉造影和心脏MR检查。结果22头中国实验小型猪中20头成活并成功建立慢性心肌缺血模型，应用Ameroid缩窄环后5周可见左旋支完全或次全闭塞，左旋支支配范围（左心室侧壁或下壁）心肌室壁增厚率及室壁运动幅度明显下降（P〈0．01）。所有动物均示静息时和／或负荷后LCX支配范围内心肌灌注缺损。结论应用Ameroid缩窄环可以成功制作慢性心肌缺血的动物模型。

简介：目的探讨氯胺酮与安定合用对小型猪实验研究的麻醉效果。方法对10头进行外科腹部手术实验的小型猪进行复合麻醉,先臀部深部肌肉注射安定（地西泮）0.5～0.8mg/kg,待5～10min后再臀部肌肉注射氯胺酮6～8mg/kg,观察麻醉显效时间、麻醉维持时间及镇痛效果,并监测麻醉过程中体温、呼吸、心率等生理指标及术中有无明显躁动、呕吐、肠管胀气、流涎等不良反应。结果小型猪成功麻醉10例,占100%。肌肉注射后（4.0±1.5）min进入麻醉状态,麻醉状态维持（88.5±13.5）min。麻醉期间手术肌肉松弛效果好,呼吸和心率平稳,无明显不良反应。结论采用氯胺酮与安定复合麻醉效果好,麻醉过程平稳,生命体征稳定,是较为简便、安全的小型猪麻醉方法,适合于耗时较长的手术或动物试验的开展。

简介：小型猪与人的基因同源性高,各脏器及组织的大小结构和生理学等方面也极其相似,同时具有经济学和伦理学等方面的优势,作为耳科动物模型具有很好的应用前景。本文主要介绍小型猪在耳部解剖、内耳形态及电生理等方面与人的相似性,展示小型猪作为耳科学领域实验动物模型的优势。同时,归纳了目前小型猪动物模型在耳科领域,包括聋病的机制和治疗的相关基础研究、听觉植入相关研究、耳外科解剖教学等方面的应用现状。小型猪作为耳科领域的新兴动物模型将为耳科学及听力学的相关研究,为人类聋病的防治提供最理想的实验模型及论证。

简介：目的探讨不同浓度ouabain溶液对贵州小型猪内耳的作用，分析听力改变与药物浓度关系。方法采用健康、黑色2月龄贵州小型猪13只，随机分为实验组、对照组和正常对照组，其中试验组动物通过完整圆窗膜局部应用不同浓度ouabain，分为1mM组、0．1mM组，对照组动物局部使用等量生理盐水，正常对照组不予特殊处理。用药前后行听陛脑干反应测定，并通过免疫荧光法，观察各组动物在应用药物后三天、一周、两周时的听功能及内耳形态学（螺旋神经节、毛细胞）的变化。结果生理盐水对照组及正常对照组内耳形态及听功能未见明显变化，不同浓度Ouabain均可导致螺旋神经节细胞数目减少，毛细胞形态及数量与对照组之间无显著性差异，ABR阈值变化明显（P〈0．05）。结论经完整圆窗膜给药，ouabain溶液对小型猪螺旋神经节细胞有损伤，并且损伤程度具有浓度依赖性，并造成听阈明显提高，ouabain对毛细胞的影响不明显。

简介：目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区（CDS）序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中的表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391bp,编码796个氨基酸,与参考序列的同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

简介：目的　探讨蛋白酶抑制剂乌司他丁(Ulinastatin,UTI)对大面积烧伤后早期炎性介质、氧自由基产生和肠黏膜通透性改变的保护作用。　方法　贵州三系雄性小型猪12只,造成背部35%TBSAⅢ度烧伤模型,随机分为烧伤对照组(A组,6只)、UTI治疗组(B组,6只)。B组动物于伤后1h给予UTI5000Ukg,缓慢静脉滴入;A组动物给予等量等渗盐水,3次d,直至动物处死。分别于动物烧伤前(A、B两组各随机选取4只动物抽取静脉血作为正常对照)、伤后6、24、48、72h抽血检测血清肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL6)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、血清二胺氧化酶(DAO)、D乳酸含量。　结果　伤后6h,各组动物血清TNFα含量较伤前显著升高,尤以A组明显,高峰为伤后24h,随后呈下降趋势。B组各时相点TNFα含量均低于A组,差异有显著性意义(P<0.05)。IL6的改变与TNFα基本一致。A组动物伤后6～72h血清MDA较伤前显著升高,SOD消耗明显增多。B组各时相点MDA含量均低于A组...

简介：目的探讨猪TCR基因分子结构的复杂性及其与人类的相似性。方法以公开的猪TCRα链基因为参考序列设计两对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结和脾脏的淋巴细胞中克隆了93个猪TCRα基因（简称STA）。结果测序分析表明,克隆的猪TCRα链的基因均含有可变的信号肽区和V区、高变的J区和恒定的C区的基因片段,但基因间的核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂的多态性和多样性,基因间的同源性在68.4%-98.7%,这与TCRα链的基本基因结构特征相一致。依据TCRα基因的同源性对其分子结构、遗传演化关系和归类分析发现,在其信号肽区、FR1区和CDR1区、FR2区和CDR2区以及FR3区和CDR3区都存在一些变异集中点和变异热点区。用IMGT/V-QUEST分析方法可将合作小型猪TCRαV区（STAV）、J区（STAJ）基因片段与人类的进行比较分析,发现合作小型猪TCRα与人类的遗传演化关系较近,每个序列都能找到与人类对应的TRAV、TRAJ基因片段,甚至V区的相似性可达92%以上。结论近交培育的合作小型猪在正常状态具有应对外界复杂微生物等环境的TCR遗传多样性分子基础,且适合作为人类免疫学及疾病研究的动物模型。

简介：目的：建立中国小型猪冠心病模型，研究该模型中心肌组织蛋白表达谱的改变情况。方法：采用冠状动脉球囊拉伤结合高脂饲料喂养建立中国小型猪冠心病模型，应用双向凝胶电泳、图谱分析软件、基质辅助激光解析-飞行时间质谱等蛋白质组学技术，对该模型动物的心肌组织总蛋白进行提取、双向电泳分离、差异比较、

简介：目的研究中国版纳小型猪近交系动脉的异种靶抗原α-Gal的分布和半定量分析，为研究异种移植超急性排斥反应和异种生物材料提供资料。方法通过亲和免疫组织化学法和图象分析对10头版纳小型猪的四级动脉进行α-Gal的分布和半定量研究。结果（1）各级血管组织中血管内皮细胞阳性表达明显，弹性纤维、胶原纤维和平滑肌细胞未见表达，外膜有微弱表达；（2）图象分析显示，管径越细，其内皮细胞的表达越高（P<0.01），各级动脉内皮细胞阳性表达的面积密度比的组间差异显著（P<0.01），t检验发现每两组间的动脉内皮细胞阳性表达面积密度比相差显著（P<0.01）。结论（1）版纳小型猪动脉内皮细胞均有异种抗原α-Gal分面，但是分布不均匀；（2）微血管血栓是异种移植超急性排斥反应中的重要环节，小型猪的异种器官移植，彻底解决异种移植超急性排斥反应的关键是防治微血管栓塞。

简介：