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简介：摘要嵌合抗原受体T （CAR-T）细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注，是一种新的肿瘤免疫疗法。目前，CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且，在临床应用的过程中仍会出现一些不良反应，如细胞因子释放综合征、神经毒性、归巢障碍、溶瘤综合征及脱靶效应等。本文就CAR-T疗法的基本原理及临床应用与不良反应展开做一综述。

简介：【摘要】：嵌合抗原受体修饰 T细胞（ chimeric antigen receptor engineered T cell， CAR-T）免疫治疗技术是一门基因工程技术，经过 30年的发展，已在治疗血液肿瘤领域取得了突破性的成果。 CAR-T 细胞免疫技术在白血病治疗中取得了一定的疗效，具有较好的应用前景。

简介：摘要目的构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤，酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性，流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能，Fortebio测定抗体亲和力，抗体全长测序，经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment，scFv)；人EGFR单克隆抗体杂交瘤系，经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因，构建scFv，克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接，克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体，使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞，获得包装病毒，感染293V细胞，FACS测定CAR膜表达，ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况，转染激活人外周血T细胞，验证CAR膜表达。结果获得PD-L1抗体11E3，具备高度配受体封阻性能，经人源化改造后，亲和力稳定(2.67×10－10 mol/L)，EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2)，其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后，细胞膜表面表达EGFR-scFv，检测培养上清存在PD-L1-ScFv；CTZ0431-2感染293V细胞后，细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达，双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。结论成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体，EGFR-CAR中度结合亲和力，此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。

简介：摘要嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）免疫疗法在复发/难治性血液系统恶性肿瘤患者的治疗中备受重视。CAR-T免疫疗法的疗效受到多种因素的影响，包括CAR-T的制备、在体内的扩增和杀伤，以及疾病类型、疾病状态、治疗前预处理方案等。输注CAR-T前接受淋巴细胞清除等预处理方案，可以提高CAR-T免疫疗法的疗效。目前其常用预处理方案包括环磷酰胺、氟达拉滨、喷司他丁、苯达莫司汀、阿糖胞苷等化疗和全身放射疗法（TBI）等。但是，CAR-T预处理方案的最佳选择、最适宜剂量等，尚无明确结论。笔者对近年来CAR-T免疫疗法预处理方案的研究现状及相关研究进展进行综述，旨在寻求最佳预处理方案，提高CAR-T疗效。

简介：摘要 目的 : 总结嵌合抗原受体 T细胞 (chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)治疗后发生神经毒性副反应的临床护理经验，为今后的临床护理提供参考。方法：其 CAR-T细胞治疗发生的神经毒性副反应，也称作 CAR-T细胞相关脑病综合征（ CRES），对发生 CRES的患者严密监测，重点加强预防 CRES的护理、 CRES的分级护理、心理护理、定期复查、集成化管理的护理干预。结果：一共 74例患者参与 CAR-T细胞治疗的临床试验， 59例发生 CRES，其中 3例死亡， 3例放弃出院， 53例好转出院 ,30例患者随访 9-24个月，一般情况较好， 23例患者随访 1-10个月后回当地医院失访。结论：及时、有效的去预防和护理 CRES，严格的护理专科评估和病情管理，可以使 CAR-T细胞治疗的风险降到最低，确保患者度过危险期。

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简介：摘要嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）在血液肿瘤治疗领域取得了突破性的成果。靶向κ免疫球蛋白轻链、CD19和B细胞成熟抗原（BCMA）的CAR-T疗法已被用于治疗难治复发多发性骨髓瘤（RRMM）患者，其中抗BCMA CAR-T疗效最佳。但由于BCMA阴性或阳性复发导致了较短的无进展生存（PFS）时间，对靶向BCMA的嵌合抗原受体（CAR）结构进行改进、双靶CAR-T以及CAR-T联合小分子药物等多项措施也成为目前CAR-T治疗RRMM的热点。

简介：摘要自身免疫病（AIDs）是指在某些内因和外因诱发下，自身免疫耐受状态被打破，持续迁延的自身免疫对自身抗原产生异常的免疫应答，造成自身细胞破坏、组织损伤或功能异常，导致的临床病症。常规治疗后大多数患者病情能缓解，但仍有患者对传统治疗无效或效果差，且易复发。嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法是目前较为先进的免疫治疗技术。近年来，研究证实CAR-T疗法可有效治疗多种难治、复发恶性血液病及部分实体肿瘤，CAR-T疗法已成为肿瘤治疗、艾滋病防治、免疫疾病治疗等领域最有前景的治疗策略之一。本文拟就CAR-T免疫疗法在自身免疫病的临床前研究进展进行综述。

简介：摘要嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗淋巴瘤和白血病效果显著，大量基础和临床研究也使CAR-T疗法迅速发展，文章就CAR-T疗法的概念、CAR-T在血液病中的应用以及所面临的问题和解决策略进行综述。

简介：摘要目的探索特异性靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)T细胞的构建与制备方法，并研究其体外杀伤靶细胞的效果。方法通过基因合成和分子克隆手段构建靶向CD19-CAR片段并将其插入pLenti6.3慢病毒载体，利用293FT悬浮细胞系包装慢病毒并转染人外周血单个核细胞来源的CD3＋ T细胞。通过流式细胞术鉴定转染效率，并通过实时无标记细胞分析法和细胞计数试剂盒8检测靶向CD19-CAR-T细胞体外杀伤效果。结果获得了表达抗CD19的单链抗体基因的慢病毒，病毒滴度可达3.2×108噬斑形成单位/ml。经慢病毒转染的CD3＋ T细胞在体外培养14 d后，细胞扩增效率达(60.2±11.5)倍，靶向CD19-CAR-T细胞阳性率达90.57%。经检测，靶向CD19-CAR-T细胞均可有效杀伤CD19＋靶细胞。结论建立了基于无血清悬浮细胞系的靶向CD19-CAR慢病毒包装系统，成功构建靶向CD19的CAR-T细胞，该细胞能特异性杀伤CD19＋肿瘤细胞。

简介：摘要目的观察嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）对难治性Richter综合征（RS）的疗效。方法回顾性分析2018年2月苏州永鼎医院1例由慢性淋巴细胞白血病转变的弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的临床资料，并复习相关文献。结果患者为66岁女性，多次常规化疗效果不佳，给予CAR-T治疗3周后完全缓解，至截稿前持续缓解20个月。结论抗CD19的CAR-T可能对难治性RS有良好、持久的疗效。

简介：摘要多发性骨髓瘤（MM）是一种血液系统的恶性克隆浆细胞增殖性肿瘤，多发于老年。近20年，MM治疗观念不断更新，药物研发发展迅速，新型机制的药物取代了传统化疗，极大改善了患者预后，使患者总生存期明显延长。在新药中，免疫治疗成为肿瘤治疗的主要突破点，除了第1个有效的抗CD38单克隆抗体进入临床应用外，嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）成为治疗难治复发MM的新免疫疗法，对MM现有治疗模式发起挑战。

简介：摘要急性淋巴细胞白血病(ALL)患者，经嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)免疫疗法治疗后，可获得完全缓解(CR)。然而，目前多个因素制约CAR-T免疫疗法在血液系统恶性肿瘤和其他癌症，特别是实体瘤患者中的广泛应用。CAR-T免疫疗法临床应用的主要挑战包括：肿瘤抗原免疫逃逸导致的复发、细胞因子释放综合征(CRS)、CAR-T体内存活时间不理想、实体瘤内低浸润率和失活等。笔者拟就CAR-T免疫疗法在血液系统恶性肿瘤临床试验中的疗效和面临问题，以及如何利用综合性治疗方案和生物工程技术，解决目前存在问题的最新研究进展进行阐述，旨在提高CAR-T免疫疗法的安全性和有效性，扩大其在不同肿瘤患者中的临床效益。

简介：摘要目的构建一种新的靶向CD123的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞），为CD123阳性白血病的免疫治疗提供实验参考。方法通过单克隆筛选技术获得能稳定分泌CD123抗体的杂交瘤细胞株6E11，将杂交瘤细胞扩增后腹腔注射至Balb/c小鼠腹腔内，收集腹水并处理、纯化得到单克隆抗体，测定抗体效价并对其特异性进行验证；RT-PCR法获得轻链和重链可变区序列，并以此为基础利用分子克隆技术构建一种新的靶向CD123嵌合抗原受体，包装病毒后感染T细胞制备CD123 CAR-T细胞，通过功能实验初步探讨6E11 CAR-T细胞体外抗白血病的能力。结果①获得1株稳定分泌抗人CD123抗体的杂交瘤细胞株6E11并获得其可变区序列。②6E11单克隆抗体对CD123蛋白亲和性高，解离常数（Kd值）为2.10 nmol/L，特异性识别CD123阳性细胞且与CD123阴性细胞无交叉反应。③成功构建了CD123 CAR慢病毒载体，感染T细胞后获得了靶向CD123的CAR-T细胞（6E11 CAR-T），感染效率大于60%。④6E11 CAR-T能明显杀伤CD123阳性靶细胞MV4-11，效靶比1∶1时6E11 CAR-T细胞对MV4-11细胞的杀伤比例明显高于Vecor-T细胞[（98.60±1.20）%对（20.28±6.74）%，P<0.001]，但对CD123阴性靶细胞K562没有明显杀伤作用。⑤MV4-11细胞可以显著激活6E11 CAR-T，但对Vecor-T细胞无明显激活作用[（26.33±3.30）%对（1.17±0.06）%，P<0.001]。⑥6E11 CAR-T与MV4-11细胞共培养上清中细胞因子水平均显著高于Vecor-T组[IL-2：（92.90±1.51）pg/ml对（6.05±3.41）pg/ml，P<0.001；TNF-α：（1 407.20±91.95）pg/ml对（7.86±0.85）pg/ml，P<0.001；IFN-γ：（5 614.60±170.17）pg/ml对（8.42±2.70）pg/ml，P<0.001]，但与K562细胞共培养后，两组各细胞因子水平差异无统计学意义。⑦6E11 CAR-T在与CD123阳性急性髓系白血病（AML）原代细胞共培养过程中被显著激活，且能有效杀伤原代AML细胞。结论杂交瘤细胞株6E11能稳定分泌高效特异的抗人CD123单克隆抗体，可用于检测表达人CD123的细胞，也能应用在靶向人CD123蛋白的肿瘤免疫治疗中，以6E11 Ig可变区序列为抗原识别区的CD123 CAR-T细胞，具有明确的体外抗白血病活性，为进一步的临床研究奠定了基础。

简介：摘要目的分析CD19嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞治疗复发难治B细胞淋巴瘤患者疗效不佳的因素。方法招募自2017年2月至2019年1月就诊于天津市第一中心医院血液科的34例复发难治B细胞淋巴瘤患者进行研究。患者均接受CD19 CAR-T细胞治疗，评估其疗效、分析疗效不佳的因素以及不良反应。结果34例复发难治B细胞淋巴瘤患者输注CD19 CAR-T细胞后，总有效率为58.8%（20/34），完全缓解率为41.2%（14/34）。有效组共20例，疗效不佳组14例。两组患者CD19 CAR-T细胞输注数量分别为8.6（5.0~12.7）×106/kg和9.7（5.8~15.0）×106/kg（P=0.654）；外周血检测CAR-T细胞扩增数量，有效组和疗效不佳组CD19 CAR-T细胞占T淋巴细胞百分比中位数分别为10.28%（3.92%~44.16%）和4.05%（0.92%~28.63%），有效组比疗效不佳组CAR-T细胞扩增的比例更高，两者差异无统计学意义（P=0.371）。单因素方法分析两组疗效不佳因素，提示具有巨块型肿物是影响CD19 CAR-T细胞疗效的不利因素（P=0.001）。应用logistic回归多因素分析，结果显示具有巨块型肿物特征仍然是患者CD19 CAR-T细胞疗效不佳的独立预后因素（P=0.005，OR=0.039）。34例复发难治B细胞淋巴瘤患者输注CD19 CAR-T后，70.6%（24/34）患者发生不同程度的不良反应，主要为细胞因子释放综合征（CRS），出现发热的中位时间为输注后第3天（第0~11天），其中16例为1级CRS，7例为2级CRS，1例为3级CRS，经过糖皮质激素以及对症支持治疗后均好转。结论CD19 CAR-T细胞疗法在CD19+B细胞淋巴瘤治疗中有一定效果，具有巨块型肿物特征可能是应用CAR-T疗效不佳的因素。

简介：摘要目的了解CD19异构体对双特异性T细胞衔接器（BiTE）治疗的反应，进一步探讨BiTE治疗无效的相关机制及相应的解决方案。方法通过半定量RT-PCR的方法检测1例CD19+急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者BiTE治疗前后CD19异构体mRNA表达量的情况，Sanger测序对相应的异构体序列进行分析，流式细胞术及转录组测序分析治疗前后谱系特异性分子的表达情况。结果患者初诊时即存在2号外显子缺失型CD19异构体的表达，BiTE治疗后患者未缓解，流式细胞术检测发现CD19抗原表达转阴，但2号外显子缺失型CD19异构体的表达量并无增加，且细胞表型及转录组测序均未见谱系转化的发生。外显子可变剪接引起的缺失型CD19异构体的表达及谱系转化并非该患者CD19抗原表位缺失的机制。该例患者在疾病进展退出BiTE治疗组之后，采用中国医学科学院血液病医院自主研发的CD22及CD19 CAR-T序贯治疗后完全缓解。结论该例患者CD19抗原-缺失导致BiTE治疗无效，其缺失并非由可变剪接或谱系转换所致，更换为CD22、CD19双靶点CAR-T细胞治疗有效。

简介：摘要《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2020年修订）》针对复发难治多发性骨髓瘤诊断及治疗有较大的变动。近年来，靶向成熟B细胞抗原的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗也有大量的临床研究报道。为了便于读者更好理解相关部分内容，现对此进行解读。

简介：摘要目的探讨嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗伴有T315I突变的复发难治急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者的疗效及安全性。方法回顾性分析安徽医科大学第二附属医院收治的1例接受CD19 CAR-T治疗的伴T315I突变的复发难治B-ALL患者的临床资料，并复习相关文献。结果患者为34岁男性，2017年1月确诊为慢性粒细胞白血病（CML）并开始口服伊马替尼，4个月后转化为B-ALL，因检出E355G耐药基因突变调整治疗药物为达沙替尼，同时行诱导化疗，获得完全缓解（CR）后序贯巩固化疗3次。患者CR半年后复发并检出T315I突变，予再诱导化疗未缓解。随后接受CD19 CAR-T治疗（细胞数1.0×109，活性度98%），输注前予FC（氟达拉滨每天30 mg/m2，第1天至第3天；环磷酰胺每天200 mg/m2，第1天至第3天）方案预处理，输注后发生1级细胞因子释放综合征，对症处理后好转，未出现严重不良反应。CAR-T治疗后半个月评估原发病达CR，CR后1个月成功行脐带血移植。截至末次随访时患者无复发生存时间已达396 d。结论对于复发难治B-ALL合并T315I突变的患者，CAR-T治疗可能是一种新的有效治疗手段，安全性较好。

简介：　　 [摘要 ] 目的 探究行嵌合抗原受体 T细胞（ CAR-T）免疫治疗难治性急性淋巴细胞白血病的护理要点。 方法 选取 2017年 1月～ 2019年 12月我院接诊的难治性急性淋巴细胞白血病患者 120例作为研究对象，全部患者均采用嵌合抗原受体（ CAR-T）治疗，根据护理方式进行分组，分为实验组（针对性护理）与对照组（常规护理），各 60例，分析两组患者的焦虑评分、抑郁評分、并发症发生率及护理满意度。 结果 护理前，两组患者的焦虑和抑郁评分无统计学意义（ P>0.05），护理后，两组患者的 SAS和 SDS评分均明显下降，且实验组下降更为明显，差异有统计学意义（ P<0.05） ;对照组中 12例患者发生细胞因子释放综合征、 12例患者发生肿瘤溶解综合征，并发症发生率为 40.00%。实验组并发症发生率显著低于对照组，差异有统计学意义（ P<0.05） ;实验组护理满意度为 96.66%，明显高于对照组的（ 78.33%），差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论 难治性急性淋巴细胞白血病患者接受嵌合抗原受体 T细胞（ CAR-T）免疫治疗后，应给予整体护理干预，可达到良好的治疗效果，降低患者肿瘤溶解综合征和细胞因素释放综合征等并发症的发生，该种护理方式具有较高的安全性，值得在临床中推广。