简介：水环境是环境雌激素最大的储存库,环境雌激素可通过水体传递,对水生动物产生严重危害.雌激素的生理功能通过雌激素受体（ER）介导.ER是一种配体依赖性转录因子,通过雌激素应答元件调节靶基因的转录.大量研究证实,在环境雌激素类化合物污染的评价中,ER可作为检测环境雌激素效应的生物标记物之一.但不同亚型的ER具有组织特异性且对配体的结合存在差异,因此在环境雌激素效应的检测中,应注意化学污染物的类型以及受检动物的物种及组织的特异性.检测ER的方法包括ER蛋白直接定量检测和ERmRNA定量分析,检测技术的选择要依据实验设计而定.论文对环境雌激素效应检测中ER的研究进展进行了综述,为环境雌激素污染检测工作提供了理论依据和基本方法.

简介：使用性腺发育对内分泌干扰作用敏感的两栖动物非洲爪蟾作为模型动物，通过考察性别比、性腺整体形态和组织学形态来揭示乙草胺对其性腺发育的影响，从而确定乙草胺是否具有内分泌干扰活性．46／47期蝌蚪经不同浓度（5μg·L^-1、10μg·L^-1、20μg·L^-1）的乙草胺暴露处理至变态后1个月，在变态结束后3个月时，解剖性腺、鉴别雌雄并固定性腺做组织切片．实验中对照组所有性腺都为典型的卵巢或睾丸，雌性百分率为48．78％（20／41）．而乙草胺暴露组却出现了明显的异常睾丸，其总体上是睾丸，但又带有部分卵巢的特征，在统计性别时将具有异常睾丸的爪蟾归为雄性．5μg·L^-1、10μg·L^-1、20μg·L^-1暴露组的雌性百分率分别为：57．14％（24／42）、66．67％（22／36）、55．26％（21／38）．虽经统计分析无显著性差异，但乙草胺暴露组中雌性多于雄性的趋势和出现带有雌性特征的雄性的现象，一定程度上却暗示了乙草胺可能对非洲爪蟾的性腺发育有雌性化作用．正常睾丸的组织学结构应有发育成熟的生精小管，其内有各个时期的精子囊和生精细胞及精子．但经乙草胺处理的爪蟾睾丸却表现出几种明显的异常：没有生精小管，相反却像发育早期的睾丸一样，充满大量的精原细胞，完全没有生精细胞和精子；有生精小管结构，但其内精子囊结构不明显，生精细胞少并且排列混乱，其间有很大的空隙；睾丸出现腔隙，并有大量体细胞存在，这种结构与57期的卵巢相似；睾丸中出现异常的生精细胞，与58期卵巢的卵细胞相似；睾丸组织中有明显的卵细胞散布．组织学研究发现的乙草胺导致的睾丸结构证明了乙草胺对非洲爪蟾的睾丸发育有抑制雄性化作用和雌性化作用，即乙草胺对非洲爪蟾的性腺发育有内分泌干扰作用．

简介：孕激素和糖皮质激素的环境行为和生态毒理效应是即环境雌激素和雄激素之后近年来国内外环境激素研究的又一热点课题。由于广泛应用于临床医疗等,这两类物质通过污水处理厂不完全处理和人类农业或畜牧业活动的直接排放从而进入水体环境,进而对生态系统和人类健康产生潜在危害。环境监测数据显示,在地表水中,多种物质存在ng·L-1浓度水平;在污水处理厂进出水中,浓度水平更高,甚至达到数百ng·L-1。孕激素和糖皮质激素类物质主要通过激素受体途径发挥毒性效应,如孕激素受体（PR）,糖皮质激素受体（GR）和盐皮质激素受体（MR）。对水生脊椎动物的内分泌系统干扰作用是目前研究的焦点。这两类物质能够影响脑垂体性腺轴转录水平和相应激素合成,影响性腺发育以及导致繁殖能力损伤。这一毒性效应甚至发生在环境浓度水平之下。除此之外,随着组学技术的广泛应用,更多的潜在毒性终点不断被发掘,如对昼夜节律系统和免疫应答的干扰作用。这些研究引导着对环境孕激素和糖皮质激素生态毒理学效应更加深入的理解。

简介：乙烯菌核利在哺乳动物实验中被广泛证实具有抗雄激素效应，而对鱼类的研究结论目前并不统一。将性成熟稀有绚鲫分别暴露于0、2、10、50μg·L-1乙烯菌核利21d，研究环境浓度下乙烯菌核利对鱼类生殖系统的影响及作用机制。结果表明，雌鱼的性腺指数（GSI）、肝脏指数（HSI）在所有浓度组均显著降低仞〈O．05），同时卵巢组织中卵泡的发育受到了抑制；而雄鱼仅HSI在最高浓度组（50μg·L-1）出现显著降低p〈0．05），精巢组织切片也未观察到明显损伤，说明乙烯菌核利对雌鱼生殖系统的影响大于雄鱼。在转录水平上，雌鱼性腺中PrmRNA、vtgmRNA分别在50μg·L-1和10、50μg·L-1时显著升高（p〈0．05），armRNA在所有浓度组显著升高（p〈O.05）；而雄鱼性腺中armRNA、dmrtlmRNA水平分别在10μg·L-1浓度组和所有浓度组显著降低（p〈0．05），ermRNA在所有浓度组显著降低（p〈0．05），说明雌雄鱼对乙烯菌核利暴露的分子响应机制存在差异。综上，环境浓度下乙烯菌核利短期暴露会对稀有绚鲫生殖系统产生一定的影响，并且雌雄鱼在敏感性和分子响应机制上都存在差异。

简介：应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母，用以检测类，抗雌激素化合物和环境样品的类，抗雌激素活性．采用多聚酶链反应（PCR）法扩增人雌激素受体（hER）基因，构建诱饵质粒pGBKT7-ERLBD；分别提取并纯化两种含有ER共激活因子基因的靶质粒pGADg24-GRIP1和pGAD424-SRC1；诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187，于营养缺陷型培养基（SD／-Trp／-Leu）上筛选阳性菌落，分别构建两种ER双杂交酵母ER＋GRIP1和ER＋SRC1．考察双杂交酵母与不同激素：17β-雌二醇（E2）、二氢睾酮（DHT）、孕酮（PG）以及三碘甲状腺原氨酸（T3）的结合情况，并考察了雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬（4-OHT）与酵母的相互作用．结果表明：ER＋GRIP1和ER＋SRC1酵母均能够专一性的和E2结合，并存在显著的剂量-效应关系，E2对ER＋GRIP1和ER＋SRC1酵母β-半乳糖苷酶活性诱导的EC50值分别为7．3×10^-11mol·L^-1和1．5×10^-10mol·L^-1，其中ER＋GRIP1酵母细胞诱导产生的酶活性值明显高于ER＋SRC1-酵母细胞．4-OHT能够抑制E2诱导ER＋GRIP1酵母细胞产生的酶活性，并存在显著的剂量-效应关系，IC50值为1．0×10^-7mol·L^-1．表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品的类，抗雌激素活性．

简介：为了研究低剂量条件下,内分泌干扰物莠去津对鲫鱼血清激素的影响,探讨其作用机理和剂量-效应关系,同时筛选出敏感的生物标志物,实验以除草剂莠去津对鲫鱼进行低剂量染毒（染毒浓度0～3mg·L^-1）,采用放射免疫法测定莠去津长期暴露下（60d）幼年雄性鲫鱼血清中性激素（17β-雌二醇（E2）、睾酮（T））及甲状腺激素（促甲状腺激素（TSH）、三碘甲状腺原氨酸（T3））的浓度,并将测定结果与空白对照及溶剂对照进行比较.结果发现：1）莠去津长期暴露下,各处理组鲫鱼血清E2浓度普遍升高,0.023、0.094、1.500、3.000mg·L^-1组与空白对照相比,升高显著（p〈0.05）;2）各处理组鲫鱼血清T浓度与空白对照相比均无显著性差异（p〉0.05）;3）莠去津长期暴露下,低浓度莠去津组（0.006、0.023mg·L^-1组）鲫鱼血清TSH浓度与空白对照相比差异不显著（p〉0.05）,而高浓度莠去津组（0.094、1.500、3.000mg·L^-1组）则显著降低（p〈0.05）;4）类似地,莠去津长期暴露下,低浓度莠去津组（0.006、0.023、0.094、0.375、1.500mg·L^-1组）鲫鱼血清T3浓度与空白对照相比差异不显著（p〉0.05）,只有高浓度莠去津组（3.000mg·L^-1组）显著升高（p〈0.05）.实验结果表明,低剂量长期暴露下,莠去津对鲫鱼体内性激素及甲状腺激素具有一定的干扰作用,尤其是对17β-雌二醇影响更为显著,因此,17β-雌二醇可作为评价农药内分泌干扰效应的生物标志物.

简介：多氯联苯作为一种环境内分泌干扰物,具有一定的雌激素干扰效应,导致动物雌激素水平紊乱或功能异常,从而影响生殖、发育或行为。羟基多氯联苯是多氯联苯最主要的活性代谢产物,已经在动物和人体组织中被检出。羟基多氯联苯的化学性质和分子空间构象使其雌激素干扰效应可能较母体化合物更强。因此,它们对人类和动物机体的潜在影响以及由此带来的新的毒理学问题成为内分泌干扰研究领域的热点之一,相关的毒性作用机制需要进一步探索。本文对多氯联苯的代谢途径、羟基多氯联苯在生物体内的暴露水平、雌激素干扰效应及作用机制进行综述。

简介：应用食蚊鱼细胞色素P450芳香化酶基因（CYP19α）、卵黄蛋白原基因（VTGα）和雌/雄激素受体基因（ERα/ARα）mRNA转录水平为指标,评价广州海珠涌和黄埔涌食蚊鱼受环境激素物质干扰产生雌/雄性化效应的现状。结果显示,海珠涌宝岗大道段（BG）、洪德路段（HD）和黄埔涌赤岗路段（CG）、苗艺路段（MY）采样点雌鱼性腺CYP19αmRNA表达水平显著降低。雌鱼肝脏VTGαmRNA的表达水平在夏冬两季CG点都显著升高,但在BG、HD和MY点的表达水平在冬季则显著下降;夏冬两季雌鱼雄激素受体ARαmRNA表达水平在各点都显著升高。雄鱼性腺CYP19αmRNA表达水平在各点都无明显差异,但CG点在夏季显著升高,而MY点在冬季则显著下降;雄鱼肝脏VTGα和雌激素受体ERαmRNA表达水平分别在各点都显著升高,但夏季MY点和冬季HD、MY各点无明显差异。结果表明,雌性食蚊鱼的VTGα和CYP19α基因受到不同程度的抑制,ERα较对照REF明显升高,表现出雄激素效应;雄性食蚊鱼VTGα和ERα转录水平较对照REF显著升高,CYP19α基因无显著性差异,表现出雌激素效应。生活在广州海珠涌和黄埔涌中的食蚊鱼受雌/雄激素物质干扰明显,表明河涌中环境激素污染严重。

简介：为评价双酚AF（BPAF）的甲状腺毒性,以雄性斑马鱼成鱼为受试模式生物,采用半静态染毒的方式对雄性斑马鱼成鱼染毒14d（0、5、50和500μg·L^-1）,分别设置7d、14d2个时间节点,通过酶联免疫法（ELISA）分别检测斑马鱼血浆中总三碘甲腺原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）的含量水平,并对14d暴露后斑马鱼甲状腺进行组织学检测分析。结果显示随着暴露浓度的提高,出现甲状腺滤泡上皮细胞增生,滤泡组织变形明显,细胞胶质缺失等病理学变化。雄性斑马鱼在BPAF暴露情况下,血浆中TT3、TT4、FT3、FT4含量随着暴露浓度的提升和时间的延长出现显著上升,呈现出甲状腺功能亢奋的干扰效应。

简介：为探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-（2-ethylhexyl）phthalate,DEHP）及其代谢产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯（mono-（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP）对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响,本实验将H295R细胞分别暴露于DEHP（0、1、10、100、1000μmol·L^-1）和MEHP（0、1、10、100、1000μmol·L^-1）24h,用MTT法检测细胞活性,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中关键酶的基因表达水平。结果显示,1000μmol·L^-1DEHP和MEHP对H295R细胞染毒24h显著降低H295R细胞活力,所以本研究采用了较低的染毒浓度（0、1、10和100μmol·L^-1）对H295R细胞染毒24h来评估DEHP和MEHP对H295R细胞类固醇激素合成通路的影响。1、10和100μmol·L^-1DEHP显著增加醛固酮合成酶CYP11B2的基因表达水平。10μmol·L^-1DEHP显著上调了3-β羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD2）的基因表达水平。1、10和100μmol·L^-1MEHP显著下调了3-β羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD1和3β-HSD2）、17β羟基类固醇脱氢酶17β-HSD4、17α羟化酶/17,20裂解酶CYP17和芳香酶CYP19a的基因表达水平。10和100μmol·L-1MEHP染毒H295R24h显著下调了CYP21和STAR的基因表达水平,然而,10和100μmol·L^-1MEHP显著上调了CYP11B2的基因表达水平。100μmol·L^-1MEHP显著下调了17β-HSD1的基因表达水平。上述研究结果表明,DEHP、MEHP都可不同程度影响H295R细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达。MEHP可以通过抑制STAR基因的表达,从而将影响胆固醇在细胞内的转运;并能显著性抑制类固醇激素合成过程中CYP17、CYP19a、3β-HSD1、3β-HSD2、17β-HSD1、17β-HSD4、CYP21基因的表达,最终将抑制H295R细胞中类固醇激素的合成。与DEHP相比,MEHP对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响较明显。

简介：选用大鼠肝匀浆（S9）和鼠肝癌细胞（H4ⅡE）两种体系代谢活化多溴代联苯醚混标（BDEs）和十溴联苯醚（BDE209），采用重组甲状腺激素受体基因酵母检测BDEs和BDE209母体及其代谢产物的类，抗甲状腺激素效应．结果表明，BDEs和BDE209母体均不表现甲状腺激素效应（p〉0．05）；但是经S9和H4ⅡE细胞代谢活化后，其代谢产物表现出明显的类甲状腺激素活性和抗甲状腺激素活性（p〈0．05），BDEs和BDE209的干扰甲状腺激素效应需要经过代谢活化步骤．比较不同代谢活化体系，重组酵母细胞本身的代谢活化作用并不显著，而H4ⅡE细胞和S9代谢活化体系均能够导致活性中间体．

简介：污水处理过程对环境雌激素的不完全去除是水环境中雌激素污染物浓度升高的一个重要原因。采集焦作市污水处理厂主要处理工艺的出水，以雄性金鱼（Carassiusauratus）为受试生物，采用体内生物测试方法研究各处理工艺对环境雌激素的去除效果。结果表明，相比于对照组，所有主要处理工艺的出水（稀释体积分数为5％和10％）均显著诱导了雄性金鱼体内VTG（卵黄蛋白原）的表达并显著抑制了雄鱼性腺的发育。对于5％污水暴露组，雄鱼体内VTG诱导水平随污水处理进程的深入而降低，且氧化沟为环境雌激素的主要去除工艺。10％曝气沉砂池出水和10％生物选择池出水由于毒性作用，限制了雄鱼体内VTG的诱导。5％二沉池出水暴露组鱼的GSI（性腺成熟系数）最高（0．57％），暴露于10％曝气沉砂池出水的鱼GSI最低（0．36％）。污水处理工艺并不能完全去除雌激素污染物，尾水中的环境雌激素能够对雄性金鱼产生雌性化效应，暴露于受纳水体的鱼类存在雌性化风险。

简介：利用免疫层析和胶体金标记技术试制出一种免疫检测试片,该试片可快速定性检测鱼体内诱导的卵黄蛋白原.试验结果表明,该检测试片仅需采鱼血浆100μL,15min内便可获得检测结果.试片的检测限（LODVTG）为10μg·mL^-1,野外现场应用表明测量准确度达92%.因此,该试片可用于野外水体类雌激素暴露与影响的原位评价.

简介：十溴联苯醚（Decabromodiphenylether,BDE209）被认为是可疑甲状腺素（TH）干扰物,但干扰机制目前尚不清楚.采用单次腹腔注射的暴露方式,考察了在28d的实验周期内,不同浓度组的十溴联苯醚在虹鳟（Oncorhynchusmykiss）体内的羟基化代谢产物浓度与甲状腺激素（T3和T4）水平.结果表明：十溴联苯醚在虹鳟的肝脏和血液中均可代谢为低溴代羟基多溴联苯醚,且羟基代谢产物在整个实验周期中浓度不断累积;与此同时,血浆中T3和T4浓度均出现下降趋势.进一步的统计分析结果表明,羟基代谢产物与T3和T4浓度水平分别呈显著的负线性相关关系,这说明血浆中的甲状腺激素水平下降可能是由羟基化产物所引起的.