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  • 简介:神经是神经系统的基本结构与功能单位,其对缺氧非常敏感。缺氧本身可造成神经的损伤,但缺氧时神经内诸多离子以及核酸、蛋白等的变化对缺氧损伤神经也具有调节保护作用。因此了解缺氧时神经内的诸多变化对研究缺氧损伤神经的保护具有重要的意义。

  • 标签: 神经元 缺氧 损伤 保护
  • 简介:神经细胞原代培养是研究神经细胞形态及功能的重要手段之一.传统方法是将神经细胞与神经胶质细胞混合培养,无法满足在单一神经细胞培养基础上进行实验研究的需要.本实验在传统培养方法的基础上加以改良,对原混合培养方法在胎龄、取材、温度、消化、换液、抑制剂、机械操作等方面进行了控制改进.本培养方法具体改进如下:1.运动神经细胞取自E14大鼠胚胎的脊髓.因为胚胎运动神经形态分化化学分化程度较低,体外存活能力强,E14胎鼠脊髓易剥离.而传统方法是取E12~E16.E12胎鼠组织太嫩,不易分离;E16胎鼠脊柱已部分骨化,血液太多,挑离脊髓时易形成撕裂损伤.2.取材时将脊髓沿冠状面切开,取脊髓腹侧半,改变传统的整个脊髓培养,以达到培养单一运动神经的目的.3.整个取材过程在冰袋上进行,更好的保持细胞活力.4.严格控制胰酶的浓度消化时间.胰酶浓度是0.125%,37℃二氧化碳孵育箱内消化0.5hr较好,采用4℃含血清的DMEM液适时终止反应.为避免组织丢失,改吸弃胰酶为吸组织于另一试管中,且迅速终止消化反应.5.减少传统方法中的吹打次数,用弯头吸管代替直头吸管吹打;取消离心或细胞筛过目等步骤,降低细胞损害程度.6.细胞种植后改传统换全液为换半液,改传统培养2d换液为定时观察,按需换液.这样不仅保证了细胞在已适应了的环境中生长,并且减少了污染的机率.7.本方法不使用抑制剂,减少药物对运动神经的损伤,使神经细胞在更接近于体内自然环境中生长.种植细胞1~2hr即可观察到细胞贴壁,胞呈圆形,饱满、透亮,有短的突起出现.因此,本方法的优点是:不仅能够大大缩短从取材到种植的时间,提高运动神经的活性,而且成功的获得了相对单一的运动神经元培养物(纯度达90%以上),为进一步开展神经生物学研究提供了相对稳定的

  • 标签: 原代培养 培养方法 方法改进
  • 简介:中枢神经系统内从丘脑到延髓的整个脑干区域分布着许多氧化学感受器,并组成了一个复杂的感受氧气的网络,它们在氧浓度变化的过程中对心血管与呼吸系统起着重要的调节作用。目前关于中枢氧感受器化学传递过程的细胞机制中,仅有颈动脉血管球细胞肺血管平滑肌细胞的保护机制,而中枢性氧感受神经需要何种的离子通道氧感受器传导缺氧的机制目前还不很清楚,本文主要对此方面目前的相关研究作简要综述。

  • 标签: 中枢神经系统 氧化学感受器 神经元
  • 简介:75只三月龄雄性昆明种小鼠,随机分为三组:正常对照组、镉(Cadmium,Cd)中毒组及维生素E加镉组.通过光镜、透射电镜及细胞形态计量方法定性定量研究三组小鼠黑质神经的细微结构.研究结果表明,正常对照组小鼠黑质神经结构正常;镉中毒组小鼠中脑黑质受损,黑质区神经数量明显减少,部分神经变性、坏死,异染色质增多边聚,核膜断裂,核周质内细胞器明显减少,此外有多处较大的软化灶形成,并有广泛的淋巴细胞浸润,围绕在血管周围形成血管套;维生素E加镉组小鼠黑质区神经轻微受损,结构接近正常组,与镉中毒组比较有明显的不同,表现在:①黑质区神经数量未见明显减少,酪氨酸羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)免疫组化染色可见大量的TH阳性反应神经.②变性及坏死神经很少.但有少数神经变性,胞核固缩、溶解,尼氏减少或消失.染色质稀疏,均匀分布,核膜清晰完整,未见断裂,核周质内细胞器丰富.③个别小鼠黑质区有初期软化灶形成,病灶较小,灶内神经组织多已坏死,残留神经变小,胞核固缩,胞浆减少.④少数小鼠黑质区有弥漫性或局灶性淋巴细胞浸润,偶见淋巴细胞围绕在血管周围,但并未形成血管套.⑤密度、数密度、平均截面积及平均体积等形状特征参数与镉中毒组比较有显著性差异(P<0.05),与正常组比较除密度有差别外(P<0.05),其余均无统计学意义.以上结构证实:抗氧化剂维生素E对慢性镉中毒小鼠黑质神经有显著的保护作用.

  • 标签: 中毒小鼠 保护作用 小鼠黑质
  • 简介:经典神经理论认为,中枢神经系统(centralnerv-oussystem,CNS)内的神经是高度分化的终极细胞,其已丧失增殖能力,若失去神经细胞只有通过胶质细胞来填充.因而,CNS损伤后CNS神经难以再生的客观事实长久以来一直是令神经科学工作者困惑的问题.缺血性脑血管疾病是严重危害人类健康的疾病,其高发病率、致残率死亡率为病人、家庭社会带来极大的痛苦负担.随着生活水平的提高,社会老龄化进程的加速,其发病存在上升趋势.中枢神经损伤后神经难以再生,神经丢失所遗留的神经网络环路缺失是神经功能损伤脑中风后遗症的根本原因.因此,要减少脑中风后遗症脑脊髓外伤等所致的残疾,解决问题的关键是实现神经再生,修复缺失的神经网络环路.而神经干细胞的发现使人们对脑中风后遗症的彻底治愈燃起了新的希望.

  • 标签: 缺血性脑血管疾病 神经干细胞增殖 神经元细胞 MK-801 缺血大鼠 脑中风后遗症
  • 简介:观察大鼠下丘脑各核团NOS阳性神经的分布,采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)法,结果显示,大量NOS阳性神经见于下丘脑外侧区,视上核(SO)室旁核(Pa);出现较多NOS阳性神经的部位是视前大细胞核,见到少量NOS阳性神经的部位是室周核,视前内侧区,视前外侧区下丘脑前区,结论:NOS阳性神经分布于下丘脑的许多核团。

  • 标签: 下丘脑 一氧化氮合酶 大鼠 阳性神经元 分布
  • 简介:一氧化氮合酶(NOS)为一含铁的单氧化酶,可催化左旋精氨酸转化为瓜氨酸NO.而阿霉素(ADR)是一种有效的广谱抗肿瘤药物,由于其心脏毒性作用,使临床应用受到限制.我们在探讨阿霉素对心脏损伤病理机制的实验研究中,用双重组化法同时显示心室肌NOS与糖获得成功,现报道如下:1.材料方法:1.1动物模型新西兰纯种白兔于耳缘静脉注射ADR,每次2mg/kg,ADR以生理盐水稀释成1mg/ml,每周一次,共八周,做心室肌损伤模型.取心室肌组织做冰冻切片,厚12μm.1.2主要试剂(1)还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d);(2)四唑仑硝基兰(NBT);(3)0.5%过碘酸氧化液;(4)Schiff液:先将200ml双蒸水煮沸,微火,加入1g碱性复红,再煮沸1min.冷却至50℃加入20ml1N盐酸,待35℃时加入1g偏重亚硫酸钠.室温中静置5小时,变为无色液体后装入棕色瓶内并封口,放入冰箱避光保存待用.1.3双重组化法.(1)将冰冻切片置入丙酮固定1min;(2)经pH7.4PBS液清洗三次,每次5min;(3)入NADPH-d与NBT配制的孵育液,37℃恒温孵育1h;(4)经pH7.4PBS液清洗三次,每次3min;(5)入0.5%过碘酸氧化10~20min;(6)经pH7.4PBS液充分清洗;(7)入Schiff液10min液10min;(8)流水冲洗10min;(9)无水乙醇脱水;(10)二甲苯透明,中性树胶封片.1.4单一组化法显示NOS.(步骤参照双重组化法1~4步)1.5单一组化法显示糖.(步骤参照双重组化法5~8步).2.实验结果:2.1双重组化法显示心室肌中NOS呈蓝色、糖呈红色.2.2单一组化法显示心室肌中NOS呈蓝色.2.3单一组化法显示心室肌中糖呈红色.结论:通过三组切片的比较,发现使用两种方法所显示NOS与糖的颜色及其深浅无明显变化.3.意义3.1用双重组化法可以同时显示心室肌NOS.此法与单一显示NOS组化法单一显示糖元组化法进行比较,结果显示NOS与糖的颜色均无明显改变.此结果说明两组试剂的染色过程不产生交叉影

  • 标签: 一氧化氮合 中的应用 化法
  • 简介:目前,人体解剖学标本材料来源日益困难,而标本的需求日益增大,标本盒装化已成趋势.给盒装标本贴标签图解有助于标本的管理使用.而目前的标签一般为纸制,贴于盒的右上角,其怕水、怕磨、怕碰,经过多轮次的使用,擦拭标签都有不同程度的损伤;而图解置于标本旁与标本不成一.其一,不便于实验准备;其二,不便于学生实验课时与标本的对照:其二,因标本多、图解多、学生多、易造成混乱,标本盒或图解容易损伤;其四,课后不便于标本、图解归位,给管理带来困难.

  • 标签: 盒装标本 标签 图解 技术摘要 卡片夹 制作方法
  • 简介:海马穹窿位于大脑半球内,完全被高度发展的大脑皮质所覆盖,所以要完全暴露海马穹窿以及海马旁结构有一定难度。笔者在实践中摸索出一套实用简便的制作方法,现介绍如下:

  • 标签: 标本制作 海马 穹窿 大脑半球 大脑皮质
  • 简介:本文通过对120例汉族藏族学生耐力爆发力体育项目成绩分析,探讨汉、藏学生素质差异。结果可见,藏族学生耐力爆发力成绩均明显好于汉族学生;反映出藏族汉族学生的体质存在有差异(p〈0.05或0.01),藏族学生体质好于汉族学生。

  • 标签: 体质 汉族 藏族 比较
  • 简介:2004年12月,在天津武警医学院陈金源教授的指导下,以解剖教研室全体教师为主体,在三年制专科学生中选拔10名同学,成立解剖科研小组。至今,共进行了两项课题的研究,发表(含稿件已接收同意发表)国家级核心杂志论文10篇。全体教师的专业素质科研能力有了很大的提高,增强了信心凝聚力;同时也调动了学生的积极性主动性,提高了动手动脑实践创新的能力。

  • 标签: 科研小组 解剖 专科学生 科研能力 专业素质 医学院
  • 简介:人体胚胎学是重点医学基础课程之一,主要研究人个体发生、生长及其发育机理的一门学科。胚胎生长、发育的整个过程既有细胞形态结构的演变,也有组织结构位置的改变,是一个连续的动态变化过程。因此,在教学中,如何表达胚胎在发生发育中时间空间的变化,增强学生对胚胎发生发育时空变化的理解,

  • 标签: 胚胎学教学 发生发育 医学基础课程 人体胚胎学 个体发生 形态结构
  • 简介:长期以来,Guguen等[1]的两步胶原酶灌注法分离获得肝细胞的方法,几乎成了肝细胞分离的经典方法;在此基础上又发展了多种不同的培养方法,如在培养瓶内加纤连蛋白(febronectin)以促进肝细胞附壁[2],添加生长因子于培养基促其生长等.但上述方法步骤繁琐,成本较高,且两步胶原酶灌注法主用于大鼠肝细胞的分离,不适于新生鼠肝细胞的分离,甚至分离成年小鼠肝细胞,都因为血管的纤细,在实际应用中也很困难.

  • 标签: 肝细胞 细胞分离 细胞培养 细胞鉴定 胶原酶
  • 简介:目的观察水通道蛋白-4(AQP4)在雄性大鼠睾丸附睾的表达及分布特点,为探讨水通道蛋白在睾丸附睾中的作用提供形态学基础。方法采用免疫组织化学的方法,检测AQP4在睾丸附睾的表达分布。结果AQP4在睾丸中表达于各级生精细胞、支持细胞以及间质细胞中;在附睾管内表达于柱状上皮细胞,且腔面表达更明显。结论AQP4可能参与了精子的生成及成熟过程,在激素的分泌调节中发挥作用。

  • 标签: 水通道蛋白-4 睾丸 附睾
  • 简介:目的探究大鼠脊髓损伤后磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP1)的表达意义。方法本研究采用105只Sprague-Dawley雌性大鼠,随机分为假手术组实验组。采用Allen’s法制备大鼠脊髓损伤模型,应用免疫组织化学方法检测PEBP1在脊髓中的定位变达,采用实时定量PCR蛋白免疫印迹检测PEBP1的mRNA蛋白在脊髓中的表达变化。结果免疫组织化学结果显示PEBP1在正常脊髓后角的神经胶质细胞的胞浆胞核中表达,在脊髓损伤后与sham组相比PEBP1免疫阳性细胞数明显减少。此外,实时定量PCR显示PEBP1的mRNA在大鼠脊髓损伤后12h,1d,3d,7d,14d28d的表达量明显降低,与sham组相比差异具有统计学意义(P〈0.01);免疫印迹实验显示,与sham组相比,PEBP1蛋白在大鼠脊髓损伤后的7d,14d28d表达量降低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论脊髓损伤后PEBP1的mRNA蛋白表达水平均降低,在脊髓后角的表达明显减少。提示脊髓损伤后PEBP1可能参与调控神经胶质细胞的存活凋亡,进一步影响脊髓损伤后的感觉功能。

  • 标签: 脊髓损伤 PEBP1
  • 简介:1神经科学关于学习记忆的基本原理研究根据经典的Hebb原理,学习记忆是以同时活跃的神经之间的突触修饰能力为基础的。唐亚平等利用基因技术,通过增强神经之间的依赖NMDA(N-Methyl—D-Aspartate即N-甲基-D-天冬氨酸)受体2B(NR2B)的突触性结合能力,诱导维持长时程增强(LTP)效应,可以明显提高受试动物的学习记忆能力,并发现NR2B的功能(活化)的可恢复性对记忆的巩固维持具有决定作用。

  • 标签: 记忆能力 学习 N-甲基-D-天冬氨酸 应激 结合能力 长时程增强
  • 简介:对山东地区50套成人椎骨的第3颈椎到1胸椎进行观察测量,主要结果为:颈椎横突与脊柱水平面间的角度从上到下依次递增,其横突下倾角C3为10.82±2.18°,C7为134.12±12.43°。中位椎间孔的垂直轴线与脊柱正中矢状面之间的角度较小,而上下位角度较大,本文结合临床及颈椎X线摄片方法进行了讨论。

  • 标签: 颈椎 横突 椎间孔 测量 临床意义