简介：摘要目的探讨在肺腺癌中含SAM域和HD域蛋白1（SAMHD1）与程序性死亡配体-1（PD-L1）表达的相关性。方法通过在线数据库GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分析SAMHD1在肺腺癌中的表达及对预后的影响。通过实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白质印迹法检测SAMHD1在多个肺腺癌细胞株中的表达。利用小干扰RNA转染及慢病毒感染技术分别对H1975、H1299及LLC细胞进行SAMHD1基因沉默，通过qPCR、蛋白质印迹法检测对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组肺腺癌细胞中PD-L1 mRNA及蛋白表达水平，用流式细胞术检测细胞膜PD-L1的表达水平。构建小鼠肺腺癌移植瘤模型，用免疫组织化学法检测对照组和shSAMHD1组移植瘤组织中PD-L1的表达。用CCK-8检测对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组肺腺癌细胞增殖活力。结果GEPIA数据库结果表明，SAMHD1 mRNA在肺腺癌中的表达较肺正常组织低（4.81±0.90 vs. 5.99±0.76，t=20.67，P<0.001）。SAMHD1高表达患者中位总生存期明显长于低表达患者（109.0个月vs. 87.7个月，χ2=26.83，P=0.002）。A549、PC9、H1299和H1975细胞中SAMHD1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.02、0.75±0.05、3.49±0.19和7.25±0.38（F=589.00，P<0.001），蛋白相对表达量分别为1.00±0.06、0.34±0.07、1.67±0.22和2.11±0.63（F=15.79，P=0.001）。H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组的PD-L1 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、1.54±0.26、2.89±0.13（F=102.30，P<0.001），蛋白相对表达水平分别为1.00±0.01、1.50±0.10和1.52±0.33（F=6.65，P=0.030）；H1299细胞中，3组的PD-L1 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.08、1.63±0.03和2.14±0.03（F=368.80，P<0.001），蛋白相对表达水平分别为1.00±0.07、1.88±0.35和2.05±0.38（F=10.66，P=0.011），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组PD-L1表达水平均高于对照组（均P<0.05）。流式细胞术结果表明，H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组膜PD-L1荧光强度分别为246.83±27.59、325.60±8.00和308.93±7.60（F=17.56，P=0.003）；H1299细胞中，3组的荧光强度分别为959.00±6.25、1 084.33±7.64和1 085.33±21.22（F=86.74，P<0.001），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组荧光强度均高于对照组（均P<0.05）。在小鼠移植瘤模型中，shSAMHD1组PD-L1的H-SCORE评分高于对照组（7.99±1.10 vs. 4.49±0.43，t=5.13，P=0.007）。H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组72 h细胞增殖活力分别为0.50±0.02、0.75±0.05和0.73±0.06（F=25.01，P=0.001）；H1299细胞中，3组72 h细胞增殖活力分别为0.80±0.01、1.00±0.04和0.93±0.07（F=13.90，P=0.006），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组细胞增殖活力均高于对照组（均P<0.05）。结论在肺腺癌中，沉默SAMHD1可以提高PD-L1的表达。

简介：摘要目的探讨Myosin X对肺癌H1975细胞系放射敏感性调节及相关机制。方法蛋白免疫印迹法检测肺癌细胞系中Myosin X表达量以获取实验对象。运用CRISPR/Cas9技术建立敲除Myosin X的H1975细胞系(KO组)和感染对照病毒的H1975细胞系(NC组)，并进行敲除效率验证。克隆形成实验及多靶单击模型检测两组细胞对射线敏感性差异。γ-H2AX焦点形成实验及RNAseq差异分析技术寻找可能参与Myonsin X介导的肺癌细胞系放射敏感性调节机制。结果Myosin X在H1975细胞中表达量明显高于其他细胞系(P<0.01)。经鉴定成功构建了Myosin X sgRNA-Lenti-CRISPR v2慢病毒载体，嘌呤霉素筛选后得到Myosin X完全敲除的H1975(KO组)及对照组(NC组)细胞系。克隆形成实验证明相较于NC组，KO组对射线的敏感性更强(D0值从1.28 Gy下降至1.03 Gy，SF2从0.29下降至0.21，放射敏感性比为1.24)。γ-H2AX焦点形成实验显示照后1、6 h KO组形成的损伤焦点数均多于NC组(P<0.05)，RNAseq差异分析技术结果显示KO组ISLR蛋白表达明显低于NC组(P<0.05)。结论敲除Myosin X可以增强肺癌H1975细胞的放射敏感性，其机制可能与干扰DNA双链损伤修复以及降低ISLR表达有关。

简介：摘要肿瘤免疫疗法通过调节先天免疫和适应性免疫系统来对抗肿瘤。环鸟苷酸-腺苷合成酶(cGAS)是外源性和内源性DNA先天免疫应答的关键调节因子。cGAS识别胞质DNA后，产生第二信使cGAMP，随后与激活干扰素调节因子3接头蛋白STING(也被称为MITA、MPYS和ERIS)结合诱导产生Ⅰ型干扰素和炎性细胞因子来介导抗先天免疫。最近的研究阐释了该通路能被来自肿瘤自身的DNA和基因组不稳定性副产物激活并影响肿瘤发生发展，在天然抗肿瘤免疫及免疫检查点阻滞治疗中起关键作用。本综述概述了在肿瘤中对cGAS-STING信号通路的认识，强调了其在肿瘤免疫和放疗中的重要作用，以及针对该通路的潜在靶向或替代治疗方法。

简介：摘要目的探讨在既往未使用过酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的表皮生长因子受体(EGFR)突变的非小细胞肺癌脑转移患者中，脑放疗介入的时间及脑放疗方式的选择。方法回顾性分析武汉大学中南医院放化疗科2014年1月至2018年9月收治的69例合并脑转移的EGFR突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者，根据脑部放疗介入时间将患者分为两组：早放疗组(45例)即确诊脑转移后先行脑部放疗并接受TKI药物治疗，晚放疗组(24例)即先使用TKI药物至出现脑转移病灶进展后行脑放疗，早放疗组根据脑放疗方式可分为早全脑放射治疗(WBRT)组(20例)，早立体定向放射外科(SRS)组(25例)，比较患者的总生存(OS)、颅内无进展生存(iPFS)及无进展生存(PFS)。结果入组69例患者的中位OS为31.2个月，早放疗组与晚放疗组1年和2年OS分别为95%、64%和80%、35%，两组差异有统计学意义(χ2＝8.87，P<0.05)。进一步分析显示，早WBRT组、早SRS组及晚放疗组1年和2年OS分别为95%、96%、80%和42%、88%、35%(χ2＝12.01，P<0.05)。早SRS组较晚放疗组有OS获益(HR：0.10, 95%CI：0.23～0.46，P＝0.003)，而早WBRT组较晚放疗组OS未见显著获益(HR：0.54, 95%CI：0.21～1.32，P＝0.180)。早放疗组与晚放疗组iPFS及PFS比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于既往未接受TKI药物治疗的EGFR突变的NSCLC脑转移患者，尽早脑部放疗介入有助于延长患者生存期，其中使用SRS较使用WBRT获益明显。

简介：摘要目的探讨局限期小细胞肺癌患者手术治疗的疗效以及术后辅助治疗的价值。方法收集2012年1月至2018年12月间在武汉大学中南医院完成根治性手术切除的44例局限期小细胞肺癌患者的临床资料。采用Kaplan－Meier方法分析患者的中位无疾病进展生存时间(DFS)和中位总生存时间(OS)，采用Cox回归模型分析患者预后的影响因素。结果全组患者的中位DFS为25个月。患者的1、2年无疾病进展生存率分别为70.2%和51.9%。患者的中位生存期为41个月，患者的1、2年总生存率分别为88.4%和69.9%。多因素分析显示，男性(RR＝6.56, P＝0.03)、T分期(RR＝6.23, P＝0.01)、N分期(RR＝6.52, P＝0.03)和胸部辅助放疗(RR＝0.13, P＝0.002)为影响患者术后复发的独立因素。N分期(RR＝3.62, P＝0.01)和辅助化疗周期数(RR＝0.12, P＝0.01)为影响患者预后的独立因素。结论手术可能是局限期小细胞肺癌的一种可选择的初始治疗方式，辅助放疗可减少术后复发的风险，完成足疗程的辅助化疗可使患者生存获益。