简介:摘要目的探讨沙库巴曲缬沙坦对心力衰竭(心衰)大鼠左心室重构和心功能的影响及其机制。方法SPF级雄性Wistar大鼠46只,体重300~350 g,于动物实验室适应性饲养7 d。然后,分为4组,即心衰组(n=12,腹腔注射盐酸阿霉素2.5 mg/kg,每周1次,连续6周,建立心衰模型)、心衰+沙库巴曲缬沙坦组(治疗组,n=12,阿霉素给药方法同心衰组,在首次注射阿霉素前1周开始给予沙库巴曲缬沙坦治疗,按照60 mg·kg-1·d-1剂量灌胃,持续7周)、心衰+沙库巴曲缬沙坦+F13A组[F13A组,n=12,阿霉素及沙库巴曲缬沙坦用药方法同治疗组,在给予沙库巴曲缬沙坦同时,腹腔注射100 μg·kg-1·d-1 血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白(APJ)拮抗剂F13A,持续7周]及对照组(n=10,用相同容量的生理盐水代替阿霉素,给药方法同心衰组)。末次注射阿霉素1周后,采用超声心动图检测大鼠心脏结构及功能。超声检测完成后处死大鼠,留取血液及左心室标本。HE染色观察大鼠左心室心肌组织形态,Masson染色观察大鼠左心室心肌纤维化情况,TUNEL染色法检测大鼠左心室心肌细胞凋亡情况,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qRCR)检测大鼠左心室心肌Apelin和APJ的mRNA表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血浆Apelin-12浓度,Western blot法检测大鼠左心室心肌Apelin和APJ的蛋白表达水平。结果干预完成后心衰组、治疗组、F13A组和对照组大鼠分别存活7、10、8和10只,进入下一步实验。超声心动图结果示,与对照组比较,心衰组大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)均较高(P均<0.05),而左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)均较低(P均<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠LVEDD和LVESD均较低(P均<0.05),而LVEF和LVFS均较高(P均<0.05)。与治疗组比较,F13A组大鼠LVESD较高(P<0.05),LVEF和LVFS较低(P均<0.05)。HE染色结果示,对照组大鼠心肌细胞排列整齐、结构致密,心衰组大鼠心肌细胞排列紊乱、扭曲且细胞间隙增加,治疗组大鼠心肌细胞排列稍整齐、致密,F13A组则与心衰组类似。Masson染色结果示,对照组大鼠左心室心肌间质仅有少量胶原纤维,而心衰组胶原纤维较多,胶原容积分数(CVF)大于对照组(P<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠左心室心肌纤维化程度较轻,CVF较小(P<0.05),而F13A组大鼠的CVF则大于治疗组(P<0.05)。TUNEL检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠心肌细胞凋亡指数较高(P<0.05)。与心衰组比较,治疗组大鼠心肌细胞凋亡指数较低(P<0.05)。与治疗组比较,F13A组大鼠心肌细胞凋亡指数较高(P<0.05)。RT-qPCR和Western blot法检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠左心室心肌组织中Apelin和APJ的mRNA和蛋白水平均较低(P均<0.05);与心衰组比较,治疗组大鼠左心室心肌组织中Apelin和APJ的mRNA和蛋白水平均较高(P均<0.05);与治疗组比较,F13A组大鼠左心室心肌组织中APJ mRNA和蛋白以及Apelin蛋白水平均较低(P均<0.05)。ELISA检测结果示,与对照组比较,心衰组大鼠血浆Apelin浓度较低(P<0.05);与心衰组比较,治疗组大鼠血浆Apelin浓度较高(P<0.05);与治疗组比较,F13A组大鼠血浆Apelin浓度较低(P<0.05)。结论沙库巴曲缬沙坦可部分逆转心衰大鼠左心室重构、改善心功能,而这一作用与Apelin/APJ通路上调有关。
简介:摘要目的探究人表皮生长因子样结构域蛋白7(epidermal growth factor-like domain protein 7,EGFL7)基因在人宫颈癌细胞Hela中低表达对其迁移与侵袭能力的影响。方法将人宫颈癌细胞Hela分为实验组(Hela细胞转染EGFL7-siRNA)和对照组(Hela细胞转染Mock-siRNA),采用实时定量PCR法检测两组细胞中EGFL7 mRNA的含量;蛋白免疫印迹实验检测两组细胞EGFL7蛋白的表达量;利用细胞划痕愈合实验和transwell实验检测两组Hela细胞的迁移与侵袭能力。结果siRNA降低了人宫颈癌细胞Hela中EGFL7的蛋白表达;对照组Hela细胞划痕愈百分率为74.1%±6.8%,EGFL7表达降低后宫颈癌细胞划痕愈合百分率为42.0%±4.9%,划痕愈合能力明显下降(P<0.05);Transwell细胞转移结果显示,对照组Hela细胞成功转移的细胞数量为179.24±20.01,而低表达EGFL7的Hela细胞成功转移的细胞数量为79.22±13.16,转染EGFL7-siRNA的细胞转移能力显著下降(P<0.05);侵袭实验结果表明,对照组成功转移的细胞数量为79.35±8.04,EGFL7-siRNA组成功转移的细胞数量为26.98±6.24,低表达EGFL7的Hela细胞侵袭能力明显下降(P<0.05);低表达EGFL7的Hela细胞E-cad表达上调,MMP2/9蛋白的表达下调(均P<0.05)。结论EGFL7低表达会通过上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)EMT降低人宫颈癌细胞Hela的迁移与侵袭能力。
简介:摘要:新课程把学生视为文化中的人,把课程真正当做一种有文化价值的“文化资本”和精神食粮,用以熏陶学生的心灵,挖掘学生身边的生活体验和生活感悟,让学生在文化中体味生活,在文化中感悟生活。政治教师对课程内容的把握不应仅局限于教材,而应广泛扩展到一切具有人文教育的方面。任何一个情境或活动,或者榜样,凡能开发学识、刺激想象、激发爱心,鼓舞人性尊严,正确地与人沟通,产生此等影响者,均应纳入到人文教育的范围内。高中思想政治教学过程中,教师要及时把学科知识纳入到深刻的人文背景中去,做到人文知识和人文精神相融合,实现新课程改革提出的“知识与技能、过程与方法、情感态度与价值观‘三位一体’”的教学目标。
简介: