简介：摘要目的探讨曲美他嗪预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法选择健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只，体重280～300 g，随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪预处理组。除假手术组外均建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，再灌注120 min时处死大鼠并取下心脏，检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平，测定心肌组织中自杀相关因子(Fas)、FasL、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3分子表达量。组间比较采用LSD法。结果与假手术组比较，模型组和曲美他嗪预处理组大鼠血清中CK[(248.52±7.35)、(177.93±5.11) U/L]、CK-MB[(68.54±2.95)、(50.92±2.94) U/L]、LDH[(763.96±21.56)、(310.06±28.33) U/L]含量显著升高，差异有统计学意义(F＝3 275.866、675.844、555.003，P<0.01)；心肌组织中Fas(3.22±0.36、1.80±0.21)、FasL(2.85±0.34、1.69±0.16)、bcl-2(1.45±0.09、3.12±1.86)和Caspase-3 (4.46±0.27、2.34±0.23)mRNA表达量显著上升，差异有统计学意义(F＝218.549、187.601、351.196、730.616，P<0.01)。与模型组比较，曲美他嗪预处理组大鼠血清中CK、CK-MB、LDH含量显著降低，差异有统计学意义(t＝24.944、13.375、11.218，P<0.01)；心肌组织中Fas、FasL和Caspase-3 mRNA表达量显著下降(t＝10.213、8.975、19.004，P<0.01)，bcl-2 mRNA表达量显著升高(t＝16.141，P<0.01)，差异有统计学意义。结论曲美他嗪预处理能够减轻心肌细胞的缺血再灌注损伤，其机制可能与抑制Fas/FasL途径的过度激活，从而抑制心肌细胞凋亡有关。

简介：摘要目的评价线粒体通透性转换孔(mPTP)在右美托咪定减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康成年雄性SD大鼠80只，体重250～300 g，采用随机数字表法分为5组(n＝16)：假手术组(S组)仅分离右侧颈总动脉，不阻塞；脑缺血再灌注组(I/R组)采用线栓法阻塞右侧颈总动脉2 h恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型；右美托咪定组(D组)脑缺血前和再灌注即刻分别腹腔注射右美托咪定50 μg/kg；mPTP开放剂苍术苷组(A组)脑缺血前10 min时侧脑室注射2 mmol/L苍术苷15 μl，余操作同I/R组；苍术苷＋右美托咪定组(A＋D组)脑缺血前10 min时侧脑室注射2 mmol/L苍术苷15 μl，余操作同D组。于再灌注24 h时行神经功能缺陷评分(NDS)后，处死大鼠取脑组织，提取线粒体，分别测定脑梗死体积、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和MDA含量、线粒体ATP酶(ATPase)活性、线粒体膜电位(MMP)、Bcl-2和Bax蛋白表达、mPTP开放程度。结果与S组比较，其余各组大鼠NDS、脑梗死体积百分比和MDA含量升高，Bax蛋白表达上调，mPTP开放程度增加，GSH-Px含量、MMP、Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2 ＋-ATPase活性降低，Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)；与I/R组比较，D组大鼠NDS、脑梗死体积百分比和MDA含量降低，Bax蛋白表达下调，mPTP开放程度减少，GSH-Px含量、MMP、Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2 ＋-ATPase活性升高，Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05)；与D组比较，A＋D组大鼠NDS、脑梗死体积百分比和MDA含量升高，Bax蛋白表达上调，mPTP开放程度增加，GSH-Px含量、MMP、Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2 ＋-ATPase活性降低，Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05)。结论mPTP参与了右美托咪定减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的过程。

简介：摘要目的探讨远端肢体缺血后处理通过线粒体自噬减轻大鼠局灶型脑缺血再灌注损伤的作用。方法将105只成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组、缺血再灌注组（A组）、缺血再灌注+远端缺血后处理组（B组）、缺血再灌注+远端缺血后处理+等渗NaCl溶液组（C组）和缺血再灌注+远端缺血后处理+线粒体分裂抑制剂（Mdivi-1）组（D组），每组各21只大鼠。假手术组仅暴露和游离右侧颈动脉，A、B、C、D组采用大脑中动脉阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。B、C、D组大鼠于再灌注开始夹闭双侧股动脉实行3个循环的10 min缺血/10 min再灌注，C、D组大鼠在缺血前5 min分别腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液和3 mg/kg的Mdivi-1。比较各组大鼠神经功能缺陷量表（NDS）评分、脑梗塞体积百分比、脑缺血半暗区细胞凋亡率、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/Ⅰ比值、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛及15-F2t-Isoprostane的表达水平。结果假手术组大鼠未发生神经功能缺损和脑梗塞。A、B、C、D组大鼠NDS评分[（2.8±0.6）、（1.6±0.4）、（1.6±0.5）、（2.5±0.5）分]和脑梗塞体积百分比[（48±3）%、（28±4）%、（28±4）%、（41±3）%]比较，差异均有统计学意义（F = 39.237、53.278，P均< 0.001），且B、C组大鼠NDS评分和脑梗塞体积百分比均较A、D组显著降低（P均< 0.05）。假手术组、A组、B组、C组及D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率[（2.3±0.8）%、（54.6±5.2）%、（29.3±3.1）%、（29.8±3.3）%、（51.2±4.5）%]、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值[（0.13±0.03）、（0.32±0.05）、（0.53±0.06）、（0.48±0.08）、（0.35±0.06）]、SOD [（168±19）、（92±13）、（162±21）、（165±23）、（94±15）U/mg]、丙二醛[（4.22±0.28）、（8.41±0.42）、（5.14±0.27）、（5.26±0.31）、（7.93±0.44）nmol/mg]及15-F2t-Isoprostane [（179±86）、（389±105）、（208±89）、（215±85）、（364±103）mg/g]的表达水平比较，差异均有统计学意义（F = 54.658、32.358、59.677、46.195、193.962，P均< 0.001）。进一步两两比较发现，A、B、C、D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、丙二醛及15-F2t-Isoprostane表达水平均较假手术组显著升高，A、D组大鼠SOD表达水平均较假手术组显著降低（P均< 0.05）；与A、D组比较，B、C组大鼠LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和SOD表达水平均显著升高，脑缺血半暗区细胞凋亡率、丙二醛及15-F2t-Isoprostane表达水平均显著降低（P均< 0.05）。结论远端肢体缺血后处理可能通过增加线粒体自噬水平抑制氧化应激反应，从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。

简介：摘要目的探讨他克莫司对肾缺血再灌注损伤大鼠肾组织MMP-2、MMP-9表达的影响。方法选用Wistar大鼠60只，随机分为三组：假手术组、对照组、实验组，每组20只。假手术组仅开腹、分离肾动脉，不阻断血流；对照组于缺血前6 h经尾静脉注射生理盐水1 mL；实验组于缺血前6 h经尾静脉注射他克莫司(0.5 mg/kg)。到达设定的不同灌注时间点采血及肾脏标本，测定血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)；检测肾组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)表达；HE染色分析肾组织病理损伤程度。结果在再灌注2、6和24 h时，实验组的Scr、BUN水平显著低于对照组(P<0.05)，在再灌注0.5、2 h时，实验组MMP-2、MMP-9的阳性表达细胞数较对照组明显减少，差异有统计学意义(P<0.05)，而在再灌注6 h和24 h时，与同期假手术组比较，对照组的MMP-2、MMP-9的阳性表达细胞数增多，差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色光镜下发现：对照组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度重；实验组的肾小管及肾小管上皮细胞病变程度明显减轻；假手术组肾小管及肾小管上皮细胞未见改变。结论他克莫司预处理可以减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制可能与抑制肾脏MMP-2、MMP-9蛋白的表达有关。

简介：摘要目的探讨大豆异黄酮(SI)对局灶性脑缺血再灌注大鼠的血脑屏障(BBB)通透性的影响及相关机制。方法72只健康成年SD大鼠均分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和SI预处理组(SI组)，每组各24只。SI组每天按120 mg/kg体质量给予12 mg/mL SI灌胃1次，Sham组和I/R组每天用等体积生理盐水灌胃1次，均连续灌胃21 d。在实验第22天，I/R组和SI组大鼠用线栓阻断右侧大脑中动脉血流制作大脑中动脉缺血再灌注动物模型；Sham组不插入线栓，未阻断血流，其余手术操作与I/R和SI组一致。I/R组和SI组大鼠缺血2 h后，拔出阻塞的线栓恢复血流，再灌注24 h。根据Zea longa评分，选择造模成功的大鼠。采用2，3，5—氯化三苯基四氮唑(TTC)检测大鼠脑梗死体积，干湿重法检测脑组织含水量，伊文思蓝(EB)示踪法检测BBB通透性，Western blot检测脑组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达。比较三组大鼠的测量数据，分析SI预处理对以上观测指标的影响。结果SI组和I/R组大鼠的神经功能评分、脑梗死体积、脑组织含水量和脑组织内EB含量均高于Sham组，而SI组低于I/R组，分别为(1.50±1.13)、(2.33±0.82)和(0.00±0.00)分，12.5%±2.34%、37.50%±2.28%和0.07%±0.03%，81.75%±0.86%、84.17%±0.54%和78.24%±0.41%，(46.50±1.41)、(55.44±1.37)和(3.83±1.49)μg/g，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。SI组和I/R组MMP-9、TIMP-1表达均明显高于Sham组，分别为0.81±0.23、1.15±0.14、1.15±0.14和2.31±0.20、1.62±0.21、1.62±0.21，差异均有统计学意义(P值均<0.01)；与I/R组相比，SI组MMP-9表达减少、TIMP-1表达增加，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。结论SI可能通过下调缺血再灌注后脑组织MMP-9蛋白表达和上调TIMP-1蛋白表达，降低BBB的通透性，减轻缺血再灌注后脑水肿的程度和脑组织EB的含量。

简介：摘要目的评价Rac1在糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及其与线粒体自噬的关系。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠，8周龄，体重250～280 g，腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。糖尿病模型制备成功大鼠48只，采用随机数字表法分为4组(n＝12)：假手术组(sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血再灌注＋慢病毒抑制Rac1组(I/R＋shRac1组)和缺血再灌注＋阴性慢病毒组(I/R＋NC组)。I/R组采用阻塞大脑中动脉90 min，再灌注24 h的方法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。I/R＋shRac1组和I/R＋NC组分别于模型制备前7 d，经右侧脑室注射Rac1 shRNA慢病毒载体或慢病毒阴性对照载体10 μl。于再灌注24 h时断头取脑，确定脑梗死体积；采用Western blot法检测BNIP3、P62、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ表达，并计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果与sham组比较，余3组脑梗死体积增加(P<0.05)；与I/R组比较，I/R＋shRac1组脑梗死体积降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，BNIP3表达上调，P62表达下调(P<0.05或0.01)，I/R＋NC组各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与I/R＋NC组比较，I/R＋shRac1组脑梗死体积降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，BNIP3表达上调，P62表达下调(P<0.05或0.01)。结论抑制Rac1可减轻糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤，其机制与增强线粒体自噬有关。

简介：摘要目的探讨右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）预处理对大鼠心肌缺血／再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）时心肌组织内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）的影响。方法雄性SD大鼠45只，230~270 g，按随机数字表法分为3组（每组15只）：假手术组（S组）、缺血／再灌注组（I/R组）、右美托咪定＋缺血／再灌注组（D+I/R组）。采用结扎左冠状动脉前降支（left anterior descending coronary artery, LAD ）30 min后松结再灌注6 h的方法构建MI/RI模型。Dex经右侧颈内静脉泵注，先以1.0 μg‧kg-1‧h-1泵注10 min，再以0.7 μg‧kg-1‧h-1泵注15 min。通过伊文蓝和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）双染色法检测心肌缺血面积及心肌梗死面积，实时荧光定量PCR （real-time quantitative PCR, RT-qPCR）检测心肌组织ERS相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78）、C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein, CHOP）及炎症因子IL-1β、IL-6 mRNA的表达水平，Western blot检测心肌组织GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量。结果与S组比较，I/R组和D+I/R组心肌梗死面积和心肌缺血面积增加（P<0.05），GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平升高（P<0.05），GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高（P<0.05）。与I/R组比较，D+I/R组心肌梗死面积减少（P<0.05），GRP78、CHOP、IL-1β、IL-6 mRNA水平降低（P<0.05），GRP78、CHOP、cleaved caspase-3蛋白相对表达量降低（P<0.05）。结论Dex预处理可以有效抑制大鼠MI/RI时的ERS，减轻心肌细胞凋亡和炎症反应。

简介：摘要目的探讨大鼠脑缺血再灌注后c-Jun氨基末端激酶(JNK)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化，以及JNK抑制剂SP600125能否通过下调MMP-9的表达对大鼠脑缺血再灌注损伤起脑保护作用。方法85只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=35)、缺血组(n=35)及SP600125组(n=15)。后2组大鼠采用线栓法制备成右侧大脑中动脉闭塞模型，并缺血1 h后予再灌注，其中SP600125组在脑缺血前30 min侧脑室内注射SP600125溶液(溶于10%二甲基亚砜中，终浓度为20 mmol/L)。于再灌注后48 h时评估各组大鼠的神经功能缺损评分、缺血灶体积比、脑组织含水量；于再灌注后3 h、6 h、24 h及48 h时对假手术组、缺血组大鼠，再灌注后48 h时对SP600125组大鼠采用Western blotting检测缺血皮层中磷酸化(p)-JNK、JNK及MMP-9蛋白的表达水平。结果与假手术组相比，再灌注后48 h时，缺血组大鼠的神经功能缺损评分明显降低，缺血灶体积比、脑组织含水量明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；再灌注后24 h、48 h时，缺血组大鼠缺血皮层中p-JNK/JNK值、MMP-9蛋白水平均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与缺血组相比，再灌注后48 h时，SP600125组大鼠的神经功能缺损评分明显升高，缺血灶体积比、脑组织含水量明显降低，缺血皮层中p-JNK/JNK值、MMP-9蛋白水平均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脑缺血再灌注后JNK及MMP-9的表达均明显升高，而JNK抑制剂SP600125可通过下调MMP-9的表达以减轻脑缺血再灌注损伤程度，从而起到脑保护作用。

简介：摘要以再灌注为核心优化救治策略是改善急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者预后的关键。目前所有指南均推荐，在有效的时间窗内进行直接经皮冠状动脉介入治疗（PCI）作为STEMI患者的首选治疗手段。然而，对于不能第一时间就诊于PCI医院的患者，药物介入联合再灌注治疗提供了一种合理、可行的选择。因此，将溶栓与介入进行良好的结合，在基层医院尽早对STEMI患者进行溶栓，其后尽快转运到大型医院实施直接PCI，是一个有前景的治疗策略。

简介：摘要目的研究内蒙古自治区某医院区域救治急性心肌梗死(AMI)再灌注治疗现状，并分析其影响因素。方法纳入2017年内蒙古医科大学附属医院急诊科收治的AMI患者782例，收集病例的一般资料、基本检查、发病季节、就医延迟、治疗方案(再灌注治疗：急诊经皮冠状动脉介入和溶栓治疗；非再灌注治疗)、住院时间及预后等信息，利用统计学方法分析再灌注治疗现状及其影响因素。结果在782例AMI患者中，ST段抬高型心肌梗死(STEMI)660例，非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)122例。男女患者比例为3.5∶1，男性多于女性，但随着年龄增长，女性比例逐渐增加。发病人数第一季度最多(222例)，第三季度最少(175例)。发病12～24 h内就诊的患者最多(228例)。各年龄组间治疗方案比较，差异有统计学意义；STEMI和NSTEMI患者的治疗方案比较，也有显著性差异(均为P<0.05)。非再灌注治疗与再灌注治疗患者的住院时间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论内蒙古地区AMI患者有年轻化趋势，且就诊时间长于全国平均水平，这主要与该地区生活环境、认识水平有关，因此普及疾病知识、完善AMI急救系统、扩大AMI专业队伍是该地区后续改善AMI再灌注治疗现状的重要措施。

简介：摘要目的观察右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）对大鼠离体心脏缺血／再灌注损伤中微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light 3, LC3）及磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B(phosphatidy-linositol 3-kinase/protein kinase B, PI3K/Akt）信号通路的影响，探讨Dex对心肌的保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只，8~10周龄，体重250~300 g，采用Langendorff灌注装置制备离体心脏缺血／再灌注模型。取模型制备成功的心脏48个，采用随机数字表法将其分为4组（n=12）：空白对照组（NC组），K-H液持续灌注120 min；缺血／再灌注组（I/R组），K-H液灌注30 min，全心缺血30 min，再灌注60 min；Dex预处理组（Dex+I/R组），K-H液灌注10 min后再用含有25 μg/L Dex的K-H液灌注15 min, K-H液洗脱5 min，全心缺血30 min，再灌注60 min; Dex预处理+渥曼青霉素组（Dex+I/R+W组），开胸前30 min大鼠腹腔注射渥曼青霉素15 μg/kg，其余处理同Dex+ I/R组。于平衡末（K-H液灌注30 min时）及再灌注末记录心率、左心室内压力上升/下降速率最大值（the maximum rate of increase or decrease of left ventricular pressure, ±dp/dtmax）、左心室发展压（left ventricular development pressure, LVDP）、左心室舒张末期压（left ventricular diastolic pressure, LVEDP）。于再灌注末收集冠状动脉流出液积，酶标仪法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性；取心肌组织，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazoliumchlofide, TTC）染色法检测心肌梗死面积，计算心肌梗死面积百分比；采用Western blot法检测自噬标记物LC3以及Akt、磷酸化蛋白激酶B （phosphorylated Akt, p-Akt ）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR ）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mTOR, p-mTOR）表达量。结果与NC组比较，其余各组HR、±dp/dtmax、LVDP降低，LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性升高，心肌LC3-Ⅱ表达上调，p-Akt及p-mTOR表达下调（P均<0.05 ）。与I/R组比较，Dex+I/R组心率、±dp/dtmax、LVDP增加，LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性降低，心肌LC3-Ⅱ表达下调，p-Akt及p-mTOR表达上调（P均<0.05）。与Dex+I/R组比较，Dex+I/R+W组心率、±dp/dtmax、LVDP降低, LVEDP、心肌梗死面积、冠状动脉流出液LDH活性升高，心肌LC3-Ⅱ表达上调，p-Akt及p-mTOR表达下调（P均<0.05 ）。结论Dex预处理对离体大鼠心脏缺血／再灌注损伤具有保护作用，且该作用可能与PI3K/Akt信号通路激活，引起下游mTOR活性增强从而降低缺血／再灌注期间心肌细胞的自噬水平有关。

简介：摘要目的观察小檗碱(BBR)对2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤半影区内质网应激相关炎症通路的影响。方法72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠，采用高脂饮食和链尿佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型，数字抽签随机将糖尿病大鼠分为假手术组(Sham组)、糖尿病大鼠＋BBR治疗组(BBR组)、糖尿病大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型组(MCAO组)、糖尿病大鼠MCAO＋BBR治疗组(MCAO＋BBR组)，纳入研究每组6只。治疗组在术前48 h、24 h和术后6 h经胃灌注给予相应剂量药物。采用线拴法制备大鼠MCAO模型，进行神经缺损评分，酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达；实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测内质网应激标志蛋白葡萄糖调控蛋白78(GRP78)的mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、胰腺内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、核因子(NF)-κB p65表达情况。结果在脑缺血半影区，缺血2 h再灌注24 h后，MCAO组大鼠神经功能缺损评分(2.83±0.41)分，高于MCAO＋BBR组大鼠(1.67±0.52)分(P<0.05)，促炎因子TNF-α和IL-1β和内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、PERK和NF-κB p65的表达水平亦增高(P<0.05)。BBR治疗亦可降低脑缺血再灌注半影区促炎因子(TNF-α和IL-1β)和内质网应激相关炎症通路蛋白(GRP78、PERK和NF-κB p65)的表达水平。结论BBR可通过抑制内质网应激相关炎症通路降低2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤的炎症反应，发挥神经保护作用。

简介：摘要目的观察鸢尾素后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响并探讨其机制。方法健康雄性SD大鼠(武汉大学实验动物中心提供)36只，采用随机数字表法分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和鸢尾素组(Ir组)，每组12只。IR组和Ir组大鼠采用夹闭左、中叶肝蒂建立大鼠肝脏70%缺血再灌注模型(缺血60 min，再灌注6 h)；Ir组于灌注开始时静脉注射鸢尾素10 μg/kg；S组仅游离肝脏周围血管及韧带。再灌注6 h后下腔静脉采血并留取肝脏组织标本。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及肝脏组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)含量；苏木精-伊红(HE)染色，光镜观察肝脏组织病理学的变化。用蛋白质印迹法检测磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)和磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)的表达水平及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3含量。采用SPSS软件对3组大鼠肝脏指标进行方差分析，并进行两两比较。结果与S组比较，IR组肝脏组织病理学损伤较重；S组、I/R组和Ir组的ALT含量分别为(75.24±2.65)、(705.33±4.02)、(385.46±3.58) U/L；AST含量分别为(122.33±6.76)、(1 357.54±5.23)、(738.26±3.98) U/L；IL-6含量分别为(104±16)、(586±86)、(275±35) ng/L；TNF-α含量分别为(92±10)、(1 165±102)、(511±73) ng/L；IL-1β含量分别为(98±12)、(610±79)、(312±41) ng/L；MDA含量分别为(174±38)、(1 900±460)、(1 055±266) ng/L；SOD含量分别为(124±10)、(46±8)、(70±10) ng/L；GPX含量分别为(106±12)、(42±5)、(62±11) ng/L；Caspase-3含量分别为(0.22±0.06)、(0.86±0.14)、(0.57±0.11) ng/L；p-JAK2含量分别为0.44±0.05、0.91±0.07、0.62±0.11；p-STAT3含量分别为0.35±0.04、0.86±0.08、0.57±0.07。I/R组及Ir组大鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α、IL-1β及肝组织MDA、Caspase-3升高(t＝445.551、219.362、21.700、7.700、36.182、14.132、24.191、10.111、13.753、7.023、14.456、6.556，P<0.01)，差异有统计学意义，SOD和GPX含量降低(t＝20.374、14.104、15.945、10.965，P<0.01)，差异有统计学意义，JAK2和STAT3磷酸化上调(t＝14.289、5.479、19.054、8.224，P<0.01)，差异有统计学意义；与IR组比较，Ir组大鼠肝脏损伤减轻，ALT、AST、IL-6、IL-1β、TNF-α下降(t＝226.183、14.000、14.081、22.052，P<0.01)，差异有统计学意义，肝组织MDA和Caspase-3浓度降低(t＝6.730、7.906，P<0.01)，差异有统计学意义，SOD和GPX浓度升高(t＝6.274、4.985，P<0.01)，差异有统计学意义，JAK2和STAT3磷酸化下调(t＝8.819、10.834，P<0.01)，差异有统计学意义。结论外源性鸢尾素后处理可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤，其机制可能与抑制JAK2/STAT3表达，减轻氧化应激，减少细胞凋亡有关。

简介：摘要目的评价蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β(Akt/GSK-3β)信号通路在IL-4减轻小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及其与自噬的关系。方法清洁级健康雄性Balb/c小鼠40只，10～12周龄，体重20～25 g，采用随机数字表法分为4组(n＝10)：假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、IR＋IL-4组和IR＋IL-4＋Akt抑制剂LY294002组(IR＋IL-4＋LY组)。采用线栓法阻塞大脑中动脉制备脑缺血再灌注损伤模型，缺血60 min，再灌注24 h。IL-4组于模型建立前30 min腹腔注射IL-4复合体溶液0.2 ml，IR＋IL-4＋LY组于模型建立前30 min腹腔注射IL-4复合体溶液0.2 ml，同时尾静脉注射LY294002 15 nmol/kg。再灌注24 h时进行神经行为学评分后处死小鼠脑取组织，采用TTC法检测脑梗死体积，TUNEL法检测细胞凋亡指数，透射电镜下计数自噬小体，比色法测定SOD、MDA和ROS水平，Western blot法检测Akt和GSK-3β磷酸化水平、LC3和Beclin-1的表达，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果与Sham组比较，其余3组神经行为学评分、脑梗死体积和细胞凋亡指数升高，脑组织SOD活性降低，MDA和ROS水平升高，Akt和GSK-3β磷酸化水平降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1表达水平和自噬小体计数升高(P<0.05)；与IR组比较，IR＋IL-4组神经行为学评分、脑梗死体积和细胞凋亡指数降低，脑组织SOD活性升高，MDA和ROS水平降低，Akt和GSK-3β磷酸化水平升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1表达水平和自噬小体计数降低(P<0.05)，IR＋IL-4＋LY组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)；与IR＋IL-4组比较，IR＋IL-4＋LY组神经行为学评分、脑梗死体积和细胞凋亡指数升高，脑组织SOD活性降低，MDA和ROS水平升高，Akt和GSK-3β磷酸化水平降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1表达水平和自噬小体计数升高(P<0.05)。结论IL-4可通过激活Akt/GSK-3β信号通路，抑制细胞自噬，从而减轻小鼠脑缺血再灌注损伤。

简介：摘要目的探究沉默信息调节因子1 （silent information regulator of transcription 1, SIRT1）在大鼠心肌缺血/再灌注损伤（myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI）中对核因子E2相关因子2 （nuclear factor erythroid-2-related actor 2 ，Nrf2 ）／血红素氧合酶-1 （heme oxygenase-1 ，HO-1）信号通路的影响及白藜芦醇（resveratrol, RSV）的保护作用。方法采用随机数字表法将60只健康雄性大鼠分成4组（每组15只）：假手术组（S组）、缺血／再灌注组（I/R组）、白藜芦醇组（R组）、白藜芦醇+ex527组（RE组）。R组、RE组于术前7 d腹腔注射RSV 15 mg/kg，连续7 d, 1次／d; S组与I/R组腹腔注射等容量生理盐水；RE组于缺血前15 min尾静脉注射SIRT1抑制剂ex527 1 μg/kg。采用结扎左冠状动脉前降支30 min，恢复灌注120 min制备MI/RI模型。监测并记录缺血前（T1）、再灌注120 min(T2）时大鼠的心率、MAP和心率与收缩压的乘积（rate-pressure product, RPP）。T2时采用ELISA法检测血清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）及肌酸激酶同工酶（creatine kinase MB, CK-MB）水平。处死大鼠摘取心脏，2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）检测大鼠心肌梗死面积百分比，分别采用硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶法检测心肌丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性，PCR法检测心肌SIRT1 mRNA、Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA水平，Western blot法检测心肌SIRT1、Nrf2、HO-1蛋白水平。结果I/R组、R组、RE组T2时心率、MAP、RPP低于T1时（P<0.05），T2时I/R组、RE组心率、MAP、RPP低于R组（P<0.05）。与S组比较，I/R组、R组、RE组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、血清LDH增加，心肌MDA含量增加，SOD活性降低，心肌SIRT1、Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白水平上调（P<0.05）；与R组比较，I/R组和RE组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、血清LDH、心肌MDA含量增加，SOD活性降低，心肌SIRT1 mRNA、Nrf2 mRNA、HO-1mRNA及蛋白的水平下调（P<0.05）。结论RSV减轻MI/RI的机制与激活SIRT1的表达进一步激活Nrf2/HO-1信号通路减轻氧化应激有关。

简介：摘要目的探讨表氧化二十碳三烯酸（EET）对肾缺血/再灌注（I/R）损伤的作用及其机制。方法30只10周龄无特定病原体（SPF）级的雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、I/R组、I/R+EET干预组（I/R+EET组）、I/R+Toll样受体4（TLR4）抑制剂TAK242干预组（I/R+TAK242组）及I/R+EET+TAK242干预组，每组6只。于再灌注24 h时观察各组肾脏病理改变，检测血清肌酐（Scr）和血尿素氮（BUN）水平。Western印迹分别检测小鼠肾脏NLRP3炎症小体、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）、白细胞介素1β（IL-1β）、TLR4和髓样分化因子（MyD88）蛋白表达水平。结果HE染色显示，I/R组可见肾小管上皮细胞损伤，肾功能下降[BUN：（10.37±0.53）比（6.70±0.82）mmol/L，t=9.17，P<0.001；Scr：（83.67±3.88）比（32.50±3.51）μmol/L，t=23.96，P<0.001]，NLRP3（1.54±0.10比0.71±0.05，t=13.14，P<0.001）、caspase-1（2.35±0.05比0.62±0.02，t=73.77，P<0.001）、IL-1β（3.11±0.11比1.26±0.05，t=35.97，P<0.001）、TLR4（1.58±0.03比0.39±0.01，t=86.00，P<0.001）和MyD88（0.94±0.02比0.26±0.01，t=72.61，P<0.001）表达水平均明显高于正常对照组。I/R+EET组肾功能损害及上述蛋白的表达水平均低于I/R组（均P<0.001），TAK242联合抑制后，各蛋白的表达水平较I/R及I/R+EET组均降低（均P<0.001）。结论EET能够减轻小鼠肾I/R损伤，其机制可能是通过抑制TLR4通路调节NLRP3活化介导的细胞焦亡而产生一定的保护作用。

简介：摘要目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase, p38MAPK）-肌质网Ca2+-ATP酶2α（sarcoplasmic/endoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2α, SERCA2α）信号通路在大鼠心肌缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury, I/RI）中的作用。方法采用随机数字表法将45只雄性SD大鼠（体重250~300 g）分为A组、B组和C组（每组15只），其中A组用于测定心肌梗死面积，B组用于检测心肌组织p38MAPK和SERCA2α蛋白量，C组用于检测心肌组织SERCA2α mRNA。分别将A组、B组和C组组内大鼠按随机数字表法分为3组（每组5只）：假手术组（Sham组）、缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）组（I/R组）、I/R+SB203580组（I/R+S组）。I/R+S组于术前1 h腹腔注射p38MAPK抑制剂SB203580（2 mg/kg），其余两组于术前1 h仅注射等体积生理盐水。采用结扎冠状动脉左前降支（left anterior descending, LAD）30 min后再灌注10 min的方法建立大鼠心肌I/RI动物模型。再灌注结束后，动脉血气分析法监测大鼠内环境状态，Western blot法检测心肌组织磷酸化p38MAPK（phospho-p38MAPK, p-p38MAPK）、SERCA2α蛋白水平，实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）法检测心肌组织SERCA2α mRNA水平，伊文蓝及2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyl tetrazolium chloride, TTC）双染色法测定心肌缺血和心肌梗死面积。结果各组大鼠血气分析结果差异无统计学意义（P>0.05）。与Sham组比较，I/R组与I/R+S组心肌梗死面积与心肌组织中p-p38MAPK蛋白水平明显增加（P<0.05）、SERCA2α蛋白及mRNA水平明显降低（P<0.05）。与I/R组比较，I/R+S组心肌梗死面积明显减少、p-p38MAPK蛋白水平明显降低（P<0.05），SERCA2α蛋白和mRNA水平明显升高（P<0.05）。结论p38MAPK可能通过介导SERCA2α参与大鼠心肌I/RI。

简介：摘要再灌注治疗已成为急性缺血性卒中的标准治疗方法，可有效改善患者转归和降低病死率。有研究发现，再灌注治疗可能会增加卒中后癫痫发作和卒中后癫痫的发生率，但目前对此观点仍存在争议。文章对近年来再灌注治疗与卒中后癫痫发作及卒中后癫痫的相关研究进行综述。

简介：摘要目的研究促肝细胞生长素（PHGF）是否通过上调核呼吸因子1（NRF-1）和线粒体转录因子A（TFAM）表达对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（HIRI）起到保护作用。方法首先将备选干扰序列导入大鼠肝星状细胞HSC-T6中，通过检测NRF-1、TFAM蛋白及mRNA表达，筛选出干扰效果最强序列；然后将108只SD大鼠依据再灌注时间不同（1、3、7 d）随机分为3组，每组36只。每个时间点大鼠又分为实验组和对照组，每组18只，实验组术前4 d分别尾静脉注射相应慢病毒颗粒（1×108个/只），术后每只大鼠腹腔注射PHGF 15 μg/d，对照组术后每只大鼠每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。实验组和对照组分别设置3个组，每组6只，分别为阴性沉默组、靶向沉默NRF-1组、靶向沉默TFAM组，检测每个时间点大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平及肝组织NRF-1、TFAM mRNA表达水平，苏木精-伊红染色再灌注7 d时大鼠肝脏病理学改变。结果从备选序列中选出干扰TFAM、NRF-1表达效果最强序列分别为T2、N3，使用PHGF对HIRI模型RNAi大鼠处理发现，与阴性沉默组比较，降低NRF-1、TFAM mRNA表达水平可导致ALT、AST、TBIL水平明显升高（P<0.05）。使用PHGF处理的实验组大鼠较对照组大鼠ALT、AST、TBIL水平明显降低，以第7天差异最为明显，且NRF-1、TFAM mRNA明显升高（P<0.05）。结论PHGF通过上调NRF-1和TFAM表达对大鼠HIRI起到保护作用。

简介：摘要目的评价低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/Bcl-2/E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)信号通路在七氟烷减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及其与自噬的关系。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠90只，体重300～350 g，采用随机数字表法分为5组(n＝18)：假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)、七氟烷组(SEV组)、HIF-1α抑制剂2ME2组(2ME2组)和2ME2＋七氟烷组(MSP组)。采用结扎冠状动脉左前降支40 min再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。SEV组于再灌注即刻吸入2.4%七氟烷15 min；2ME2组和MSP组在结扎冠状动脉左前降支前1 h时腹腔注射2ME2 15 mg/kg，其余处理同I/R组或SEV组。于再灌注120 min时处死大鼠取左室心肌组织，采用Western blot法检测HIF-1α和BNIP3表达；电镜下观察自噬小体；DHE法检测ROS活性；TTC法确定心肌梗死面积。结果与Sham组比较，其余4组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积增加，I/R组和SEV组HIF-1α和BNIP3表达上调(P<0.05)；与I/R组比较，SEV组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积减少，HIF-1α和BNIP3表达上调(P<0.05)，2ME2组和MSP组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积差异无统计学意义(P>0.05)，HIF-1α和BNIP3表达下调(P<0.05)；与SEV组比较，2ME2组和MSP组心肌ROS活性、自噬小体数目和心肌梗死面积增加，HIF-1α和BNIP3表达下调(P<0.05)。结论HIF-1α/BNIP3信号通路参与了七氟烷减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的过程，与抑制自噬有关。