简介:<正>木瓜蛋白酶分子量为23900,其一级结构和立体结构都已被研究清楚。木瓜蛋白酶中至少有3个氨基酸残基存在于酶的活性部位,它们是Cys─25、His─159和Asp─158。Cys─25的自由疏基对维持酶的活性是至关重要的,当其被氧化成─S─S─或-SO2H、-SO3H,或者当它与重金属离子结合时,则酶活力被抑制。所以在使用木瓜蛋白酶时要加入适当的激活剂。木瓜蛋白酶的激活剂分为还原剂和螫合剂两类。还原剂如半胱氨酸、氰化钾、硫醇、硫化物和亚硫酸盐等,其作用是使─S─S─还原成─SH。金属螫合剂如EDTA,其作用是通过螫合重金属离子使得与重金属离子结合的疏基得到释放,从而再生出Cys─25的自由疏基。
简介:摘要目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9),荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度,采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量,筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×105巨噬细胞和100 μg/ml β葡聚糖体外常规培养12、24 h后,分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9-/-巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组,采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×105巨噬细胞、1×105胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后,分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9-/-巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组,取下室的胰腺腺泡细胞,采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强,浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后,巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06,β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强,且呈β葡聚糖剂量依赖性;而阴性细胞组、100和500 μg/ml β葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化,提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。
简介:摘要目的探讨溶栓治疗时间对急性ST段抬高型心肌梗死患者血清炎性因子、组织蛋白酶(cathepsin S)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)的影响。方法回顾性分析2019年1月至2020年5月枣庄市台儿庄区人民医院接收行急诊溶栓治疗的急性ST段抬高型心肌梗死患者119例的临床资料,按不同溶栓时间段分为三组,A组27例(发病距溶栓时间≤3 h),B组39例(3 h<发病距溶栓时间≤6 h),C组53例(6 h<发病距溶栓时间≤12 h)。比较三组患者血管再通率、血管再通时间、溶栓后2 h、12 h的ST段回落率、血清炎性因子[包括白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)]、cathepsin S、CTGF、LVEF、LVEDD以及心血管不良事件发生情况。结果C组血管再通时间为(148.73±15.37)min,显著长于A、B两组[(89.34±8.95)min、(98.76±9.33)min],血管再通率(45.28%)和ST段回落率[(40.17±4.77)%、(73.92±8.24)%]显著低于A、B两组[96.30%、79.49%、(47.42±5.12)%、(83.68±9.33)%、(43.56±4.87)%、(78.73±8.44)%],差异均有统计学意义(t/χ2=248.088、4.244、20.204、11.146,18.508、19.861、6.271、4.789,17.995、10.932、3.339、4.111,4.100、3.828、3.100、2.244,均P<0.05)。C组溶栓后2 h、12 h的IL-6、TNF-α及hs-CRP水平[(23.29±2.12)ng/L、(27.03±2.75)ng/L、(6.49±2.37)mg/L,(22.73±2.05)ng/L、(26.24±2.37)ng/L、(6.01±2.53)mg/L]均显著高于A、B两组,差异均有统计学意义(t=54.578、54.578、10.638,8.584、8.735、5.199,7.909、7.171、3.597,1.382、1.584、1.008,7.237、5.190、4.364,8.829、11.114、2.585,3.172、6.815、2.196,均P<0.05)。C组溶栓后2 h、12 h的cathepsin S及CTGF水平[(29.97±3.98)μg/L、(30.03±4.79)μg/L,(28.05±2.13)μg/L、(28.29±4.31)μg/L]均显著高于A、B两组[(31.74±3.56)μg/L、(29.87±4.91)μg/L;(20.81±2.35)μg/L、(16.94±3.46)μg/L;(30.95±3.79)μg/L、(29.93±4.95)μg/L;(26.37±2.44)μg/L、(21.46±4.79)μg/L],差异均有统计学意义(t=93.870、68.555、15.039、12.562、6.345、7.679、3.096、1.966、13.882、3.514、11.863、7.164、9.239、4.199,均P<0.05)。C组溶栓后2 h、12 h的LVEF及LVEDD[(42.81±4.77)%、(52.64±4.71)mm,(43.13±5.11)%、(51.57±4.01)mm]均显著低于A、B两组[(42.61±4.58)%、(52.31±4.47)mm,(46.33±4.35)%、(47.75±3.41)mm,(42.73±4.79)%、(52.79±4.76)mm,(44.79±4.44)%、(49.93±3.73)mm],差异有统计学意义(t=4.285、9.193,3.060、4.214,1.970、2.953,0.333、1.259,2.779、1.626,4.229、1.996,1.404、2.416,均P<0.05)。A组心血管不良事件总发生率为7.41%,B组为12.82%,C组为33.96%,差异有统计学意义(χ2=4.383,均P<0.05)。结论急性ST段抬高型心肌梗死发生后溶栓治疗时间越早,患者血管再通率和ST段回落率越高,炎性反应、动脉粥样硬化及心脏重塑越轻,心功能恢复越好,心血管不良事件发生率越低。
简介:艾滋病(获得性免疫缺陷综合征,AIDS)危害人类健康,破坏家庭,威胁社会。2004年全世界艾滋病感染人数又创新高,中国目前的形势也不容乐观。HIV(humanimmunodeficiencyvirus,人免疫缺陷病毒)蛋白酶抑制剂能够有效抑制病毒复制,迅速成为治疗艾滋病的主要药物。本文通过查阅国内外近期关于HIV蛋白酶抑制剂的文献资料,对HIV蛋白酶抑制剂目前运用的现状和临床评价进行综述。
简介:摘要腰椎间盘突出症是因椎间盘退变、破裂、后凸压迫脊髓或神经而出现的综合征。是外科常见疾病外伤或正常的活动使椎间盘压力增加,95%发生于L4、L5或L5-S1椎间盘1,压迫了L5或S1神经根,故主要表现为坐骨神经痛。是临床上较为常见的疾病,长期困扰着人们的健康生活。胶原酶是一种主要溶解胶原蛋白的酶,此酶能溶解髓核和纤维环而不损害邻近结构。我院自2008年10月-2009年8月,采用臭氧(O3)髓核消融术与胶原蛋白酶化学消融术联合应用,治疗患者57例收到满意临床治疗效果。现将护理体会介绍如下。
简介:摘要目的探讨胃镜术前使用糜蛋白酶对提高胃镜视野清晰度及早期消化道病变的检出情况。方法选取2018年1月—12月常熟市第一人民医院消化科(苏州大学附属常熟医院)内镜中心收治的1 942例行常规胃镜检查患者,男997例,女945例,年龄(51.3±11.5)岁,年龄范围为26~75岁,按照随机数表法将其随机分为二甲硅油散组(n=637)、二甲硅油散联合糜蛋白酶组(n=656)和二甲硅油散联合链霉蛋白酶组(n=649)。每组患者口服不同剂量的药物,比较三组患者胃镜视野清晰度和早期病变检出情况。结果二甲硅油散联合链霉蛋白酶组的胃镜视野清晰度[88.6%(575/649)]优于二甲硅油散联合糜蛋白酶组[81.9%(537/656)],两组均优于二甲硅油组[58.9%(375/637)],差异有统计学意义(P<0.05)。与单用二甲硅油散组相比,二甲硅油散联合糜蛋白酶组和二甲硅油散联合链霉蛋白酶组在食管异型增生和早期食管癌的检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05),二甲硅油散联合链霉蛋白酶组在上皮内瘤变[7.6%(49/649)]和早期胃癌检出率[2.3%(15/649)]方面高于二甲硅油散联合糜蛋白酶组[6.4%(42/656)、1.5%(10/656)],差异有统计学意义(P<0.05);其余组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三组患者均顺利完成胃镜检查,检查过程中无严重不良反应。结论在使用二甲硅油散基础上,胃镜术前口服糜蛋白酶不仅可以提高视野清晰度,还能提高早期胃癌和胃上皮内瘤变的检出率。