简介：目的新生鼠缺氧缺血性脑损伤海马caspase-3mRNA的表达。方法7日龄SD大鼠60只，分为假手术对照组和缺氧缺血模型组。运用RT-PCR方法观察损伤后Oh、6h、12h、24h和48hβ-actin以及caspase-3mRNA在两组海马区域的表达。计算、比较两组caspase-3mRNA相对含量。结果对照组caspase-3mRNA呈相对稳定的低表达状态，各时间点之间无显著性差异(F=0．0104，P>0．05)。模型组在缺氧缺血损伤后不同时间点caspase-3mRNA表达出现显著性差异(F=10．8379，P<0．01)；与对照组相比在缺氧后6hcaspase-3mRNA表达显著增高(t=2．59，P<0．05)，12h后有极显著差异(t=3．963，P<0．01)，24h这到高峰(t=6．835，P<0．001)，48h有所下降，但仍处于较高水平(t=6586，P<0．001)。结论caspase-3mRNA在新生鼠海马区域呈低水平表达，缺氧缺血损伤后表达显著增多，且随时间变化，提示caspase-3mRNA参与新生鼠缺氧缺血性脑损伤的发生与发展过程。抑制caspase-3mRNA的转录可能会减轻缺氧缺血对新生鼠的脑损伤。

简介：目的研究细胞角蛋白20mRNA（CK20mRNA）在腹腔镜结直肠癌手术患者外周血中的表达情况，探讨腹腔镜治疗结直肠癌手术对肿瘤微转移的影响。方法将44例结直肠癌患者采用单盲随机方法分为腹腔镜组25例与开腹组19例，采用逆转录聚合酶链反应检测患者术前、术中、术后外周血中CK20mRNA的表达，对132例次标本进行CK20mRNA检测的研究。结果腹腔镜组CK20mRNA阳性表达25例次，阴性表达50例次；开腹组：CK20mRNA阳性表达22例次，阴性表达35例次；2组间比较无统计学意义。结论腹腔镜结直肠癌手术患者外周血术前、术后CK20mRNA表达与开腹手术无统计学意义。腹腔镜结直肠癌手术在肿瘤微转移方面是安全、可行、有效的。

简介：研究半夏生物总碱（PTA）对青霉素慢性点燃癫痫模型大鼠的对抗作用,以及对海马区谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、GABA和GABAA受体mRNA表达的影响,并探讨其抗癫痫机制。通过青霉素慢性点燃癫痫模型大鼠观察PTA对癫痫潜伏期、发作程度的影响;采用高效液相色谱法测定海马区谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、GABA的含量。同时用逆转录PCR技术来分析PTA对大脑GABA_A受体mRNA表达的影响。与正常对照组相比,模型对照组大鼠GABA和甘氨酸水平减少,谷氨酸和天冬氨酸水平增加,GABAA受体mRNA表达减少;而高、低剂量PTA均可以延长青霉素诱发癫痫的潜伏期,并能减轻其发作程度,同时可显著增加GABA以及GABA_A受体mRNA水平,减少谷氨酸的水平,而对甘氨酸和天冬氨酸无明显影响。总之,PTA对大鼠青霉素慢性点燃模型有对抗作用,它可以增加γ-氨基丁酸含量和GABAA受体mRNA水平,以及降低谷氨酸含量。

简介：

简介：目的观察丹参素对糖尿病脑梗塞大鼠脑组织纤溶酶原激活物及其抑制剂mRNA表达，及对血浆纤溶功能的影响，探讨其可能作用机制。方法糖尿病大鼠丹参素治疗一周后，应用自体血栓注入大鼠脑动脉制成糖尿病脑梗塞模型。ELISA方法检测血浆中t—PA、PAI—I含量，RT—PCR方法测定脑组织中t—PA与PAI—I，u—PA与NSP的mRNA表达。结果丹参素治疗组促纤溶因子t—PA含量及mRNA表达升高、抑制因子PAI-I含量及mRNA表达降低。作用强度随丹参素浓度的增大而增强。u—PAmRNA、NSPmRNA的表达无显著性变化。结论丹参素可显著改善糖尿病脑梗塞大鼠血浆纤溶功能，通过促进t—PA含量及其mRNA表达、抑制PAI—I含量及其mR—NA表达，而提高鼠脑纤溶功能。

简介：目的：观察次乌头碱对SD乳鼠心肌细胞内Ca2＋浓度及细胞膜L-Ca通道mRNA的影响。方法：原代培养SD乳鼠心肌细胞，给予不同浓度的次乌头碱，采用流式细胞技术分别检测给药后15min、30min、60min心肌细胞内钙浓度的变化，并分析次乌头碱对心肌细胞内钙浓度的作用与L-Ca通道mRNA表达的相互关系。结果：30-120μM／L次乌头碱引起心肌细胞内游离Ca2＋浓度升高，细胞“钙超载”出现在给药后15min（P〈0．01），且呈一定的剂量依赖性，但无明显的时间依赖性；60μM／L次乌头碱与心肌细胞作用5min即能增加L—Ca通道mRNA表达（P〈0．05），随着次乌头碱浓度的增加，L—Ca通道mRNA的表达也增多，但亦未表现出明显的时间依赖性。结论：次乌头碱为附子中的主要成分之一，其可能通过增加心肌细胞膜L-Ca通道开放数量而导致细胞内钙增加，发生钙超载，并最终导致心律失常的发生。

简介：

简介：目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）及细胞外信号调节激酶（ERK）mRNA在CCl4致实验性肝纤维化大鼠肝组织中的表达及姜黄素（CUR）对它们的影响。方法建立CCl4致大鼠实验性肝纤维化的模型，用免疫组织化学法比较正常组、模型组以及CUR组的α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，用RT—PCR法比较各组肝组织NF-κB以及ERK-1mRNA的表达。结果NF-κBmRNA及ERK—1mRNA的表达：正常组分别为0．317±0．035和0．434±0．067，模型组分别为1．219±0．158和0．944±0．151，CUR组分别为0．912±0．274和0．736±0．293，CUR组与模型组比较，P值均〈0．05．差异有统计学意义。α-SMA的表达：CUR组为4．327±2．064，模型组为6．784±2．158，正常组为0．943±0．371，CUR组与模型组比较．P值均〈0．05．差异有统计学意义。结论CUR可能通过抑制α—SMA的表达，减弱NF-κB诱导的肝星状细胞的活化以及抑制ERK-1的促肝星状细胞的增殖，从而起到抗大鼠肝纤维化的作用。

简介：目的：探讨甲基化酶抑制剂5′-氮杂-2′-脱氧胞苷（5′-Aza-2′-deoxycytidine，5′-Aza-CdR）对结直肠癌细胞株HT-29和Lo-Vo中p16基因甲基化状态、mRNA及蛋白表达的影响。方法应用TaqMan探针为基础的实时定量PCR法、SYBRGreenPCR法及蛋白印迹实验（Westernblot）检测不同浓度5′-Aza-CdR处理前后HT-29和LoVo细胞中p16基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达。结果TaqMan探针为基础的实时定量PCR法检测HT-29和LoVo细胞中p16蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转；实时荧光定量PCR和WesternBlot检测到0．5、1．0、1．5μM5′-Aza-CdR处理后p16基因mRNA和蛋白均重新表达，具有统计学意义（P均＜0．05）。结论结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5′-Aza-CdR能够较成功的逆转结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中p16基因的甲基化状态，并能恢复mRNA及蛋白重新表达。

简介：目的研究晚期非酶糖基化终末产物（AGEs）对大鼠甲状腺细胞甲状腺球蛋白（TG）、甲状腺过氧化物酶（TPO）mRNA表达的影响,探讨糖尿病对甲状腺组织的损伤可能存在免疫机制以外的机制.方法以FRTL细胞为研究对象,给予不同浓度AGEs刺激24、48、72h后使用实时荧光定量PCR测定FRTL细胞TGmRNA和TPOmRNA的表达情况.结果24h：2.5mg/L组（TG2.27±0.25,TPO2.5±0.17）、5.0mg/L组（TG2.07±0.074,TPO1.08±0.15）、10.0mg/L组（TG2.13±0.16,TPO1.08±0.12）、AGEs抗体组（TG2.48±0.12,TPO2.43±0.89）表达水平均低于对照组（TG5.64±0.16,TPO5.19±0.25）,差异有统计学意义（P＜0.01）;48h：2.5mg/L组（TG1.29±0.89,TPO3.44±0.40）、5.0mg/L组（TG1.22±0.16,TPO3.17±0.21）、10.0mg/L组（TG0.67±0.07,TPO1.4±0.13）、AGEs抗体组（TG3.93±0.14,TPO4.91±0.24）表达水平均低于对照组（TG6.17±0.31,TPO5.08±0.23）,差异有统计学意义（P＜0.01）;72h：2.5mg/L组（TG1.25±0.57,TPO1.53±0.11）、5.0mg/L组（TG1.17±0.18,TPO1.61±0.03）、10mg/L组（TG1.09±0.07,TPO0.71±0.06）、AGEs抗体组（TG3.44±0.30,TPO3.06±0.19）表达水平均低于对照组（TG8.10±0.22,TPO8.35±0.25）,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论在体外从细胞和分子水平证明了AGEs对甲状腺细胞TGmRNA和TPOmRNA的表达水平有一定的影响,提示糖尿病对甲状腺组织的损伤可能存在免疫机制以外的机制.

简介：目的探讨刺五加多糖（ASPs）对刀豆蛋白A（ConA）造成的免疫性肝损伤模型的保护作用。方法将BALB／c小鼠随机分成7组，对照组，模型组，ASPs低、中、高剂量（36．25、72．50、145．00mg／kg）组，联苯双酯滴丸（阳性药，200mg／kg）组，吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC，NF-B抑制剂／抗氧化剂，200mg／kg）组。ASPs、联苯双酯滴丸组每天疃给药1次，连续7d；对照组、模型组和PDTC组以0．1mL／10g生理盐水ig给药。于末次ig后，PDTC组ipPDTC，再于0．5h后，除对照组外均尾iv20mg／kgConA诱导肝损伤。8h后处死动物取材，试剂盒法检测血清中天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT），血清、脾脏组织中白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）的蛋白含量；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测脾脏组织中IL-2、IL-4、IFN-γmRNA表达。结果与模型组比较，ASPs显著降低血清中AST、ALT，IL-2、IL-4、INF-γ血清、脾脏组织中的蛋白含量及脾脏组织中mRNA的表达（P〈0．05、0．01），且均呈剂量相关性。结论ASPs降低转氨酶活性、减少炎性细胞因子的分泌和表达，对免疫性肝损伤有一定的保护作用。

简介：目的:以livinmRNA为靶点设计反义硫代脱氧寡核苷酸(PS-ODNs),探讨其体外抗肿瘤效应及其机制.方法:设计以livinmRNA为靶点的反义核酸并作用于MCF-7乳癌细胞,用MTT、RT-PCR和流式细胞仪检测等方法对其进行评价研究.结果:在设计的一些反义核酸中,YMZ05能够有效地抑制livin基因的表达,增加caspase-3的活性,诱导MCF-7细胞凋亡,明显抑制其生长,结论:通过抑制livin基因的表达能够抑制MCF-7乳癌细胞生长、诱导其凋亡,livin可能会成为抗肿瘤的新靶点.

简介：目的：观察大鼠脊髓一氧化氮合成酶（nitricoxidesynthase,NOS)表达，探讨其意义。方法：采用辅酶II黄递酶（NADPH－diaphorase,NADPH-d)组织化学染色技术。结果：脊髓内含NOS神经元数目较少，除集中分布于后角外，大部分含NOS神经元多位于血管旁，有许多神经元胞体位于血管外膜上，其突起包绕血管外膜或沿国管外膜平行走行，有些神经元虽与血管外膜无直接接触，但其突起和血管外膜有接触的神经元密切接触，结论：大鼠脊髓中存在大量含NOS神经元，此类神经元与调节脊髓血管血流有密切关系。

简介：宫颈癌是唯一病因明确,可预防的恶性肿瘤,因而宫颈癌的早期筛查意义深远。目前,宫颈癌初筛检查项目包括：宫颈人乳头瘤病毒（HPV）分型检测及宫颈液基细胞学（TCT）检查,然而,大多数患者宫颈HPV常常为一过性感染,数月后可转阴,且细胞异型性通常会自行消失,进展为宫颈癌者寥寥无几。因其灵敏度高,特异性较低,临床常出现过度诊治,同时还会造成患者的心理恐慌,增加患者的经济负担,因此寻找更有效的宫颈癌筛查方法成为关注的焦点。

简介：介绍近2年来抗癌方剂实验研究的最新进展。介绍了涤痰化瘀汤、加味四逆泻心汤、四君子汤、仙鱼汤、健脾理气方、益气解毒方、抑肺饮、消积饮、胃宁颗粒、昆参颗粒、润肺散结胶囊、灵芪胶囊、反左金丸、肺-丸、星半通膈散、二鳖散、平瘤合剂、肺抑瘤合剂、连黛片、清毒栓等36个方剂对肿瘤相关基因p53、p16、p21、Rb、PTEN、c—myc、c-jun、c—erbB、Bcl-2、Bax、hTERT、VEGF、endostatin、cadherins、MMPs、COX-2、IGF-II、bFGF、GFAP表达的影响。

简介：

简介：有许多不同的酵母已经有效地被利用来分析或表达真核蛋白。酵母的优点是生长快速，发酵条件可轻易批量化，设备相对简单．各项遗传和生物特性都被充分了解，更重要的是可以像哺乳动物细胞一样做转译后的修饰．所以非常适合于真核重组蛋白的大量生产。

简介：目的探讨胃癌患者癌组织中卵巢癌差异表达基因2相互作用蛋白（DAB2IP）的表达情况及其与临床预后的相关性。方法选取2014年1月—2015年12月收治的100例胃癌组织作为病例组,抽取40例胃癌癌旁正常组织作为对照组,采用免疫组织化学SP法检测DAB2IP的表达情况;并分析DAB2IP在胃癌组织中表达与患者临床病理参数间的关系,同时根据DAB2IP在胃癌组织中表达情况对随访资料进行Kaplan-Meier生存分析。结果病例组的DAB2IP阳性表达率显著低于对照组（P〈0.05）。DAB2IP在胃癌中的表达与胃癌的组织学类型、浸润深度、临床分期、淋巴结是否转移显著相关（P〈0.05）。DAB2IP阳性表达胃癌患者的中位生存时间明显长于DAB2IP阴性表达胃癌患者（P〈0.05）。结论DAB2IP下调可能在胃癌的发生、发展中起一定的作用,能为胃癌的诊断、术后疗效评估、预后判断提供参考。

简介：目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten的原核表达体系，并于大肠杆菌中初步表达。方法从健康产妇胎盘组织中提取总RNA，经反转录．聚合酶链式反应扩增出Arresten基因，将基因克隆人克隆载体（pMD19-T）中，测序确认。酶切后插入表达载体pBV221，转入大肠杆菌JM109进行温控诱导表达，经蛋白质免疫印迹技术（Western-blot）检测Arresten蛋白的表达。结果酶切鉴定证实Arresten基因正确地插入表达载体中。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析，重组体Arresten在大肠杆菌中获得表达，分子量约为26000，表达量约占菌体总蛋白的30％。经Westernblotting检测表明该异源重组蛋白具有添加的亲和纯化标签多聚组氨酸标签抗原活性。结论成功构建了有效的原核表达体系pBV221-Arresten。

简介：胃癌居消化道恶性肿瘤之首位,监测其发生发展,寻求衍变过程中出现的客观指标和探索癌变后代谢调控变化,是重要的研究方面之一。核仁形成区嗜银蛋白(Ag—NOR)颗粒计数目前被视为一种反映细胞增殖程度的指标,用于肿瘤恶性程度的判断,而性激素非依赖性靶器官癌变后其受体的变化已受到医学界关注。这两者间有何内在联系?我们选择胃癌组织进行了Ag-NOR和雌激素受体(ER)的比较研究,以进一步了解ER在激素非依赖性靶器官肿瘤中的生物学意义。