简介：无

简介：摘要目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例，采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平，Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组)，将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况，细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23，高于正常癌旁组织(0.11±0.04，P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01，均高于16HBE细胞(0.03±0.01，均P<0.05)；RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较，siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03，均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个，高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个，P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%，高于shNC组[(49.61±1.54)%，P<0.05]；S期占比为(25.41±3.21)%，低于shNC组[(38.68±0.46)%，P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%，低于shNC组[(35.50±2.07)%，P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个，高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个，均P<0.05]。与siNC组相比，敲低CacyBP的表达，E-cadherin的表达水平升高，N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比，Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低，N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05)，PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例，采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平，Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组)，将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况，细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23，高于正常癌旁组织(0.11±0.04，P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01，均高于16HBE细胞(0.03±0.01，均P<0.05)；RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较，siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03，均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个，高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个，P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%，高于shNC组[(49.61±1.54)%，P<0.05]；S期占比为(25.41±3.21)%，低于shNC组[(38.68±0.46)%，P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%，低于shNC组[(35.50±2.07)%，P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个，高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个，均P<0.05]。与siNC组相比，敲低CacyBP的表达，E-cadherin的表达水平升高，N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比，Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低，N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05)，PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探究钙结合蛋白S100A16在胰岛素抵抗中的作用。方法用S100A16抗体进行免疫沉淀，然后用蛋白质谱分析寻找与S100A16相互作用的蛋白。实验1转染Vector质粒的HepG2细胞作为对照，用转染shRNA质粒、S100A16过表达质粒干预作为处理组。实验2以慢性胰岛素刺激细胞构建胰岛素抵抗模型，采用转染shRNA质粒的细胞作为对照，用未转染和转染Vector质粒干预作为处理组。实验3以不做任何处理的细胞作为对照，在胰岛素抵抗模型中用吡格列酮干预作为处理组。Western blot检测相关蛋白的表达水平。组间比较采用成组t检验。结果与转染Vector质粒比较，转染S100A16过表达质粒中胎球蛋白A表达（1.39±0.54比2.85±0.25）水平上调（P < 0.05）；与转染Vector质粒比较，转染shRNA质粒胎球蛋白A蛋白表达（0.36±0.03比0.20±0.03）水平降低（P < 0.01）。在胰岛素抵抗条件下，与转染shRNA质粒的细胞比较，未转染和转染Vector质粒的IRS-2蛋白表达（0.11±0.04比1.65±0.48）水平上调（P < 0.01）；与不做任何处理的细胞比较，用吡格列酮处理的细胞IRS-2表达（0.26±0.11比0.52±0.05）水平上升（P < 0.01）。结论S100A16在HepG2细胞中通过胎球蛋白A促进胰岛素抵抗。

简介：目的探讨脆性X综合征中钙结合蛋白Calbindin在神经元树突棘形态异常中的作用。方法我们选用FVB品系的FMR1基因敲除型（KO）和野生型（WT）小鼠，分别取新生l、3、5、7、10、14d，及成年（6周）的KO小鼠以及WT小鼠用免疫组织化学方法检测钙结合蛋白Calbindin在脑组织中的分布和表达情况，分别对大脑纹状皮质、海马、颞叶听区、梨状皮质、丘脑及小脑的免疫阳性显色细胞进行检测。结果在新生1d龄WT型及KO型小鼠中Calbindin免疫阳性细胞首先出现于梨状皮质和小脑皮质中，随着天龄的增长脑内其他各区逐渐出现Calbindin免疫阳性细胞的表达．且≤10dKO型小鼠Calbindin免疫阳性细胞平均光密度均显著高于WT型小鼠（P〈0．05）。结论FMRP通过负性调节脑内钙结合蛋白Calbindin的表达，这推测与FMR1基因敲除小鼠神经元树突和树突棘形态异常有关。

简介：摘要目的探讨β2-微球蛋白(β2-MG)、S100B钙结合蛋白(S100B)在颅脑损伤术后脑脊液中的表达与交通性脑积水发生关系。方法选择2016年5月至2019年6月宁波市第七医院、波市镇海龙赛医院、浙江大学医学院附属第二医院收治的298例颅脑损伤患者为病例组，同期在我院体检健康者100例为对照组，比较对照组与病例组脑脊液中β2-MG、S100B水平，根据298例颅脑损伤患者术后是否发生交通性脑积水分为非交通性脑积水组(n＝247)与交通性脑积水组(n＝51)，比较非交通性脑积水组与交通性脑积水组脑脊液中β2-MG、S100B水平，采用Spearman相关分析颅脑损伤患者术后脑脊液中β2-MG、S100B水平与交通性脑积水的相关性，采用受试者工作特征曲线(ROC)分析颅脑损伤患者术后脑脊液中β2-MG、S100B水平对交通性脑积水的预测价值。采用χ2检验及t检验。结果交通性脑积水组脑脊液中β2-MG、S100B水平显著高于非交通性脑积水组(P<0.05)；颅脑损伤患者术后脑脊液中β2-MG、S100B水平与交通性脑积水呈正相关(P<0.05)；颅脑损伤患者术后脑脊液中β2-MG、S100B联合预测交通性脑积水的曲线下面积(AUC)、敏感性、特异性、准确性依次为0.925、77.90%、96.00%、91.65%。结论β2-MG、S100B在颅脑损伤术后脑脊液中呈高表达，β2-MG、S100B在颅脑损伤术后脑脊液中高表达与交通性脑积水发生有相关，颅脑损伤患者术后脑脊液中β2-MG>2.04 mg/L且S100B>0.41 μg/L对交通性脑积水有较高的预测价值。

简介：摘要目的观察脑损伤早产儿血清钙结合蛋白(S100B)、髓鞘碱性蛋白(MBP)和特异性烯醇化酶(NSE)水平变化及其与早产儿脑损伤发生的相关性。方法收集2017年7月至2018年7月于温州市人民医院分娩的脑损伤早产儿120例和同期健康早产儿120例为研究对象，分别于新生儿出生后24 h内、出生后3 d和出生后7 d检测血清S100B、MBP和NSE水平，观察各指标水平变化，比较健康早产儿与脑损伤早产儿之间以及不同脑损伤严重程度早产儿之间血清S100B、MBP和NSE水平的差异，统计分析早产儿出生后24 h内血清S100B、MBP和NSE水平与脑损伤发生的相关性。结果出生后各时间点，脑损伤早产儿组血清S100B、MBP和NSE水平均显著高于健康早产儿组(t＝8.458～24.963，均P<0.05)；出生后各时间点，不同严重程度脑损伤早产儿之间血清S100B、MBP和NSE水平差异均有统计学意义(F＝7.041～18.417，均P<0.05)，重度脑损伤早产儿组各指标水平均显著高于中度脑损伤早产儿组和轻度脑损伤早产儿组，且中度脑损伤早产儿组各指标水平均显著高于轻度脑损伤早产儿组(t＝6.537～34.962，均P<0.05)；早产儿出生后24 h内血清S100B、MBP和NSE水平均与脑损伤的发生呈显著正相关性(r＝0.817～0.883，均P<0.05)。结论早产儿血清中S100B、MBP和NSE水平与脑损伤的发生呈正相关性，检测上述指标对早产儿脑损伤早期诊断及病情评估具有较高临床价值。

简介：针刺后大鼠大脑海马区CalbindinD28k阳性细胞表达显著增加(与脑缺血模型组比较,针刺治疗组大鼠海马区CalbindinD28k的表达增加,脑缺血模型组大鼠海马区CalbindinD28k的表达显著减少

简介：摘要肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis, ALS）是一种同时累及大脑锥体细胞、脑干运动细胞核、脊髓前角细胞和锥体束的神经系统变性疾病，早期诊断非常困难，目前尚无特效治疗，预后较差，平均寿命3~5年。研究和发现ALS在早期诊断中特异性的生物标志物，对于缩短诊断延迟时间、探讨和阐明发病机制、监测疾病进展和判断预后非常重要。近年的研究表明，神经丝蛋白（neurofilament）在上述方面具有重要的作用，是目前认为最具临床价值和应用前景的ALS生物标志物。因此，本文对神经丝蛋白与ALS的有关研究进行了综述。

简介：目的研究转录因子扭曲基因（Twist）在喉鳞癌（LSCC）中的表达及其通过对上皮型钙黏附蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏附蛋白（N-cadherin）的作用在判断肿瘤的生物学行为方面的意义。方法采用免疫组织化学SP法及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测49例喉鳞癌及20例癌旁组织中Twist、E-cadherin和N-cadherin基因的表达情况。结果Twist在喉癌组织中的阳性表达率（61.22%）明显高于癌旁组织（25%）（P〈0.01）；Twist在喉癌组织中的mRNA相对表达量（0.93±0.39）明显高于癌旁组织（0.57±0.24）（P〈0.01）；Twist在喉癌中蛋白及mRNA表达均与淋巴结转移、临床分期相关，而与肿瘤病理学分级、临床分型及年龄无关。在mRNA及蛋白水平，Twist与E-cadherin，N-cadherin与E-cadherin的表达均呈负相关；Twist与N-cadherin均呈正相关。结论Twist在喉鳞癌中过度表达,可能通过分别上调N-cadherin和下调E-cadherin的表达，进而在喉鳞癌的浸润、转移过程中发挥重要作用。

简介：

简介：选用30个结构多样的CaM抑制剂分子作为数据集，采用多元线性回归（MLR）方法及主成分回归分析（PCA）方法对每个化合物的194个分子参数进行回归分析，分别建立了各自的最优预测模型．结果表明：多元线性回归分析方法所建模型与主成分回归所建模型相对比，发现逐步筛选法为最优建模方法．该方法所建模型统计结果良好（R^2=0．952，SEE为0．289），应用于检验集时结果也比较令人满意（R^2=0．941，SEP为0．295），模型表现出较强的可靠性和预测性．

简介：妈妈住了两个半月的医院，今天终于回家了。

简介：摘要目的研究分析血β2微球蛋白联合视黄醇结合蛋白检测在早期肾损伤中的意义。方法此次研究的对象是选择我院收治早期肾损伤患者150例，将其临床资料进行回顾性分析，并作为观察组，另选取同期健康体检者150例作为对照组，比较两组血β2微球蛋白和视黄醇结合蛋白水平。结果观察组血β2微球蛋白、视黄醇结合蛋白水平均比对照组高，且血β2微球蛋白、视黄醇结合蛋白检测阳性率均比对照组高（P<0.05）。结论血β2微球蛋白联合视黄醇结合蛋白检测在早期肾损伤中的临床意义较大，为评价疾病可靠性指标，据此在疾病早期积极采取有效防治举措，促进患者预后改善。?

简介：目的建立蛋白结合类尿毒症毒素蛋白结合率的检测方法,测定慢性肾脏病（chronickidneydisease,CKD）患者血清马尿酸（hippuricacid,HA）、硫酸吲哚酚（indoxylsulfate,IS）、硫酸对甲酚（p-cresylsulfate,PCS）及3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸（3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furan-propionicacid,CMPF）4种蛋白结合类尿毒症毒素的蛋白结合率。方法通过对方法的专属性、线性关系、精密度等考察,验证超滤法联合高效液相色谱-串联质谱法（highperformanceliquidchromatagraphy-tandemmassspectrometry,HPLC-MS/MS）测定蛋白结合类尿毒症毒素的游离浓度的可行性,并采用该方法测定CKD患者血清HA、IS、PCS、CMPF的蛋白结合率。结果内源性干扰物质在待测物的出峰位置基本不干扰HA、IS、PCS、CMPF的测定;本方法在10-1000ng/ml（IS、PCS、CMPF）、50-5000ng/ml（HA）范围内线性良好;日内精密度为0.84%,日间精密度为1.18%;超滤膜回收率均〉95%;健康对照组HA、IS、PCS及CMPF的蛋白结合率为（83.44±3.04）%、（98.73±0.55）%、（98.42±0.95）%、（96.66±2.65）%;CKD3-5期HA、IS、PCS及CMPF的蛋白结合率依次为3期（79.72±3.82）%、（99.18±0.45）%、（98.64±0.64）%、（95.89±3.52）%;4期（71.09±7.66）%、（98.24±0.95）%、（98.26±0.73）%、（91.82±5.10）%;5期（61.22±7.62）%、（97.41±1.10）%、（96.85±1.51）%、（97.51±1.52）%。结论所建立的方法灵敏度高,专属性和重复性好,操作简单,能够满足定量分析测试要求。HA蛋白结合率均〉60%,与HSA之间具有中等强度结合,IS、PCS及CMPF的蛋白结合率均〉90%,与HSA之间具有高强度结合。

简介：１资料与方法资料：对照组１４０例，均系健康义务献血人员，男８８例，女５２例；年龄２０～５０岁，平均３２．５岁。恶性肿瘤组１３８例；早期４５例，中期３８例，晚期５５例。方法：器仪Ａａ—４００大型生化分析仪，随机配套试剂，均空腹采肘正中静脉血，严格按该机操作说明进行。２结果对照组１４０例血清钙为（２．２９±０．１８）ｍｍｏｌ／Ｌ。肿瘤组１３８例，血清钙为（２．１８±０．２２）ｍｍｏｌ／Ｌ，其中早期４５例，血清钙为（２．２４±０．１７）ｍｍｏｌ／Ｌ中期３８例血清钙（２．２０±０．２１）ｍｍｏｌ／Ｌ，晚期５５例血清钙为（１．９５±０．２３）ｍｍｏｌ／Ｌ。随机取恶性肿瘤组中患者１００例（早

简介：丝蛋白纤维材料是具有普适意义的天然生物材料，具有优良的生物相容性、生物可降解性、低炎症反应和优秀的机械性能。文章通过分子模拟手段，使用NAMD模拟纤维肽链在水溶液中的平衡过程，验证其在水分子作用下向silkⅠ结构的变化过程，并通过拉伸分子动力学探索其变化的机理。

简介：【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

简介：摘要目的分析S100钙结合蛋白A11(S100A11)在脑胶质瘤患者中的表达特征及其临床意义。方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中310例脑胶质瘤患者的临床资料和转录组测序结果。根据患者的病理学特征，评价S100A11在不同分组中的表达特征。同时选用癌症基因组图谱(TCGA)RNA测序数据库中的611例脑胶质瘤患者对其进行验证。采用Kaplan-Meier生存曲线判断S100A11表达量对脑胶质瘤患者生存期的影响。进一步采用单因素和多因素Cox回归分析法评估S100A11表达量是否为影响患者预后的独立危险因素。通过生物信息学分析法获得与S100A11相关基因的生物学功能，以判断S100A11参与脑胶质瘤恶性进展的可能机制。结果在CGGA数据库中，S100A11的表达量随肿瘤世界卫生组织(WHO)分级的升高而增加(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级依次为：－0.78±0.69、－0.12±0.80、0.62±0.84，F＝96.250，P<0.001)；S100A11在间质型、异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型和O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)启动子非甲基化型脑胶质瘤中的表达水平更高(均P<0.001)；在2016年WHO中枢神经系统肿瘤分类中，S100A11在IDH野生型低级别胶质瘤和IDH野生型胶质母细胞瘤中均具有较高的表达(均P<0.001)。S100A11高表达者的总体生存率明显低于低表达者(P<0.05)。S100A11的上述表达特征在TCGA RNA测序数据库中得到相似的结果。多因素Cox回归分析结果显示，S100A11高表达是影响脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(HR＝1.227，95%CI：0.963～1.538，P＝0.014)，可用于判断预后。S100A11可能与脑胶质瘤细胞的免疫反应、细胞外基质调控等生物学过程有关。结论S100A11在脑胶质瘤中的表达量与其恶性程度相关，可能通过影响肿瘤细胞的免疫反应参与脑胶质瘤的恶性进展；S100A11可能成为脑胶质瘤患者预后判断的指标及治疗靶点。

简介：摘要钙网蛋白(CRT)是内质网中主要的CA2+结合蛋白，作为一种多功能的分子伴侣，CRT参与了细胞多种生理功能的调节，并参与多种疾病的发生和发展进程，如神经系统疾病，肿瘤和自身免疫疾病。最近的研究发现CRT与自然流产密切相关，现将CRT与自然流产的相关性做一综述。