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  • 简介:摘要目的探讨重组蛋白的研究进展以及发展趋势。方法对国内外的重组蛋白的发展状况以及存在的问题进行研究与对比。结果欧美在重组蛋白药物的研究上具有先进的技术,而且药物在世界市场上就有广大的销售市场,而我国的重组蛋白的研究较为落后,但相对发展较快。结论我国在研究重组蛋白方面存在较大的问题,需要进一步的借鉴国际的技术。

  • 标签: 重组蛋白药物 研究进展 临床分析
  • 简介:有许多不同的酵母已经有效地被利用来分析或表达真核蛋白。酵母的优点是生长快速,发酵条件可轻易批量化,设备相对简单.各项遗传和生物特性都被充分了解,更重要的是可以像哺乳动物细胞一样做转译后的修饰.所以非常适合于真核重组蛋白的大量生产。

  • 标签: 酵母 重组蛋白 真核蛋白 发酵 遗传特性 生物特性
  • 简介:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是许多心血管疾病的主要病理基础之一,提高高密度脂蛋白水平具有显著的抗AS作用,该类药物的作用机制包括:胆固醇酯转运蛋白(cholesterolestertransferprotein,CETP)抑制剂、过氧化体增殖物激活型受体(peroxisomalproliferator-activatedreceptors,PPARs)激动剂、肝脏X活化受体(liverX-activatedreceptor,LXR)激动剂、法尼酯衍生物X受体(farnesoidXreceptor,FXR)拮抗剂/激动剂、脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)活化剂、烟酸类、苯妥英、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecin:cholesterolacyltransferase,LCAT)活化剂等,本文回顾性地介绍了升高高密度脂蛋白药物及其进展,包括临床及临床前期药物及其作用机制.

  • 标签: 高密度脂蛋白 动脉粥样硬化 心血管疾病 载脂蛋白 胆固醇酯转运蛋白 过氧化体增殖物激活型受体
  • 简介:人类改造自然的想象力和创造力是无与伦比的。1985年,Lovell-Badge首次提出利用转基因动物乳腺生产重组蛋白质,数年间这一几近天方夜谭的神话已梦想成真。在研究小鼠模型基础上,1990年春,5只生产人α-抗胰蛋白酶的转基因羊在英国诞生,乳中蛋白质的表达水平已达30g/L,迄今已稳定遗传三代,现已进入临床实验。同年荷兰诞生了第一头生产人乳铁蛋白的转基因牛,现已繁殖20多头。对于这些产奶量

  • 标签: 转基因鼠 重组蛋白质 转基因动物 动物乳腺 定位表达 质的研究
  • 简介:摘要:重组蛋白表达系统是生物制药领域中的重要工具,用于大规模生产具有特定功能的蛋白质。通过基因工程技术将目标基因导入到适当的宿主细胞中,利用宿主细胞的生物合成机制来表达和产生目标蛋白质。重组蛋白表达系统的构建和优化对于提高蛋白质产量、纯度和活性至关重要。本文将介绍重组蛋白表达系统的构建和优化在生物制药中的应用。

  • 标签: 重组蛋白 表达系统 构建与优化 生物制药
  • 简介:摘要目的探究猪带绦虫(Ts)14-3-3.3蛋白作为囊虫病疫苗候选分子的潜力。方法选取60只昆明小鼠,体重为18 ~ 22 g,按体重采用随机数字表法分为3组,分别为生理盐水对照组(对照组)、Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗组(疫苗组)、Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗 +佐剂组(疫苗 +佐剂组),每组20只。采用多点皮下注射法,在0周首次免疫后进行2次加强免疫,共免疫3次,每次接种间隔2周。3组在首次免疫后0、2、4、6、8周分别剖杀4只小鼠,摘眼球取血和无菌取脾,分别用于分离血清和制备脾淋巴细胞悬液[处理因素:原液、抗原刺激、刀豆蛋白A(ConA)刺激]。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清特异性抗体免疫球蛋白(Ig)G、IgG2a、IgG1及IgE水平;采用CCK-8法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平;采用双抗夹心ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞培养上清液肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-12、IL-13、IL-10水平。结果疫苗、疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周IgG、IgG2a、IgG1水平均高于对照组,且疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周上述指标均高于疫苗组(P均 < 0.05)。组间相同处理因素下,免疫2 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平比较,差异均有统计学意义(P均 < 0.05);疫苗、疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平均高于对照组,且疫苗 +佐剂组免疫2 ~ 8周上述指标均高于疫苗组(P均 < 0.05)。组内不同处理因素下,抗原刺激、ConA刺激时免疫0 ~ 8周脾淋巴细胞增殖水平以及培养上清液TNF-α、IL-12、IL-13、IL-10水平均高于原液,且ConA刺激时免疫0 ~ 8周上述指标均高于抗原刺激(P均 < 0.05)。结论Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。

  • 标签: 猪带绦虫 猪囊尾蚴 Ts14-3-3.3重组蛋白疫苗 免疫应答
  • 简介:摘要目的对5个结核分枝杆菌重组蛋白及其组合物的细胞免疫进行评价。方法88份新鲜肝素抗凝人群外周静脉血液,其中42份来自北京市昌平区结核病防治所就诊的结核病患者,46份健康志愿者由中国疾病预防控制中心传染病所提供,均为接种过卡介苗(BCG)且没有结核暴露史和任何临床症状体征的健康人。以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv DNA为模板,PCR扩增选取的5个重组蛋白Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c的完整编码基因;通过基因重组蛋白纯化技术,分别克隆、表达和纯化5个重组蛋白作为刺激物,采用效应T细胞酶联免疫斑点试验(ELISPOT)对人群进行细胞免疫检测。结果成功克隆、表达和纯化了Rv3874、Rv3875、Rv2031c、Rv1411c和Rv3418c重组蛋白;灵敏度分别为50.00%、71.43%、69.04%、73.81%和76.19%;特异度分别为86.96%、76.09%、71.74%、39.13%和36.96%。阳性预测值、阴性预测值、曲线下面积及约登指数分别为52.46%~77.78%、62.96%~74.47%、0.511~0.754和0.129~0.475。除Rv1411c和Rv3418c外,Rv3874、Rv3875和Rv2031c在结核病患者中检测到的斑点形成细胞数均高于健康志愿者,差异均具有统计学意义(P值均<0.001)。在5个重组蛋白所构成的26种组合物中,灵敏度为80.95%~95.24%,特异度为68.89%~24.44%。随着组合物中重组蛋白个数的增加其灵敏度逐渐增加,但特异度随之下降。结论结核分枝杆菌重组蛋白Rv3874、Rv3875和Rv2031c刺激T细胞产生免疫应答的能力较强,具有一定的抗原性。而Rv1411c和Rv3418c单独用作诊断抗原的效能并不理想,与多组分抗原联合构成的组合物具有一定应用价值。

  • 标签: 分枝杆菌,结核 重组蛋白质类 免疫,细胞 组合物 实验研究
  • 简介:摘要目的探究用重组微生物来生产药物蛋白的价值。方法选取2009年7月至2009年9月我院制药所中要生产的60份胰岛素,作为研究对象。随机分为A组和B组。A组为传统方法制取胰岛素组。B组为利用大肠杆菌生产胰岛素组。观察两组产生药物的难易程度、成本及生产药物后的药物疗效。结果两组药物经过不同方法的制取,A组药品的有效率为26.7%。B组药品的总有效率为70%,用重组微生物来生产药物的有效率明显高于传统方法制药的总有效率(11.28,P<0.05),具有统计学意义。结论采用重组微生物来生产药物蛋白比传统方法制取药物蛋白制取容易、成本低且生产药物的疗效好。

  • 标签: 重组微生物 药物蛋白 生产 价值分析
  • 简介:摘要:目的:建立大肠杆菌表达的重组蛋白外源性E.coli宿主残留DNA的检测方法用于生产过程以及最终产品的质量控制。方法:参考试剂盒相关说明书,样品加标回收了率无法达到2020版中国药典(Ch.P)第四部3407章节和美国药典(USP)1130章节的要求,通过对药物浓度、处理温度、糖原的蛋白酶K的使用量以及不同的加标量的优化,即将样品稀释10倍后,加30pg的E.coli标准品,20μl的蛋白酶K消化1h,选择15μl PCR反应体系。结果:回收率满足在50%~150%之间。结论:借助商品化的试剂盒,优化的外源性DNA提取条件满足法规要求、操作简便,非常适用于大肠杆菌表达的重组蛋白生产过程以及最终产品的外源性残留DNA的检测。

  • 标签: 大肠杆菌表达的重组蛋白 大肠杆菌 外源性DNA
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  • 简介:摘要:目的:探讨降低尿蛋白治疗糖尿病肾病患者的临床效果。方法:研究期(2020年1月-2021年12月)内,入组观察对象60例,均为糖尿病肾病患者,以随机数字法进行分组,一组30名患者予以常规对症治疗,一组30名患者予以降低尿蛋白治疗,比较不同治疗方案的临床效果差异。结果:临床治疗效果对比,总治疗有效率观察组患者96.67%(29/30)高于对照组患者80.00%(24/30),(p<0.05);治疗后,生化指标尿蛋白、血清反应蛋白、尿液转化生长因子对比,观察组患者指标值低于对照组患者,(p<0.05)。结论:针对糖尿病肾病患者,降低尿蛋白治疗方案具有有效率高,对患者生化指标改善效果好的优势,值得应用。

  • 标签: 降低尿蛋白药物 糖尿病 肾病 临床效果
  • 简介:摘要:目的:探讨降低尿蛋白治疗糖尿病肾病患者的临床效果。方法:研究期(2020年1月-2021年12月)内,入组观察对象60例,均为糖尿病肾病患者,以随机数字法进行分组,一组30名患者予以常规对症治疗,一组30名患者予以降低尿蛋白治疗,比较不同治疗方案的临床效果差异。结果:临床治疗效果对比,总治疗有效率观察组患者96.67%(29/30)高于对照组患者80.00%(24/30),(p<0.05);治疗后,生化指标尿蛋白、血清反应蛋白、尿液转化生长因子对比,观察组患者指标值低于对照组患者,(p<0.05)。结论:针对糖尿病肾病患者,降低尿蛋白治疗方案具有有效率高,对患者生化指标改善效果好的优势,值得应用。

  • 标签: 降低尿蛋白药物 糖尿病 肾病 临床效果
  • 简介:在宫颈癌中,影响治疗和预后的临床分期是最重要的因素.但仅靠临床分期是不够的,于是需要发现一种更好的预后指标,异常的组蛋白酶D升高被发现在癌细胞中,这种过度表达被认为是通过对胞外基质的消化而增加肿瘤的转移潜力,在局部进展期宫颈癌中,高组蛋白酶D水平相关于短期的无复发生成。

  • 标签: 宫颈癌 组蛋白酶D 预后
  • 简介:摘要组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传调控方式,受细胞能量代谢影响并可调控细胞代谢,参与β细胞发育与凋亡、胰岛素抵抗以及炎症反应等多种过程,在糖尿病及其并发症的发生发展起重要作用。目前,已有研究针对该靶点进行对糖尿病治疗进行探索,但仍处于初期阶段。

  • 标签: 组蛋白乙酰化 糖尿病
  • 简介:摘要目的通过研究血浆中细胞外组蛋白与煤矿粉尘所致肺纤维化的关系及其对肺成纤维细胞的促增殖作用,探索细胞外组蛋白在煤工尘肺发生中的作用。方法在2019年5月,选取2012至2015年在北京大学第三医院职业病科门诊就诊的220例煤矿粉尘接触者(包括煤矿接尘工人和煤工尘肺患者)为研究对象,包括小阴影密集度0、1、2、3级者分别61、65、56、38例。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测量血浆中细胞外组蛋白H4和血小板源性生长因子(PDGF)的浓度。通过体外细胞试验研究煤工尘肺患者血浆和小牛胸腺组蛋白(CTHs)对肺成纤维细胞的促增殖效果以及抗组蛋白抗体的拮抗作用。结果研究对象中,男性195例(88.6%,195/220),女性25例(11.4%,25/220),年龄(55.1±7.2)岁,接尘工龄(16.3±4.4)年。小阴影密集度分别为0、1、2、3级的煤矿粉尘接触者的血浆细胞外组蛋白H4浓度分别为(3.92±1.75)、(9.84±4.17)、(14.35±5.52)和(17.83±7.69)μg/ml,各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。煤矿粉尘接触者血浆中细胞外组蛋白H4浓度与PDGF浓度呈正相关性(r=0.769,P<0.01)。与正常血浆对照组相比,患者血浆组(272%±87%)、外源CTH组(283%±84%)的细胞增殖百分比明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与患者血浆组相比,患者血浆+抗H4抗体组细胞增殖百分比明显下降(185%±66%),差异有统计学意义(P<0.05);与外源CTH组相比,外源CTH+抗H4抗体组细胞增殖百分比明显下降(167%±59%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血浆中的细胞外组蛋白浓度与煤矿粉尘接触者的肺纤维化程度相关,细胞外组蛋白对肺成纤维细胞具有促增殖作用,提示细胞外组蛋白可作为煤矿粉尘所致肺纤维化的重要生物标志物。

  • 标签: 尘肺 煤工尘肺 细胞外组蛋白 炎症 肺纤维化 血小板源性生长因子
  • 简介:摘要虽然目前的表观遗传学药物开发仍然局限于靶向DNA甲基化,但新的证据表明组蛋白甲基化是另一种主要的基因表达的表观遗传学决定因素,并且在急性髓系白血病(AML)中经常失调。最近,组蛋白甲基化靶向治疗AML方面的研究进展为有效治疗白血病提供了新的机会。本文将综述组蛋白甲基化修饰靶向治疗AML的研究进展。

  • 标签: 组蛋白甲基化,急性髓系白血病,靶向治疗
  • 简介:摘要慢性疼痛是一种复杂的病症,其发生、发展机制目前尚不十分清楚,临床治疗效果欠佳。越来越多的研究表明,表观遗传调控参与了慢性疼痛的发生、发展过程,组蛋白甲基化是一种重要的表观遗传修饰方式,其在慢性疼痛中起着重要的作用。文章旨在总结组蛋白甲基化与慢性疼痛的关系,阐述组蛋白甲基化的生物学效应。进一步探讨组蛋白甲基化在慢性疼痛中的作用,为研发更有效的慢性疼痛靶向药物奠定基础。

  • 标签: 组蛋白甲基化 表观遗传 慢性疼痛
  • 简介:摘要生物技术被认为是21世纪最具主导地位的高新技术,生物技术药物基本都是多肽蛋白药物,对肿瘤遗传性和非遗传性疾病有着特殊的疗效。随着科学与技术的不断发展以及人民对生活质量的要求在不断提高蛋白的制备必将发展成为21世纪我国最具吸引力的新技术产业之一。本文从蛋白药物的认识,蛋白药物开发的技术研究,蛋白和多肽类药物给药方法,以及对蛋白药物的研究前景等方面,对蛋白药物的开发有了综合性的认识。

  • 标签: 蛋白类药物 蛋白质 多肽 开发 生物技术