简介：目的：建立一种适合以红花cDNA为模板进行相关序列扩增多态性（SRAP）扩增的体系,筛选最佳的SRAP-PCR反应条件。方法：提取红花RNA并反转录成cDNA,以此为模板,使用正交设计表设计PCR反应中的3个重要因素Taq酶、三磷酸脱氧核苷（dNTPs）、引物的反应浓度。随后设计Mg^2＋的反应浓度以及模板含量,分别进行单因素试验。结果：本研究建立的红花cDNA-SRAP扩增条件为：25μL反应体系中含模板cDNA20ng,1×PCR缓冲液2.5mmol/L,Mg^2＋2.0mmol/L,TaqDNA聚合酶0.04U/μL,dNTPs0.2mmol/L,引物0.2μmol/L。优化后扩增结果稳定性好,条带清晰,多态性好。结论：该体系为红花功能基因的研究奠定了基础。

简介：肌动蛋白基因3（Actin3）是家蚕分子生物学研究中检测组织cDNA模板质量常用的标志基因之一。我们在用实验室通用的Actin3引物扩增检测家蚕不同茧色品种（白血白茧品种夏芳、金色茧品种金一、黄血白茧品种03—000、锈色茧品种03—520）中肠、血液、丝腺组织cDNA时，发现以不同茧色品种丝腺组织cDNA为模板都能扩增出一条非特异性的小片段，而在中肠和血液组织cDNA的扩增产物中不存在。本研究对该丝腺特异的扩增小片段扩增产物进行了克隆鉴定，分析了其出现的原因，并探索了A3引物扩增的最佳扩增条件。

简介：摘要目的探讨交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中的应用效果，为交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中的应用提供理论依据。方法选取2014年5月-2016年7月在医院接受治疗的60例恶性疟疾患者作为此次研究对象，提取血液样品120份，每例2份，分为观察组和对照组，观察组采用交叉引物等温扩增技术进行检测，对照组采用胶体金技术检测，分析比较两组恶性疟疾原虫灵敏度和特异性检测情况，分析比较两组恶性疟疾原虫密度检测情况。结果观察组的灵敏度为71.7%，对照组为63.3%，观察组明显高于对照组，两组之间差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）；两组的特异性检测都为100.00%，无差异，不具有统计学意义（P＞0.05）；恶性疟疾原虫密度区间为10-100、101-1000、1001-10000和10001-100000等，观察组检测情况明显高于对照组，两组之间差异显著，具有统计学意义（P＜0.05）。结论交叉引物等温扩增技术在恶性疟疾快速检测中的应用效果显著，能很好的检测出恶性疟疾的灵敏度和特异性，筛选出感染恶性疟疾的患者，适应于恶性疟疾的快速检测。

简介：结果以Mg2+2.0mmol/L、dNTP0.25mmol/L、引物0.3μmol/L、rTaq酶1U、模板1.5ng/μl、甲酰胺2%及退火温度（Tm-3）℃的ISSR反应体系最优,优化的ISSR-PCR反应体系对23份乌头种质DNA扩增结果（略）,因此反应体系中模板浓度确定为1.5ng/μl

简介：目的核酸序列依赖性扩增（nucleicacidsequence-basedamplification,NASBA）、Real-timePCR及GM试验在侵袭性曲霉菌感染中的诊断价值。方法收集2013年11月~2014年6月临床上曲霉菌感染高危病患的血液标本80例,并根据EORTC/MSG诊断标准分为确诊组8例,拟诊组26例,非感染组46例,分别利用NASBA、real-timePCR及GM试验进行检测,计算3种方法的诊断指标并分析评价。结果NASBA、real-timePCR及GM试验3种方法的灵敏度分别为76.47%、67.65%、52.94%,特异度分别为80.43%、89.13%、80.43%。联合诊断结果显示,NASBA与real-timePCR串联方案有最好的特异度（100%）及阳性预测值（100%）;NASBA与real-timePCR并联方案则最为灵敏（94.12%）。结论NASBA用于诊断IA最为敏感,而real-timePCR则最为特异,GM试验的表现差于前两者。联合应用的诊断策略,在特定情况下提高临床早期诊断IA的准确性。

简介：本文根据牙釉蛋白(Amelogenin)基因在x染色体第一内含子有6bp缺失的特性,用一对x-y同源引物.扩增x-y染色体特性DNA片段分别为106及112bp,并用PAGE电泳银染显带的方法检测扩增产物.本方法灵敏度高,实用性强.可对2mm~2血痕检材提取的DNA液1/10作出性别判定.对现场提取的生物检材.特别是微量、腐败、陈旧检材,均能较好的作出性别鉴定.室温放置16年的血痕也可检验.实际检案显示本方法简便、有效、无毒,易于推广.

简介：从人基因组DNA获取神经营养素－4（neurotrophin-4,NT-4)基因，并对该目的基因进行序列测定，本实验直接从人脑组织中提取基因组DNA，根据人神经营养素－4的cDNA序列，设计一对寡核苷酸引物，采用PCR，获得人NT－4基因，用DNA序列分析NT－4基因，结果，我们获取的人NT－4基因与文献报道有五个碱基不同，我们认为：直接采用PCR来获取目的基因，出现碱基错配的可能性较大；测序仪器和实验条件对结果有一定影响关系。

简介：

简介：方法利用正交实验设计L9(34)对羌活和宽叶羌活ISSR-PCR反应体系的4因素（Mg2+,PCR反应体系的正交实验,引物浓度对PCR实验结果影响最大

简介：根据[2]中的结论，得到一个利用顶点的次数向量求解非平衡分派问题的算法，该算法不受退化解的影响，且其复杂性为O（n·m^2）。

简介：

简介：目的：克隆并分析抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因。方法：从分泌抗β淀粉样肽单克隆抗体的杂交瘤细胞株A8中提取总RNA，根据恒定区序列设计基因特异性引物，通过5’RACE法扩增抗体的轻链和重链可变区基因，测定并分析可变区基因序列，并克隆入pMD18-T载体。结果：重链可变区基因序列全长450bp，编码150个氨基酸残基；轻链可变区基因序列全长429bp，编码143个氨基酸残基。在GeneBank中对氨基酸序列进行比对分析，二者均符合小鼠IgG可变区基因的特征。根据Kabat法则对A8抗体轻链和重链可变区氨基酸序列基因进行分析并确定了3个抗原互补决定区（CDR）、4个框架区（FR）和信号肽。结论：通过5’RACE法得到了抗β淀粉样肽单克隆抗体轻链与重链可变区基因，为进一步研究抗体三维结构，以及对该抗体进行人源化改造奠定了基础。

简介：本研究以双单倍体马铃薯DM的突变体为材料,利用PCR-walking的方法扩增其突变体的侧翼序列。在试验中,以60个鉴定过的阳性突变体样品为材料扩增后,有28个样品扩增出有效条带。PCR胶回收后测序,有2个样品测序无信号,其他26个样品,将测序与载体序列和马铃薯基因组序列用BLASTN比对,发现有6个样品分别插入到了马铃薯1、3或7号染色体上。通过进一步比对,发现编号为TDM90的突变体中,载体插入了PREDICTED:Solanumtuberosumtrans-resveratroldi-O-methyltransferase-like(LOC102590422),mRNA马铃薯反式白藜芦醇基因中。试验说明了PCR-walking法扩增马铃薯侧翼序列是可行的。且载体插入马铃薯反式白藜芦醇基因中对马铃薯白藜芦醇基因的表达有何影响,有进一步研究下去的重要意义。

简介：摘要目的探讨非结核分枝杆菌病诊治方向。方法本研究筛选30例非结核分枝杆菌种病患者作为本次的研究对象，2017年1月至2017年12月为收治时间，均行传统罗氏结核培养法、DNA扩增基因鉴定组，并对比差异检测方案间的检测速率、准确度情况。结果本文研究数据显示，通过对非结核分枝杆菌病的测定，其DNA扩增基因鉴定技术检测非结核分枝杆菌病的特异度为100％，且确诊时间为（21.25±3.79）h，但传统罗氏结核培养法检测的非结核分枝杆菌的特异度为，确诊时间为（5.51±2.19）周，2组对比具有显著差异，p＜0.05，DNA扩增基因鉴定更具优势性。结论DNA基因鉴定较传统罗氏培养菌型鉴定具有特异、快速等优势，基因检测可明确非结核分枝杆菌亚菌种，传统罗氏方法仅可区分非结核杆菌、结核杆菌菌属，其DNA基因鉴定更具高效，且可行性高，该技术可在基层医院广泛推广，提高其诊治非结核分枝杆菌病的能力。

简介：在非参数回归模型中，本文提出了一种回归函数的分块Delta序列估计方法，定义了回归函数的分块Delta序列估计，得到这种估计的渐近无偏性，均方收敛性和强性敛性。

简介：引物人文是一种很好的曲笔表达作者心意的方法，古今中外的许多作家都使用过这种方法。初中语文课本中有大量的引物人文现象。古代作品有《水调歌头（明月几时有）》《卜算子·咏梅》《朝天子·咏喇叭》《无题（相见时难别亦难）》《马说》《观书有感》《关雎》《庄子与惠子游于濠梁》《惠子相梁》等等。其中的明月、梅花、喇叭、春蚕、蜡烛、青鸟、

简介：摘要单肺通气（one-lung ventilation, OLV）是把双刃剑，在便于手术操作的同时又会造成通气/血流比例（ventilation-perfusion ratio, V/Q）失调和不同程度肺损伤。文章从OLV所导致V/Q失调和肺损伤的病理生理基础角度出发，重点探讨了肺隔离过程中实施非依赖肺适度通气的益处。通过综述相关文献，分别阐述了非依赖肺通气（independent lung ventilation, ILV）的理论基础、实施意义和相关临床应用，同时介绍了基于潮气量分流并共用呼吸回路的ILV方法。这种方法相对较为简便易行，在实施保护性肺隔离通气方面具有一定的优势和应用前景。

简介：摘要目的分析2017至2020年我国诺如病毒流行株GⅡ.4 Sydney[P31]基因型的基因组以及变异情况。方法利用通用引物初步建立GⅡ组诺如病毒基因组扩增方法，扩增GⅡ.4 Sydney[P31]株基因组，并应用高通量测序技术对其基因组测序，对GⅡ.4 Sydney[P31]株进行系统进化分析和关键位点分析。结果利用初步建立的GⅡ组基因组扩增方法，8株GⅡ.4 Sydney[P31]株中，6株扩增成功并获得基因组序列。通过系统进化分析表明，本研究获得的自2017—2020年6株毒株和2015—2019年的GⅡ.4 Sydney[P31]参考株划为一簇，2013年我国毒株GZ20 133 135株与2012—2014年GⅡ.4 Sydney[P31]参考株划为一簇。血型抗原受体结合位点(HBGAs)分析表明2014年以后的毒株在Site Ⅱ发生了氨基酸突变Asp372Asn。通过抗原表位分析，2017年以后的毒株，在A表位(297、372和373)、B表位(333)、E表位(414)和H表位(309、310)都发生了变化；2020年的毒株20HN261和20HN253株在A表位(368)和G表位(355)较之前的毒株出现了新变化。结论本研究确定了我国流行株GⅡ.4 Sydney[P31]基因组关键位点变异情况，跟踪新毒株的出现提供了科学依据，为针对我国流行株疫苗研发设计提供了基础数据。

简介：在界定了非具体知识资本的概念和讨论了非具体知识资本的偏向之后，以Cobb—Douglas函数为依据，讨论了非具体知识资本蚀耗的计算方法，即入确定方法。

简介：预测预报是时间序列分析的应用之一，人们根据大量的观测数据对系统进行分析，主要原因是为了能够预测小系统在未来的特性，以便对系统的特性进行处理。提出一种非平稳时间序列预测建模方法，通过实验结果表明，该模型在工程应用方面具有较高的预测精度。