简介:摘要目的建立了一种特异性的用于免疫胶体金层析技术(GICA)检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的免疫球蛋白IgG。方法共有239份血清和100份全血标本用免疫胶体金层析法进行检测,同时,血清的标本用ELISA方法作对照检测,全血标本分别用ELISA和免疫印迹法(IB)确定。结果与ELISA方法对比,GICA测定特异性的HSV-2抗体的敏感性为100%(69/69,特异性为97.1%(171/176);与HSV-1.轮状病毒和EB病毒抗体的交叉反应分别为2.7%(3/112),2.9%(1/34)和6.2%(1/16);与带状疱疹病毒和人类巨细胞病毒无交叉反应;一定量胆红素、甘油三酯或血红蛋白对该试验无影响;不同的采血方法如毛细管法,EDTA或肝素抗凝的静脉采血法,及血清对实验结果无影响。结论用免疫胶体金层析技术(GICA)检测单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的免疫球蛋白IgG是一种方便、简捷、快速和准确的试验方法。
简介:目的为进一步了解胶体金免疫层析测定(GICA)法在检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的灵敏度及有无“带现象”。方法采用上海实业科华生物技术有限公司的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒与杭州艾康生物技术有限公司的GICA试条对定值质控品和临床上800份标本进行检测,ELISA法以A值〈0.1为阴性,A值0.1~0.5为弱阳性,A值〉0.5为阳性。再用GICA法对其阳性、弱阳性及随机抽取阴性标本中的80份进行复检。结果在800份标本中经ELISA法检出阳性42份,弱阳性8份,余为阴性。用GICA法复检出阳性45份,弱阳性3份,余为阴性。结论GICA法与ELISA法相比较最大的优点是不受抗原过量的影响,即避免产生“带现象”,因此具有较高的特异性。GICA的灵敏度要比成熟的ELISA法偏低。GICA法检测HBsAg方便、快速。
简介:应用ELISA法对重庆口岸10566份出入境人员进行血清标本两对半检测,对1189份HBsAg阳性血清用DIGCA进行复核检验;对其中328份DIGCA阴性标本再次用ELISA检验,检出39份阳性,289份阴性.DIGCA的敏感性=95.67%,准确性=96.72%,特异性=100%,两种方法的一致性(Kappa值)=91.48%.DIGCA阴性但ELISA是阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比分别是(1.5,1.0]17%,(1.0,0.5]50%,(0.5,0.105]100%.DIGCA在(1.5,0.105]区间有一半以上HBsAg不能检出(56.52%),在(1.0,0.105]有77.78%的假阴性,对(0.5,0.105]则基本不能检出.对ELISA两种试剂的假阳性率分别为:34.66%(269/776)和4.84%(20/413).在口岸卫生检疫中,不宜单独用DIGCA检测HBsAg.对ELISA需要选择质量高的试剂,每个实验室最好在使用前亲自做试剂实验室评估.
简介:用18~20nm胶体金标记抗哈维氏弧菌Vibrioharveyi抗体并制备金标垫,分别将羊抗兔IgG和纯化后的抗哈维氏弧菌抗体包被于NC膜上作为质控线和检测线,组装制作了哈维氏弧菌胶体金免疫层析试纸条,优化了该试纸条的制作条件,测试了其性能。结果表明:所制备的哈维氏弧菌免疫层析试纸条具有较好的特异性,与费尼斯弧菌Vibriofurnissii、维氏气单胞菌Aeromonasveronii、美人鱼发光杆菌Photobacteriumdamselae、类志贺邻单胞菌PlesiomonasShigelloides、鱼肠道弧菌Vibrioichthyoenteri、鳗利斯顿氏菌Listonellaanguillarum、迟缓爱德华氏菌Edwardsiellatarda、海豚链球菌Streptococcusiniae、嗜水气单胞菌AeromonasHydrophila等9种常见水产病原菌无明显交叉反应,检测灵敏度为3×10^5CFU/mL,5~10min即可得出检测结果,具有快速、简便、特异性强和适应基层推广应用等优点,可用于养殖鱼类病原哈维氏弧菌的现场检测。
简介:摘要目的分析探讨胶体金标记免疫层析法检测大肠杆菌0157的效果,为临床提供参考依据。方法选择100例细菌感染体作为研究对象,胶体金颗粒制备使用柠檬酸三钠还原法,标记抗体使用Ecoli0157单克隆抗体,Ecoli0157单克隆抗体的包被载体使用硝酸纤维膜,并制成GICA的检测条,检测条上金标记抗体和标本中的Ecoli0157结合后,应利用硝酸纤维膜的层析作用移动,直至膜上的固相抗体结合可见红色条带,检测结束后,对胶体金标记免疫层析法检测的灵敏度、检测条阳性率进行观察。结果胶体金标记免疫层析法检测的灵敏度为103cfu/ml,检测条阳性份数共50份,其中包括30例大肠杆菌0157阳性标本,另20例经标本鉴定疑似为弗劳地枸橼酸杆菌。结论胶体金标记免疫层析法检测大肠杆菌0157具有较高的检测价值,具有较高的敏感度,具有操作简便、易于判断的优点,可对标本进行快速的筛查,适合在临床中应用和推广。
简介:[目的]建立检测鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)的胶体金标记免疫层析方法.[方法]采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并标记鼠疫杆菌的抗体,制成免疫层析检测试纸条,进行特异性和敏感性评价,并对面粉、土壤、奶粉、淀粉等不同材料进行模拟添加鼠疫菌检测.[结果]用多种不同的常见细菌或近缘细菌进行测试,未出现非特异性反应,检测鼠疫杆菌的灵敏度为1×105cfu/ml,对水、土壤、奶粉、面粉、淀粉、酵母粉等不同材料中鼠疫杆菌进行检测也取得同样结果,10~15min即可得到结果.[结论]建立了1种可以用于现场快速检测鼠疫杆菌的胶体金免疫层析方法,为进一步大规模应用奠定了基础.
简介:摘要目的探讨胶体金免疫层析法(GICA)对乙肝表面抗原测定的临床价值。方法将88份选定的住院患者标本同时以GICA和ELISA两种方法检测,操作方法均按试剂盒说明书,并且对GICA法进行灵敏性、重复型、特异性分析。结果GICA和ELISA两种方法比较,阳性及阴性符合率均为99%以上,并且GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应。结论胶体金免疫层析法操作简便快速,费用少,结果鲜明直观,灵敏度、重复性、特异性与ELISA相近,又不需特殊仪器设备,能满足临床急诊和基层医院的需求,其对乙肝表面抗原测定有很高的临床适用价值。
简介:本文通过翻阅文献资料并结合日常的检测实际,分析胶体金免疫层析法快检产品应用于水产品中药物残留的检测时假阳性和假阴性的风险来源及产生的原因,提出相应的建议和应采取的措施,以期提高对水产品中药物残留的快速检测的效果。
简介:[目的]应用胶体金免疫层析法,研究水产品中霍乱弧菌的快速检测方法.[方法]通过模拟水产品棉拭子标本比对试验及现场应用比对试验,比较不同检验方法的差异.[结果]70份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×10CFU/ml的模拟水产品棉拭子标本分别按检验方法1、检验方法2检验,同时检出阳性51份,检验方法2的检出率(87%)显著高于检验方法1的检出率(74%);30份增菌液中霍乱弧菌理论浓度为1.5×101CFU/ml的"模拟水产品棉拭子标本"按检验方法2进行检验的检测结果均为阳性.对2000份水产品进行检测的现场应用对照实验结果显示:检验方法3的检出率(0.4%)与检验方法1的检出率(0.3%)差异无显著性;胶体金试纸条实验的假阳性率为8%.[结论]在胶体金免疫层析法实验中,增菌液增菌前霍乱弧菌含量为1CFU/ml,通过增菌后可被检出;增菌液霍乱弧菌含量为10CFU/ml,增菌12h后均可被检出;水产品棉拭子标本增菌12h检测阴性者可报告阴性,阳性者则参照[1]进一步分离鉴定.鱼贝类霍乱弧菌污染菌数较少(103CFU/100g以下)[2],无法满足使用胶体金免疫层析法所要求的含菌量(106CFU/ml)[3],可以通过改良增菌培养液成分,以提高待检菌繁殖能力,在短时间内提高增菌液待检菌浓度,使胶体金免疫层析法的灵敏性高于或接近常规的分离鉴定法.
简介:摘要目的分析3种胶体金免疫层析试剂盒检测新型冠状病毒(2019-nCoV)免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)抗体的特异性,探讨假阳性的干扰因素和避免方法。方法回顾性收集2020年3月6日至4月20日北京大学第三医院门诊或住院患者的血清:(1)健康对照组120例;(2)病原感染组139例:乙型肝炎大三阳和小三阳42例、丙型肝炎抗体阳性27例、梅毒抗体阳性11例、巨细胞病毒抗体阳性12例、风疹病毒抗体阳性12例、EB病毒抗体阳性8例、甲型和乙型流感病毒患者血清各15例、大肠埃希菌血流感染患者血清12例;(3)内源性干扰组242例:血清总IgM升高20例、IgG升高20例、总补体升高15例、甲胎蛋白升高9例、类风湿因子正常组(≤20 IU/ml)84例和升高组(>20 IU/ml)94例;(4)孕妇和肿瘤患者组126例:包括孕妇、实体器官恶性肿瘤和血液系统恶性肿瘤各42例。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测患者咽拭子2019-nCoV核酸,阴性样本且患者排除2019-nCoV感染的纳入抗体假阳性研究。用A、B、C 3种胶体金免疫层析试剂盒检测上述血清2019-nCoV抗体,采用Pearson卡方检验对结果进行统计学分析。结果A试剂检测健康对照血清2019-nCoV IgM和IgG的假阳性率为0和0.83%(1/120),B试剂假阳性率为4.17%(5/120),C试剂无假阳性。3种试剂检测大肠埃希菌血流感染患者血清假阳性率均为1/12,B试剂在丙肝抗体阳性血清的假阳性率为7.41%(2/27)。B试剂在血清类风湿因子正常组和升高组假阳性率分别为9.52%(8/84)和54.26%(51/94)(χ²=40.05,P<0.001);A试剂和C试剂在类风湿因子正常组均无阳性,升高组各有3例IgM/IgG抗体阳性。A、B、C试剂在总体人群中的假阳性率分别为0.55%(3/548)、4.20%(23/548)、0.73%(4/548)。结论不同试剂盒的特异性差别较大,高类风湿因子是导致B试剂盒假阳性的主要因素,使用高纯度的抗体和适当的阻断剂有助于提高其检测的特异度。