简介:试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板,通过设计的特异性引物PCR扩增出(NDV)HN基因片段,连接至pMD-18T载体,通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中,转化到感受态细胞Rosetta中,获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒,用lmmol/LIPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示,HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,表达产物大小约为90KD左右,western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。
简介:为了研制新型细胞因子制剂,将鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因和鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因通过多肽氨基酸接头(Linker)连接在一起构成mChIL-18/mChIFN-α融合蛋白基因,并构建原核重组表达载体,以期表达具有生物学活性的融合蛋白。以mChIL-18cDNA与mChIFN—αDNA为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到mChIL-18/mChIFN-α融合DNA。将回收的DNA克隆于pGEM—TEasy载体,并对其进行了测序。测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18/mChIFN—α融合分子DNA。将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-mChIL-18/mChIFN-α。pQE30-mChIL-18/mChIFN—α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础。
简介:我国的警犬数量增长迅速,目前警用工作犬总数量达两万余头,警犬技术一直在公安工作中发挥着其他技术手段不可替代的独特作用。近年来,对于警犬技术的研究,使之在使用方向的拓展、使用难度的提高等方面都取得了新的成果,特别是在警犬嗅觉作业领域提升了一个档次。警犬技术全面升级以适应新的实战需要已经成为共识。然而,以扑咬为核心的攻击类作业科目,其技术和使用大多停留在上世纪九十年代的水平,并没有太大的突破,使用质量和使用效果均不尽如人意。究其原因,一方面与警犬攻击类作业面临的法律要求、社会环境、治安状况的变化有很大的关系,另一方面与警犬作业方式和自身作业精确程度达不到较高要求有关。当前的执法环境和治安现状,要求警犬能进行更为精准的作业。