简介：目的了解临床分离碳青霉烯类不敏感革兰阴性杆菌中bla（NDM-1）基因的分布,探讨NDM-1阳性菌株的分子流行病学特征。方法收集长沙地区2011年1月—2012年8月临床分离非重复碳青霉烯类不敏感革兰阴性杆菌,聚合酶链反应（PCR）技术筛查bla（NDM-1）基因,扩增产物测序和BLAST软件分析。对bla（NDM-1）基因阳性菌株,采用E试验法检测其药物敏感性、PCR法检测β内酰胺酶基因（包括bla（DHA）、bla（VIM）、bla（IMP）、bla（GIM）、bla（CTX-M）、bla（KPC）、bla（TEM）和bla（SHV）等）和16SrRNA甲基化酶基因、脉冲场凝胶电泳（PFGE）及多位点序列分型（MLST）技术进行分子生物学分型。结果共收集到687株碳青霉烯类不敏感的革兰阴性杆菌,其中3株被证实为bla（NDM-1）基因阳性菌株,包括2株肺炎克雷伯菌（菌株编号CS11495和CS610）和1株阴沟肠杆菌（菌株编号CS30754）。该3株菌均来源于湘雅医院。在测试的12种抗菌药物中,除对阿米卡星和多黏菌素B敏感外,对其余抗菌药物几乎全耐药。菌株CS11495同时检出bla（SHV-12）、bla（TEM-1）、bla（CTX-M-15）和bla（IMP-4）,菌株CS610携带bla（DHA）、bla（SHV-12）和bla（TEM-1）,菌株CS30754中bla（SHV-12）和bla（TEM-1）基因阳性。其余基因均为阴性。2株肺炎克雷伯菌PFGE分型可分为A、B两型。MLST显示,菌株CS11495、CS610和CS30754分别属于ST629、ST490及ST214,其中ST490为国内首次报道。结论bla（NDM-1）阳性菌株具有广泛的耐药谱,与其同时携带多种耐药基因有关。尽管本地区不存在克隆传播,但分布于同一医院的不同科室,应预防其播散。

简介：目的分析1株临床分离携有多重耐药基因盒整合子的铜绿假单胞菌的耐药特性。方法应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）对整合子进行检测及分型，用长片段PCR（Long—PCR）扩增整合子的可变区并进行DNA测序，分析整合子可变区含有的耐药基因。同时应用PCR扩增金属酶基因和oprD2基因。结果该株铜绿假单胞菌PA27携带Ⅰ类整合子，其可变区大小为3.0kb，含有编码对氨基糖苷类、氯霉素和β内酰胺类抗生素耐药的基因，经与GenBank数据库进行同源性分析（BLAST），确定为一种新型基因盒组合形式：aac（6’）-Ⅱ-cm1A8-OXA-10，GenBank登录号为EU708817。oprD2基因检测阳性，未检出IMP-1、VIM-2和IMP-2型金属酶基因。结论该地区首次报道携带新型基因盒组合形式的Ⅰ类整合子的铜绿假单胞菌，并携有多重耐药基因，应引起临床高度重视。