乳腺癌的FISH检测是哪种“鱼”？

董岩,陈芸

对于一部分乳腺癌患者，病理报告上会明确指出“建议进行FISH检测”，这时病人就纳闷为什么要做FISH检测，它是做什么用的？；而已经进行FISH检测的乳腺癌患者，当其拿到检测报告时，她心里会想：我的结果是不是好的，有利于我的进一步治疗吗？那么，就让我们先了解一下有关乳腺癌FISH基因检测的基本知识，这样很多疑问就有了答案。

1、FISH

FISH是荧光原位杂交技术的简称，在分子病理检测领域其实它跟鱼没有关系。FISH技术的原理利用标记荧光素的DNA序列作为探针，变性成单链后，按照碱基互补配对原则，与待检样本中互补的核酸序列经过退火-杂交形成双链核酸，通过荧光显微镜检测荧光信号对结果进行分析，从而检测细胞、组织样本中的染色体或基因的异常。FISH检测具有直观、快速、敏感性和特异性高、定位准确等特点。目前在实体瘤中，FISH技术主要应用于个体化治疗方案的确定、肿瘤诊断、预后评估等，同时还应用于产前诊断及血液病的诊疗中。

2、乳腺癌HER-2基因

HER2基因又称人表皮生长因子受体（HER）2即c-erbB-2基因，属于原癌基因，位于染色体17q21，是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，激活后可传导分裂信号通路，抑制细胞凋亡，增加肿瘤细胞侵袭力等。25-30%乳腺癌患者存在HER-2基因的扩增及蛋白的高表达。HER2阳性（过表达或扩增）的乳腺癌患者病情进展速度快，化疗缓解期短，内分泌治疗（如他莫昔芬）效果差，HER-2基因扩增的病人用高剂S的蒽环类和紫杉醇类药物更有效，无病生存率和总生存率低。HER-2基因扩增的乳腺癌患者明显受益于Herceptin（赫赛汀，2001年FDA批准上市）靶向药物治疗。HER-2检测方法有免疫组化（IHC）和荧光原位杂交（FISH）等，在《乳腺癌HER2检测指南（2019版）》指出：FISH是检测HER2基因状态的金标准，目前已成为乳腺癌临床治疗中的常规检测项目。

3、与常规的免疫组化检测项目相比FISH检测的优势

免疫组化和FISH检测的样本为10％中性福尔马林固定后石蜡包埋标本（FFPE样本），防脱玻片切片厚度3~5μm，不是抽血。免疫组化和FISH检测HER-2的状态一致性很高，但也存在差异。主要原因是：1）由于蛋白质在标本固定、处理过程中易变性破坏等，并且抗体的不同批号存在差异，结果判断具有主观性等, 使得免疫组化技术在检测中易出现假阴性、假阳性问题，免疫组化阴性但HER-2基因扩增的患者与蛋白质降解有关。2）免疫组化结果阳性而HER2基因无扩增的患者多是由于17号染色体的非整倍体造成的蛋白表达，而17号染色体的非整倍体扩增的患者对于赫赛汀治疗效果不明显。

4、哪些患者适宜进行HER-2检测

目前需要做FISH基因检测的人群包括：①所有乳腺原发性浸润癌；②复发或转移的乳腺癌患者尽可能再次检测；③新辅助化疗后仍有肿瘤残留的病例建议再次检测；④对于细胞量过少微浸润的病例，则需要具体情况具体分析，医生需要对照HE切片和免疫组化结果，如果切片中微浸润灶和原位癌腺体很好区分，对于“≤5mm”的微浸润灶也可进行FISH检测，而如果两者互相混杂在一起，难以区分，则不宜行FISH检测，容易造成误诊。

为了尽可能减少患者的经济负担而又尽可能的提高HER-2靶向治疗的获益人群，HER-2基因的基本检测流程为先行免疫组化检测。在病理报告中通常会描述HER-2免疫组化的结果判读，包括（0）、（1+）、（2+）、（3+）。HER-2免疫组化（0或1+）的患者视为HER-2阴性，不适用进行FISH检测。HER-2（2+）的患者需再行FISH检测来确定HER-2的扩增状态。IHC3+判读为HER2阳性。

5、HER-2结果的解读

HER-2基因的观察流程为：

①HE观察：确定标本类型、肿瘤分布特征

②低倍→高倍

A．低倍：肿瘤区域、切片质量、HER-2扩增异质性

B．高倍：计数

计数细胞选择为细胞核边界完整、无重叠、标记HER2基因的红色信号和标记该基因所在的17号染色体着丝粒（CEP17）的绿色信号清晰的肿瘤细胞，随机计数至少20个细胞核中的双色信号。FISH结果解读如下。HER-2免疫组化结果为（3+）或FISH检测报告显示为HER-2基因扩增，则表明患者可以进行抗HER-2的靶向治疗，反之不需要。

      

2017年，人力资源和社会保障部将HER2靶向药物曲妥珠单抗纳入国家医保药品目录，抗HER-2治疗价格大幅降低， HER2阳性乳腺癌患者采用针对性靶向治疗可明显提高治愈机会，显著降低复发率和死亡率，提高生活质量。