大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对小鼠免疫功能研究

王凯,李薇薇,刘海华,刘莉

摘要: 目的 研究大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对正常小鼠免疫功能的调节作用。方法 昆明种小鼠240只，随机分为4组，每组60只，即空白对照组、大豆分离蛋白低、高剂量组(0.24、0.48g/kg)、混合蛋白质粉低、高剂量组(0.05、0.15g/kg)连续灌胃30d，测定小鼠脾淋巴细胞增殖反应能力和自然杀伤(NK)细胞活性；观察二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH)；通过血清溶血素和抗体生成细胞(PFC)检测体液免疫功能；利用单核巨噬细胞的吞噬功能检测小鼠非特异性免疫功能。结论 大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对正常小鼠免疫功能均有一定调节作用，可增强小鼠免疫能力。

关键词: 保健食品；免疫；脾淋巴细胞增殖；NK细胞；吞噬指数

蛋白质是人体必需的营养素之一，是构成机体免疫防御功能的物质基础，与免疫系统的组织发生、器官发育有着密切关系。正常情况下当抗原进入机体后, 可刺激机体产生不同水平的免疫反应，各种免疫细胞的生成以及抗体的合成都需要蛋白质和氨基酸为原料或参与其过程。因此，蛋白质在免疫功能的调节中起重要作用[1]。本实验旨在研究大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对免疫的影响。

1 方法

1.1样品 大豆分离蛋白由河北某公司提供，人体推荐用量3g/人/天；混合蛋白质粉由实验室按照大豆分离蛋白：浓缩乳清蛋白粉：胶原蛋白粉=1:1:1的比例混合，人体推荐用量3g/人/天。

1.2分组与处理 240只小鼠适应性饲养1周，随机分为4组，每组60只，空白对照组、大豆分离蛋白粉低、高剂量组(0.5、1.0g/kg) 、混合蛋白质粉低、高剂量组(0.5、1.0g/kg)灌胃给予受试物，灌胃容量为0.2mL/10g，每天1次，空白对照组灌胃等体积去离子水，连续30 d。末次给予受试物30min后，分别取材，检测各免疫指标。

1.3 实验方法 参照原卫生部颁发的《保健食品检验与评价技术规范（2003年版）》规定的方法。

2实验结果

2.1 大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对小鼠体重增重、脏器系数与对照组比较，各个组小鼠体重增重、胸腺指数、脾脏指数均无明显变化(P＞0.05)。大豆分离蛋白高剂量组、混合蛋白质粉高剂量组小鼠耳肿胀指数与空白对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，其余各组小鼠耳肿胀指数均无明显差异(P＞0.05)。

表 1 对小鼠体重增重、脏器系数、耳肿胀指数影响(x±s，n= 10)

组别	脾脏指数	胸腺指数	体重增重(g)	耳肿胀指数(g)
空白对照组	1.81±0.50	0.021±0.009	3.62±0.79	18.07±1.58
大豆分离蛋白低剂量组	1.96±0.48	0.022±0.007	3.46±0.58	24.69±2.94
大豆分离蛋白高剂量组	2.26±0.65	0.025±0.008	3.63±0.53	27.20±2.31#
混合蛋白质粉低剂量组	2.16±0.55	0.024±0.006	3.53±0.87	23.30±2.05
混合蛋白质粉高剂量组	2.04±0.52	0.022±0.009	3.43±0.71	27.47±2.16#

注：#表示与空白对照组比较P＜0.05

2.2 对小鼠淋巴细胞转化与NK细胞活性影响  与空白对照组比较，大豆分离蛋白高剂量组小鼠淋巴细胞转化能力增强(P＜0.05) 、NK细胞活性明显升高(P＜0.05)。与空白对照组比较，混合蛋白质粉低、高剂量组小鼠淋巴细胞转化能力增强(P＜0.05) 、NK细胞活性明显升高(P＜0.05)。

表2对小鼠淋巴细胞转化与NK细胞活性影响(x±s，n=10)

组别	淋巴细胞转化(OD值)	NK细胞活性(%)
空白对照组	0.275±0.077	44.91±2.55
大豆分离蛋白低剂量组	0.293±0.092	46.37±4.73
大豆分离蛋白高剂量组	0.368±0.081#	53.64±5.12#
混合蛋白质粉低剂量组	0.370±0.096#	55.32±6.79#
混合蛋白质粉高剂量组	0.3706±0.102#	56.54±7.29#

注：#表示与空白对照组比较P＜0.05

2.3 对小鼠抗体生成细胞与血清溶血素水平影响 与空白对照组比较，大豆分离蛋白以及混合蛋白质粉各组小鼠抗体生成细胞数量(溶血空斑数)与血清溶血素水平(抗体积数)均无明显变化(P＞0.05)。

表3 对小鼠抗体生成细胞与血清溶血素水平影响(x±s，n=10)

组别	溶血空斑数(×103个/106脾细胞)	抗体积数
空白对照组	1.35±0.43	117.80±30.54
大豆分离蛋白低剂量组	1.72±0.39	119.63±29.78
大豆分离蛋白高剂量组	1.50±0.64	120.85±32.55
混合蛋白质粉低剂量组	1.46±0.66	124.93±33.68
混合蛋白质粉高剂量组	1.85±0.72	122.47±34.06

2.4 对小鼠单核巨噬细胞功能影响 与空白对照组比较，大豆分离蛋白高剂量组小鼠碳廓清试验吞噬指数α明显升高(P＜0.05)；混合蛋白质粉低、高剂量组小鼠碳廓清试验吞噬指数α明显升高(P＜0.05)。与空白对照组比较，大豆分离蛋白组、混合蛋白质粉各剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验吞噬百分率无明显变化(P＞0.05)。

表 4 对小鼠单核巨噬细胞功能影响(x±s，n=10)

组别	碳廓清吞噬指数α	吞噬鸡红细胞(%)
空白对照组	5.42±0.58	5.90±2.77
大豆分离蛋白低剂量组	6.01±0.85	5.26±2.56
大豆分离蛋白高剂量组	6.25±0.72#	5.38±3.14
混合蛋白质粉低剂量组	6.37±0.61#	5.69±4.21
混合蛋白质粉高剂量组	6.28±0.43#	6.20±4.58

注：#表示与空白对照组比较P＜0.05

3讨论

本实验结果显示，空白对照组、大豆分离蛋白各剂量组、混合蛋白质粉各剂量组小鼠体重增重、胸腺指数、脾脏指数无明显变化。与空白对照组比较，大豆分离蛋白高剂量组小鼠耳肿胀指数、淋巴细胞转化能力、NK细胞活性、碳廓清吞噬指数α，具有显著性差异(P＜0.05)。与空白对照组比较，混合蛋白质粉高剂量组小鼠耳肿胀指数显著增大(P＜0.05) ，混合蛋白质粉低、高剂量组小鼠淋巴细胞转化能力、NK细胞活性，小鼠碳廓清试验吞噬指数α，具有显著性差异(P＜0.05)。表明大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对正常小鼠免疫功能均有一定调节作用。

引用文献

[1]林小明，李勇.高级营养学[M].北京：北京大学医学出版社，2004:215