黑龙江中医药大学 黑龙江省 哈尔滨市 150040
摘要:目的 研究黑芝麻核桃仁对小鼠免疫力功能的影响。方法 经口给予小鼠不同剂量的黑芝麻核桃仁30d,检测其体重增长、脾脏和胸腺体重比值以及各项免疫功能指标。结果 各组间小鼠体重增长无差异(P>0.05),小鼠细胞免疫功能、体液免疫功能、NK细胞活性测定结果均为阳性。结论 黑芝麻核桃仁能够起到增免的作用。
关键词:黑芝麻;核桃仁;免疫力
1 材料与方法
1.1实验动物ICR小鼠,SPF级,雌性,体重18~22g,由浙江省实验动物中心提供。200只小鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五个大组,每组40只小鼠,分成4个剂量组,每个剂量组10只。
1.2主要试剂与仪器 黑芝麻、核桃仁购于大型超市,刀豆蛋白A(ConA)、印度墨汁、Giemsa染液。分析天、离心机、酶标仪、生物显微镜。
1.3黑芝麻核桃仁的制备 使用粉碎机粉碎成100目粉,加纯化水配制成相应浓度,每日经口灌胃,灌胃容积为20ml/kgBW,连续灌胃一个月。参考人体推荐剂量黑芝麻2.5g、核桃仁2g,设计低、中、高剂量组分别为375、750、2250mg/kgBW,相当于人体的5倍、10倍、30倍。
1.4试验方法与数据统计:《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)增强免疫力功能检验方法。
2 结果
2.1对小鼠体重的影响
经口给予小鼠不同剂量的受试样品30d后,将所测定的各剂量组小鼠增重比较,差异均无显著性(P>0.05)。
2.2对小鼠免疫器官重量的影响
末次给药后,颈椎脱臼处死,无菌摘取胸腺和脾脏,称重,计算其相对质量。结果显示,口服黑芝麻核桃仁对小鼠脾脏和胸腺相对重量均无明显影响(见表1)。
表1 黑芝麻核桃仁对小鼠免疫器官相对重量的影响(x±s,n=10)
组别 | 脾脏指数(g/10g) | P值 | 胸腺指数(g/10g) | P值 |
对照组 | 4.520.77 | | 3.290.61 | |
低剂量组 | 4.210.61 | P>0.05 | 2.970.53 | P>0.05 |
中剂量组 | 4.270.53 | P>0.05 | 2.990.51 | P>0.05 |
高剂量组 | 4.130.55 | P>0.05 | 2.940.44 | P>0.05 |
2.3对小鼠细胞免疫功能的影响
经口给予小鼠不同剂量的受试样品30d后,用MTT法进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验,计算加ConA孔与不加ConA吸光度的差值,用耳肿胀法进行DNFB诱导小鼠DTH实验,计算耳壳增重。由表2可见,2250mg/kgBW组小鼠脾淋巴细胞中加ConA孔与不加ConA吸光度的差值高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01);2250mg/kgBW组耳壳增重高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。该项为阳性。
表2 黑芝麻核桃仁对小鼠细胞免疫的影响(x±s,n=10)
组别 | 加ConA孔与不加ConA吸光度的差值 | P值 | 耳壳增重(mg) | P值 |
对照组 | 0.117±0.031 | | 8.3±2.9 | |
低剂量组 | 0.111±0.065 | P>0.05 | 11.3±3.1 | P>0.05 |
中剂量组 | 0.141±0.053 | P>0.05 | 10.7±3.9 | P>0.05 |
高剂量组 | 0.225±0.043 | P<0.01 | 12.0±3.3 | P<0.05 |
2.4对小鼠体液免疫的影响
经口给予小鼠不同剂量的受试样品30d后,用Jerne改良玻片法进行小鼠抗体生成细胞实验,计算溶血空斑数。有表3可见,2250mg/kgBW组小鼠溶血空斑数高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2250mg/kgBW组小鼠血清半数溶血值(HC50)高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。该项为阳性。
表3 黑芝麻核桃仁对小鼠体液免疫的影响(x±s,n=10)
组别 | 溶血空斑数(103个/全脾细胞) | P值 | HC50 | P值 |
对照组 | 13.4±2.6 | | 100±43 | |
低剂量组 | 14.1±2.7 | P>0.05 | 121±17 | P>0.05 |
中剂量组 | 15.2±2.6 | P>0.05 | 128±13 | P>0.05 |
高剂量组 | 16.3±2.3 | P<0.01 | 130±14 | P<0.05 |
2.5对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
经口给予小鼠不同剂量的受试样品30d后,进行小鼠碳廓清实验,计算吞噬指数a。由表4可见,2250mg/kgBW组小鼠碳廓清吞噬指数a高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率及吞噬指数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。该项为阴性。
表4 黑芝麻核桃仁对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响(x±s,n=10)
组别 | 吞噬指数a | P | 吞噬百分率(%) | P值 | 吞噬指数 | P值 |
对照组 | 5.46±0.63 | | 22.1±4.1 | | 0.27±0.03 | |
低剂量组 | 5.95±1.57 | P>0.05 | 22.6±3.5 | P>0.05 | 0.30±0.04 | P>0.05 |
中剂量组 | 5.90±0.93 | P>0.05 | 23.1±3.9 | P>0.05 | 0.31±0.05 | P>0.05 |
高剂量组 | 6.73±0.84 | P<0.05 | 23.5±3.2 | P>0.05 | 0.31±0.03 | P>0.05 |
2.6对NK细胞活性的影响
经口给予小鼠不同剂量的受试样品30d后,用乳酸脱氢酶测定法进行小鼠NK细胞活性测定。由表5可见,750mg/kgBW组小鼠NK细胞活性高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。该项为阳性。
表5黑芝麻核桃仁对小鼠NK细胞活性的影响(x±s,n=10)
组别 | NK细胞活性(%) | P值 |
对照组 | 24.7±7.3 | |
低剂量组 | 30.2±6.3 | P>0.05 |
中剂量组 | 38.5±9.7 | P<0.01 |
高剂量组 | 33.1±10.4 | P>0.05 |
3 结论
根据《保健食品检验与评价技术规范》中增强免疫力功能试验的结果判断,黑芝麻核桃仁能够起到增免的作用。