抗人球蛋白配血试验

刘宏扬

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)01-0240-01

【关键词】抗人球蛋白试验抗体血型检测

1抗人球蛋白配血法

(1)抗人球蛋白试验原理

红细胞表面被大量的IgG抗体分子及补体分子C3、C4的片段所包绕，这些包绕物均为人球蛋白，不足引起凝集反应，这种红细胞称为致敏红细胞。而抗人球蛋白血清(anti—globulin)，可以与致敏红细胞作用发生凝集，即红细胞表面的人球蛋白与抗人球蛋白血清发生特异性反应而使红细胞凝集，抗人球蛋白分子起着搭桥作用，从而证明IgG抗体的存在。

(2)材料

1)受血者和供血者血清及5%红细胞悬液(红细胞需洗涤3次)。

2)抗人球蛋白血清(最适稀释度)。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)阳性红细胞悬液。

(3)操作

1)取小试管3支，分别标明主侧管(Ps+Dc)即受血者血清加供血者红细胞，次侧管(Pc+DS)即受血者红细胞加供血者血清，自身对照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者红细胞。

2)主侧管内加受血者血清4滴和供血者5%红细胞悬液1滴；次侧管加供血者血清4滴和受血者红细胞悬液1滴；自身对照管内分别加受血者自身血清4滴和自身红细胞悬液1滴。摇匀混合，置37℃水浴30～60分钟，每隔15分钟振摇1次试管，促进反应。

3)取出试管以生理盐水洗涤红细胞3次，末次弃尽盐水。

4)各管内加最适稀释度抗人球蛋白血清2滴混匀。

5)以3500r/min离心15秒。肉眼观察。

6)同时用抗D血清和AB型血清按上述与Rh(D)阳性红细胞做阳性、阴性对照。

(4)结果分析

先看阳性、阴性对照管是否符合，如对照无问题，再看Ps+Dc及Ds+Pc管有否凝集，无凝集就可输用。如Ds+Pc管显凝集，须看自身对照管。如自身对照管也显凝集，说明受血者红细胞上已有抗体吸收。假如Ds+Pc管凝集不强于对照管，可输用。Ps+Dc管有凝集时不能输用。

(5)报告方式

1)Ps+Dc抗人球蛋白试验阳(阴)性。

2)Pc+Ds抗人球蛋白试验阳(阴)性。

(6)注意事项

1)抗人球蛋白配血试验须用受血者血清而不能用血浆，因抗凝剂是抗补体的，对某些需要补体的抗体可能不能显示。

2)假如遇到1例受血者，其血清具有一种抗体，既不是自身抗体，又对许多人的红细胞均显凝集，又急需输血时，可试用其兄弟、姐妹的血液做交配，可能会有配合的。

3)自身免疫性溶血性贫血病人有时血清中有非特异性抗体。对每一个供血者的Ps+Dc管均呈凝集，此时要参照自身对照，如Ps+I)c管反应比较弱，受血者又急需输血，也可输给。如几个供血者中反应有强有弱，就选择反应弱的。最好先确定受血者的抗体有否型特异性，如受血者有抗e则选用R2R2血液，除特异性抗体之外，还有非特异的，还需注意有无同族抗体。

4)本试验Ps+Dc及Ds+Pc管致敏用血清量太多，这是因抗人球蛋白试验致敏时用的血清量愈大愈敏感。做配血试验时受血者可能有极弱的抗体，不易检出，在输给不合的血液后出现溶血。

为此将致敏用的血清多加一些，如受血者标本很少，也可按常规做法即血清2滴加供血者压积红细胞1滴。

2PEG-IAT法

间接抗人球蛋白试验(IAT)是一种较理想配血试验，但因试验所需时间长，临床急需输血时使用极不方便。因此，我们实验室对IAT试验进行改良，在原试验基础上添加了聚乙二醇(PEG)试剂，即称PEG-IAT试验。PEG为一种无电荷的大分子物质，加入反应溶液中，可增加反应速度，有利于反应物之间相互碰撞，易形成免疫复合物，提高抗原抗体的敏感性。传统的IAT试验需37℃水浴60分钟，而改良后PEG-IAT试验，只需37℃水浴5分钟。王振芳等改良后的PEG-IAT配血试验，经多年临床观察，认为该方法时间短，且敏感性高、特异性强，可作为常规配血技术。PEG-IAT试验详见《上海医学检验杂志))1997；12(2)：95。

(1)材料

1)受、供者的血清及5%红细胞悬液(红细胞洗3次)。

2)抗人球蛋白的血清。

3)抗D血清。

4)AB型血清。

5)5%Rh(D)阳性红细胞悬液。

6)3%PEG溶液。

(2)操作

1)取小试管3支，分别标明主侧管(Ps+De)，即受血者血清加供血者红细胞，次侧管(Pc+Ds)即受血者红细胞加供血者血清，自身对照管(Ps+Pc)，即受血者血清加受血者红细胞。

2)主侧管内加受血者血清1滴和供血者5%红细胞悬液1滴；次侧管加供血者血清1滴和受血者红细胞悬液1滴；自身对照管内分别加受血者自身血清1滴和自身红细胞悬液1滴。

3)主侧、次侧、自身对照3管分别加入3%PEG溶液2滴。

4)混匀，置37℃水浴5分钟。

5)取出以上各管，以生理盐水洗涤3次，末次弃尽盐水。

6)各管内加最适稀释度抗人球蛋白血清1滴，并混匀。

7)以3500r/min离心15秒，肉眼观察。

8)同时用抗D血清和AB型血清按上述与Rh(D)阳性红细胞做阳性、阴性对照。

(3)结果分析

同抗人球蛋白配血试验结果分析。

(4)报告方式

1)Ps+DcPEG-IAT有(无)凝集、溶血。

2)Pc+DsPEG-IAT有(无)凝集、溶血。

参考文献

[1]王培华.输血技术学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2002:126-131.

[2]中华人民共和国卫生部.卫医发[2000]184号,临床输血技术规范.

[3]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M],第3版.南京:东南大学出版社,2006:262-264.