慢性乙肝患者肝纤维化脯氨酸肽酶检测

秦忠琦

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)16-0031-02

【关键词】慢性乙型肝炎脯氨酸肽酶肝纤维化

肝纤维化是肝脏内纤维结缔组织异常增生的病理过程。减缓或阻止肝纤维化进程具有非常重要的意义。使用灵敏的、特异的指标早期预测肝纤维化是预防肝纤维化的关键。肝脏穿刺活检一直是重要依据[1]，但是由于它的创伤性和局限性，常规检查尚存在困难，因此非侵入性的间接诊断指标更受到临床医师的关注。有研究认为脯氨酸肽酶（prolidase,PLD）与乙型肝炎患者肝纤维化病变有一定的相关性。为了解乙型病毒性肝炎肝纤维化过程中PLD的变化情况，来确定PLD的检测在慢性乙肝患者肝纤维化中的作用，我们选择2008年1月-2010年4月沈阳市传染病医院住院的慢性乙型肝炎病人进行实验检测，现报告如下。

1资料与方法

1.1资料选择2008年1月-2010年4月沈阳市传染病医院住院的慢性乙型肝炎病人191例，其中男124例，女67例，年龄12～66岁。按肝纤维化程度进行分期，S0-1期（无明显肝纤维化）101例，S2-4期（明显肝纤维化）90例。所有病例均符合以下条件：（1）有慢性乙型肝炎病史；（2）入院前无其他型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒感染；（3）排除肝癌和器官移植；（4）排除脂肪肝和酒精肝。以上患者的诊断均符合2000年西安会议肝炎诊断标准[2]，在性别、年龄、病情和病程方面均有可比性。

1.2方法静脉真空采血2ml，检测白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、血小板（PLT）等血常规检查用全血细胞分析仪检测（美国贝克曼公司）；静脉真空采血5ml，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）等生化指标，用7170生化分析仪进行检测（日本日立公司）。PLD(脯氨酸肽酶)活性测定采用脯氨酸肽酶ELISA试剂盒（上海生科生物科技有限公司），按说明操作。

1.3统计分析采用SPSS13.0软件进行统计分析。描述结果以中位数（最小值～最大值）表示。连续性变量用Mann-WhitneyUTest分析；分类性变量用x2检验。利用ROC曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve)确定最优截断点，同时计算ROC曲线下面积(AUROC)和各截断点的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及Youden指数等。

2结果

2.1不同肝纤维化程度的患者各指标比较（表1）在S0-1和S2-4不同分期中，除了性别、Hb、TP外，其他各项指标差异有统计学意义(P<0.05)。

表1慢性乙型肝炎患者的临床特点

2.2血清ALT，AST，AST/ALT和PLD活性的ROC曲线面积和最优截断点ALT、AST、AST/ALT比值和PLD的ROC曲线下面积分别为0.614，0.648，0.655和0.807。PLD的AUROC最大，其95％的可信区间为0.739～0.874。最优截断点约为1250U/L，灵敏度和特异度分别为75.6%和75.2%。

2.3不同截断点PLD特征（表2）列出PLD在不同截断点的灵敏度、特异度、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）。如果以PLD≤1250U/L作为无明显肝纤维化的诊断，PLD≤1250U/L的99中有77人诊断正确（77.8％）；PLD≥1250U/L的92人中有68人具有明显肝纤维化(73.9％)。当PLD≤1300U/L的Youden指数为0.535，灵敏度和特异度分别为73.3％和80.2％，当PLD≥1400U/L的Youden指数为0.555，灵敏度和特异度分别为64.4％和91.1％，与最优截断点为1250U/L时比较，灵敏度降低，但是特异度增加。

表2血清PLD在不同截断点下的灵敏度和特异度

3讨论

长期以来，肝纤维化程度的确诊离不开肝活组织检查，但由于病灶在肝内分布不均匀，而且肝穿刺组织仅占全肝的5万分之一，容易造成诊断误差[3]。因此临床上迫切需要寻找简单及易推广的非创伤性诊断指标诊断肝纤维化。本研究通过检测血清中PLD活性，探讨其对肝纤维化程度的诊断价值。

脯氨酸肽酶（PLD）全称为亚氨酸脯氨酸二肽酶，是由两个相同的亚基组成的二聚体，其相对分子量为97000。PLD对氨酰基脯氨酸二肽具有高催化活性但活性较低。当组织纤维化程度增强时，体内胶原蛋白含量相对增多，机体可通过正反馈调节作用使PLD活性上升，所以对PLD活性的检测可间接反映组织纤维化的进展程度[4]。2007年，Bolarin等[5]报道血浆中PLD活性可作为慢性肝脏疾病早期肝纤维化的检测指标。2006年Duong等[6]报道了疤痕组织中PLD蛋白表达增强。在本研究中PLD随着肝纤维化的严重程度而升高，所以对PLD活性的检测可间接反映肝病患者肝细胞损伤和纤维化的进展程度。

ROC曲线及曲线下面积可作为某一诊断方法准确性评价的指标。中华医学会检验分会特别强调各临床实验室应根据ROC曲线确定诊断某类疾病适当的临界值[7]。本研究利用ROC曲线进行分析可见，PLD可以用于对肝纤维化程度的初步评价。

PLD检测方法简单，准确可靠，重复性好，又不需要特殊仪器设备，对慢性乙肝纤维化患者的早期诊断、鉴别诊断、疗效评估及预后判断具有参考价值。

参考文献

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