淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效研究

肖育红周敏齐倩

【摘要】目的探讨复发性流产患者应用淋巴细胞主动免疫治疗后的临床疗效。方法对经检测确认单纯为封闭抗体缺乏的161例复发性流产患者随机分为2组，研究组89例，给予淋巴细胞免疫治疗；对照组72例，未行任何处理，比较两者妊娠结局。研究组经治疗后常规复查封闭抗体，比较封闭抗体阳性组及阴性组妊娠结局。结果研究组及对照组妊娠成功率分别为59.6％及33.3％，流产率分别为11.3%及54.1%，两组比较差异有统计学意义；免疫治疗后封闭抗体阳性组及阴性组妊娠成功率分别为68.1%及23.5%，流产率分别为10.2%及25％，两组比较差异有统计学意义。结论淋巴细胞免疫治疗是一种治疗封闭抗体不足复发性流产的安全、有效的治疗方法。

【关键词】封闭抗体淋巴细胞免疫治疗复发性流产

【中图分类号】R714【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）51-0035-02

复发性流产（Repetitivespontaneousabortion,RSA）是指临床上连续2次或2次以上发生的自然流产，发生率约为0.4－1％，原因复杂，近代生殖免疫研究表明，RSA可能的病因包括染色体异常，母体生殖道解剖结构异常、内分泌失调、生殖道感染、自身免疫、环境因素和心理应激因素等有关［1］。原因不明的RSA称之为不明原因复发性流产（URSA），约占所有RSA的40－80％，考虑与免疫因素有关，免疫因素除一部分与自身抗体有关外，另一部分被认为是母胎双方免疫不适应，其中封闭抗体缺乏（blockingantibody,BA）是主要原因。本实验应用淋巴细胞免疫治疗，探讨该方法对治疗封闭抗体缺乏的复发性自然流产的临床疗效。

1资料和方法

1.1一般资料选择2010年9月至2011年3月在我院生殖中心或妇产科门诊就诊的符合复发性自然流产诊断的161例患者，经临床检查确认为封闭抗体缺乏，年龄23－44岁，平均年龄29.9岁，流产次数2－8次，平均3.94次，均为妊娠12周以内的流产，平均9.8周。随机分为两组，研究组89例，使用丈夫或供体淋巴细胞进行主动免疫治疗；对照组72例，未予任何处理。

所有RSA患者均符合以下条件：（1）2次或2次以上的早期自然流产史；（2）夫妇双方染色体核型分析正常，无家族遗传病史；（3）行常规妇科检查、超声检查、子宫输卵管造影检查或宫腔镜检查等排除生殖道畸形；（4）阴道白带常规检查排除生殖道感染；（5）生殖内分泌激素测定、甲状腺功能测定均正常；（6）自身免疫性抗体检查（抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体、抗卵巢抗体等）均呈阴性；（7）男方精液分析正常。

1.2方法

1.2.1封闭抗体检测抽取患者外周血2ml，分离血清，封闭抗体用ELISA方法进行测定，所用试剂由美国ONELAMBDA公司生产，按试剂盒说明书进行操作。

1.2.2淋巴免疫治疗方法抽取配偶或供体（需排除血清HIV、RPR、肝炎病毒抗原抗体）外周血25－30ml（肝素抗凝），无菌条件下常规分离提取淋巴细胞，用生理盐水洗涤3次后调至淋巴细胞浓度为（2－4）×107/ml，在病人前臂处皮内注射9个点，每3周注射1次，3次为一个疗程，末次免疫治疗后2周复查封闭抗体，若封闭抗体转阳性可计划怀孕，并嘱每6－8周注射1次，直至妊娠，妊娠后继续每3周注射一次，直至12周以后；若阴性则继续进行下一个疗程的治疗后计划妊娠。

1.2.3观察指标患者经淋巴细胞免疫治疗后，注意观察阳转率、再次妊娠流产情况等，经治疗后超声检查提示妊娠维持至12周以上即为治疗有效。

1.3统计学方法采用SPSS7.0统计学软件分析，率的比较采用χ2检验。

2结果

2.1淋巴细胞主动免疫治疗后封闭抗体转阳组与阴性组妊娠率及流产率的比较

研究组的89例封闭抗体阴性患者，经2个疗程的淋巴细胞免疫治疗后，封闭抗体转为阳性者共72例（80.9％），已妊娠49例（68.1%），其中5例再次发生早中期流产，流产率为10.2%；经治疗后封闭抗体仍为阴性的17例患者中，4例妊娠（23.5%），1例发生早中期流产，流产率为25％，两组比较有统计学差异。89例患者经治疗后的总妊娠率为59.6％，总流产率为11.3％。见表1。

表1免疫治疗后的临床疗效

3讨论

流产的原因除常见的染色体异常、生殖道畸形、内分泌异常及感染因素等外，免疫因素是一个重要的、不可忽视的原因。胚胎是半同种移植物，妊娠后母体免疫系统会发生各种相应的变化以避免发生免疫排斥，妊娠能否成功取决于孕妇本身的免疫状态及免疫调节能力和胚胎的质量。RSA的发病过程，基本上可以归结为母胎之间的免疫耐受平衡被破坏、导致胚胎半同种异体移植的失败。在正常妊娠中，滋养细胞携带的父系抗原可以刺激母体免疫系统产生一类IgG抗体，又称BA，其通过封闭父方来源的胎儿组织相容性白细胞抗原使胎儿这一半移植物得以逃脱母体免疫系统的攻击［2，3］。史青杨等［4］报道，有2/3的RSA患者体内缺乏封闭抗体，可见母体缺乏封闭抗体可导致习惯性流产的发生。

对BA缺乏的习惯性流产患者可以应用淋巴细胞免疫治疗，罗晓红等［5］的研究显示淋巴细胞主动免疫治疗能提高RSA患者BA的阳性率及再次妊娠的成功率，BA对预计再次妊娠的结局有良好的参考价值。淋巴细胞主动免疫治疗主要是利用丈夫淋巴细胞作为一种同种异体抗原，刺激并诱导母体产生各种封闭抗体，这些抗体与胚胎的父源性抗原结合，使母体对胚胎处于一种低识别或低反应状态，以致胚胎不被母体免疫系统排斥而能在宫内正常生长发育。本文通过对研究组应用淋巴细胞主动免疫治疗后，比较研究组和对照组的妊娠结局，得出研究组妊娠率（59.6％）显著高于对照组（33.3％），研究组流产率（11.3％）明显低于对照组（54.1％），两组比较差异有显著性。同时，免疫治疗后BA阳性组与阴性组妊娠结局比较，阳性组妊娠成功率（68.1％）明显高于阴性组（23.5％），两者比较差异有统计学意义。说明经过淋巴细胞免疫治疗后，封闭抗体产生增加，妊娠成功率明显提高。但是我们看到，17例经治疗后BA仍为阴性的患者中，仍有1例成功妊娠，因此，淋巴细胞免疫治疗是否只是增加封闭抗体的水平而起治疗作用，需进一步研究

综上所述，利用淋巴细胞主动免疫疗法治疗封闭抗体缺乏所致的复发性流产，其免疫反应强，无明显不良反应，可提高妊娠率，具有临床应用价值及较好的发展前景，对于指导免疫因素所致反复行流产的治疗具有十分重要的意义。但是淋巴细胞免疫治疗是否只是针对封闭抗体的增加而发生作用，则有待于进一步的研究及更多的临床总结。

参考文献

[1］PandeyMK,RaniR,AgrawalS.Anupdateinrecurrentspontaneousabortion.ArchGynecolObstet,2005,272:95-108.

[2］PandeyMK,AgrawalS.InductionofMLR-Bfandprotectionoffetalloss:flcurrentdoubleblindrandomizedtrialofpaternallymphocyteimmunizationforwomenwithrecurrentspontaneousabortion.IntImmunopharmacol,2004,4:289-298.

[3］PandeyMK,ThakurS,AgrawalS.Lymphocyteimmuno-therapyanditsprobablemechanisminthemaintenanceofpregnancyinwomenwithrecurrentspontaneousabortion.ArchGynecolObstet,2004,269:161-172.

[4］史青杨，李春洪，冯丽华.不明原因反复自然流产的免疫病因研究进展［J］.中国实验诊断学，2010，14：154－155.

[5］罗晓红，张金华，李晓园，等.反复自然流产患者免疫治疗前后封闭抗体的变化及其意义.中国卫生检验杂志，2007，17：1897－1898.