3种苏木素染液的染色效果比较

(整期优先)网络出版时间:2014-12-22
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3种苏木素染液的染色效果比较

高金来

高金来

(湖州市妇幼保健院313000)

【中图分类号】R36【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2014)31-0366-01

在HE染色中,细胞核的着色情况直接影响着病理切片的质量。而苏木素染液又是细胞核染色的关键,苏木素染色的好坏决定着细胞核的着色深浅,也决定了一张切片的质量[1]。所以选择合适的苏木素染液十分重要。我们对3种常用的苏木素染液的染色效果进行分析和比较,寻找更为稳定可靠的苏木素染色液。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1Harris苏木素原料:苏木精1g,硫酸铝钾15g,无水乙醇10ml,蒸馏水200ml。配置方法:先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木精再倒入已经溶解好的硫酸铝钾蒸馏水中,煮沸1min,稍冷却,慢慢加入红色氧化汞0.5g防止溅出,再煮沸2min,此时将烧瓶立即浸于冷水中冷却,当染液冷却后用纱布盖好瓶口,使用之前用滤纸过滤后每100ml加冰醋酸5ml就可以使用。

1.1.2Gill改良苏木素原料:苏木精2g,硫酸铝钾17g,无水乙醇250ml,蒸馏水750ml,碘酸钠0.2g,冰醋酸20ml。配置方法:先将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中,两溶液溶解后将其混合入碘酸钠,待苏木精氧化成紫红色,再加入冰醋酸。

1.1.3Lillie-Mayerh苏木素原料:苏木精5g,硫酸铝钾5g,碘酸钠0.5g,蒸馏水600ml,甘油300ml,冰醋酸20ml。配置方法:取1000ml的烧杯一个,将硫酸铝钾倒入蒸馏水中,苏木素同样也在蒸馏水中加热搅拌,等两液完全溶解再相互混合,搅拌充分后缓缓加入碘酸钠,搅匀煮沸3分钟,等温度降低到40度左右再加入甘油,待完全冷却后加入冰醋酸入棕色瓶备用。

1.2方法

选择各类手术切除的人体病变组织,包括乳腺、子宫内膜、皮肤、卵巢、子宫颈病变等存档蜡块60例,连续切片,分别使用上述3种染色液进行HE染色,光学显微镜观察。

2结果

Lillie-Mayerh苏木素的切片细胞核呈鲜亮的蓝色,细胞核结构清晰,与胞浆对比鲜明;Gill苏木素染色的切片总体较鲜亮,但部分组织切片细胞核微细结构不清晰,与胞浆对比不如Lillie-Mayerh苏木素的切片;Harris苏木素染色的切片染色效果尚可,但1/10(6例)切片内有苏木素结晶沉淀,影响观察。

3讨论

Harris苏木素的配方中氧化剂是氧化汞,在使用过程中通过加温氧化,可以加速苏木红的形成,但容易出现金属样氧化膜浮在液面和容器壁上[2]。容易污染切片,而且氧化汞有剧毒污染环境,危害工作人员的身体健康。

Gill苏木素的配方虽然减少了硫酸铝钾的用量,用碘酸钠代替氧化汞,使其不完全氧化,但色素基仍参与铝离子的结合而完成组织的显色,但是因为苏木素的用量减少了,在染色过程中细胞核的着色不够鲜亮,试剂使用时间短,着色能力不够平衡。

Lillie-Mayerh苏木素的配方中,用碘酸钠代替氧化汞,减少硫酸铝钾的用量,而且染色液中加入了甘油,这样使得剩余氧化的苏木素在使用过程中仍能自然氧化,能缓慢不断的补充发色基和助色基以达到相对稳定的染色环境,配制后可以保存1年以上,连续使用2个月也不会改变着色速度和对组织的选择性能,碘酸钠用量适当在苏木素染液中分布均匀,分子间的氧化交换呈均匀反应,无氧化膜形成,由此减少了对切片的污染,染色能力得到了提高,并且保护环境和工作人员的身体健康。

通过比较我们不难看出Lillie-Mayerh苏木素液很好地克服了Harris苏木素和Gill苏木素所存在的缺点,使细胞核呈鲜亮的蓝色,核膜、核仁清晰,核染色质颗粒清晰可见,组织或细胞的一般形态结构特点及不同物质成分都能够各显其色,是一种理想的苏木素染色液。

参考文献

[1]李纪理.改良Harris苏木素液染色效果的观察[J].临床和实验医学杂志,2008,7(9):151.

[2]陈梦红,廖云萍,石琳俐,等.一种迅速混合配制苏木素的方法[J].河南肿瘤杂志,2009,15(4):292.