复方芍红颗粒的薄层鉴别研究

陈金凤1,2马文娜1常文1滕亮2(通讯作者)

（1新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830011）

（2新疆医科大学第一附属医院药学部新疆乌鲁木齐830011）

【摘要】目的建立复方芍红颗粒中四种药材的TLC鉴别法。方法鉴别白芍的TLC条件为：以三氯甲烷︰乙酸乙酯︰甲醇︰甲酸=10︰1.25︰3︰0.1为展开剂，喷5%香草醛硫酸溶液；鉴别红花的TLC条件为：以乙酸乙酯︰甲酸︰水︰甲醇=7︰2︰3︰0.4为展开剂；鉴别川芎的TLC条件为：以正己烷︰乙酸乙酯=5︰1为展开剂，在紫外365nm下观察；鉴别蔷薇红景天的TLC条件为：三氯甲烷-甲醇-丙酮-水（6︰3︰1︰1），用碘蒸气熏15-20分钟。结果在该鉴别条件下，各斑点清晰，分离度较好。结论该方法简便快捷，重复性好，专属性高，为复方芍红颗粒的质量控制提供参考。

【关键词】复方芍红颗粒白芍红花川芎蔷薇红景天薄层色谱

【中图分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）22-0080-02

TheStudyontheIdentificationoftheFufangShaohonggranulesbyTLC

CHENJinfeng1，2，CHANGWen1，MAWenna1，TENGLiang2*

(1.CollegeofPharmacy，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011;2.PharmacyDepartment，theFirstAffiliatedhospitalofXinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011)

【Abstract】ObjectiveToidentifythecomponentsinFufangShaohonggranules.MethodsTheconditionofTLCwhichwasusedtoidentifyPaeonialactifloraPallisasfollowing:themixtureofchloroform,ethylacetate,methanolandformicacid(10︰1.25︰3︰0.1)isdevelopingagent,andthe5%vanillinsulfuricacidsolutionischromogenicagent.TheconditionofTLCwhichwasusedtoidentifyCarthamustinctoriousisasfollowing:themixtureofethylacetate,formicacid,waterandmethanol(7︰2︰3︰0.4)isdevelopingagent.TheconditionofTLCwhichwasusedtoidentifythehawthornisasfollowing:themixtureofmethylbenzene,ethylacetateandformicacid(10︰2︰0.5)isdevelopingagent.TheconditionofTLCwhichwasusedtoidentifytheRhodiolaroseaL.isasfollowing:themixtureofchloroform,methanol,acetoneandwater(6︰3︰1︰1)isdevelopingagent,andthesilicagelplatisplacedundertheIodinevapor15-20minutes.Resultstherewasagoodseparatingdegreeandthespotswereclear.ConclusionThemethodissimple,fast,repeatableandhighspecific,whichcanbeusedtocontrolthequalityofFufangShaohonggranules.

【Keywords】FufangShaohonggranulesPaeonialactifloraPallCarthamustinctoriousLigusticumwallichiiRhodiolaroseaL.thin-layerchromatography

复方芍红颗粒为白芍、红花、蔷薇红景天、川芎等药材组成的中药复方制剂，具有清热凉血、散瘀止痛之功效。课题组前期已经完成了复方芍红颗粒剂的制备工艺研究，药理学试验表明该制剂具有良好的抗冠心病功效。

鉴别项是质量标准研究的重要内容之一。薄层色谱鉴别具有适应面广、信息量大、效率高、设备简单、快速灵敏、吸附剂与显色剂选择性大等优点，同时文献调研表明方中药材均具有采用TLC进行鉴别的可能性。因此本研究中主要尝试采用TLC法对复方芍红颗粒中对每味药材都进行鉴别研究，为该制剂的质量控制提供试验依据。

1仪器与试剂

1.1仪器电子天平（YP1002N，上海菁海仪器有限公司），ZF-I型365nm紫外灯（上海），KQ-100型超声波清洗器。

1.2对照药材白芍药材（批号120905-201109，中国食品药品检定研究院），红花药材（批号120907-201111，中国食品药品检定研究院），蔷薇红景天药材（批号20100105，新疆华圣元医药有限公司提供），川芎药材（批号120918-201110，中国食品药品检定研究院）。

1.3试剂硅胶G、GF254（薄层色谱用），青岛海洋化工有限公司制造；正丁醇、甲醇、三氯甲烷、乙醚、正己烷、乙醇、硫酸、甲苯、丙酮、乙酸乙酯、甲酸、碘均为分析纯，水为蒸馏水。

1.4样品复方芍红颗粒、缺白芍阴性样品颗粒、缺红花阴性样品颗粒、缺蔷薇红景天阴性样品颗粒、缺川芎阴性样品颗粒（新疆医科大学药学院药物分析教研室自制）。

2方法与结果

2.1白芍的鉴别精密称取复方芍红颗粒、缺白芍阴性样品颗粒各2.0g、白芍药材适量，分别研磨成粉末。精密称取白芍药材1.0g，置具塞锥形瓶中，分别加入甲醇25ml溶解，浸泡4小时，超声处理30min，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液、阴性对照品溶液和药材对照品溶液[1]。

照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取复方芍红颗粒样品溶液、阴性对照品溶液、白芍药材溶液各5μl，分别点与同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷︰乙酸乙酯︰甲醇︰甲酸=10︰1.25︰3︰0.1为展开剂，展开，取出，凉干，喷5%香草醛硫酸溶液(5克香草醛溶于10%的硫酸乙醇溶液超声5分钟)，105℃加热10分钟[2]，结果见图1。由图可见，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺白芍的阴性对照品无干扰。

2.2红花的鉴别[3-5]分别精密称取复方芍红颗粒、缺红花阴性样品各2.0g、红花对照药材适量，研磨成粉末，精密称取0.5g，分别加入80%丙酮溶液10ml，超处理30min，过滤，取滤液作为供试品溶液、阴性对照品溶液和对照药材溶液。

照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取芍红颗粒样品溶液、阴性对照品溶液、对照药材溶液各4μl，分别点与同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯︰甲酸︰水︰甲醇(7︰2︰3︰0.4)为展开剂，展开，取出，凉干，结果见图2。由图可见，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺红花的阴性对照品无干扰。

2.3红景天的鉴别精密称取复方芍红颗粒、缺蔷薇红景天阴性样品2.0g、蔷薇红景天对照药材粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液10ml，密塞，摇匀，超声处理30min，过滤，取上清液作为供试品溶液、阴性对照品溶液和对照药材溶液。

照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取复方芍红颗粒样品溶液、阴性对照品溶液、蔷薇红景天药材溶液各5μl，分别点与同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷︰甲醇︰丙酮︰水(6︰3︰1︰1)为展开剂[4]，展开，展距为12.5厘米，取出，凉干，在碘蒸气中熏10到20分钟，直到显色，结果见图3。由图可见，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺红景天的阴性对照品无干扰。

2.4川芎的鉴别[6]取分别精密称取复方芍红颗粒、取缺川芎阴性样品颗粒各3.0g、川穹药材适量，研磨成粉末。置圆底烧瓶中，分别加入乙醚溶液40ml，在38℃水浴锅上加热回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯溶液2ml溶解，摇匀，作为供试品溶液、阴性对照品品溶液和对照药材溶液。

照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取芍红颗粒样品溶液、阴性对照品溶液、对照药材溶液各5μl，分别点与同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷︰乙酸乙酯(5︰1)为展开剂，展开，取出，凉干，在紫外254nm下观察，结果见图5。由图可见，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，缺川芎的阴性对照品无干扰。

3小结与讨论

3.1白芍鉴别时的显色剂的选择药典规定，凡没有特别指明硫酸浓度时，都是指浓硫酸。称取2.5g香草醛溶于50ml浓硫酸中，由于溶剂浓度太高，显色喷瓶无法喷出。又换稀硫酸(即5.7ml浓硫酸加水稀释到100ml)，显色喷瓶喷出雾状，但白芍不显色。经查文献，香草醛硫酸溶液又称香草醛硫酸乙醇溶液（10.4ml浓硫酸，用无水乙醇稀释到100ml，即10%硫酸乙醇溶液），称取2.5g香草醛溶于10%硫酸乙醇溶液，超声5分钟，放冷，定容置50ml即得5%香草醛硫酸乙醇溶液。此显色剂主要用于苷类的定性鉴别。

3.2红花的鉴别初次点样量为10μl，点样量过大，薄层板上出现三条很宽的色带。后又降低点样量，分别为3μl、5μl、7μl进行点样，3μl量偏小，出现斑点较模糊，7μl也出现明显的色带，所以最佳点样量为5μl，出现的斑点清晰，分离度较好。

3.3川芎的鉴别预试验中更换不同配比展开剂，供试品溶液、阴性对照溶液和药材溶液都会在同一位置出现斑点，怀疑阴性对照溶液污染。重新制备阴性样品颗粒，重新制备阴性样品溶液后，采用多种展开剂进行展开，样品与对照药材溶液均有川斑点，但正己烷︰乙酸乙酯(5︰1)斑点最清晰，Rf值较为理想。

3.4蔷薇红景天的鉴别经查阅文献，采用展开剂为氯仿:甲醇:水（13:10:2.5）时[7]，红花样品出现黄色斑点；采用甲醇-氯仿（1:4）为展开剂，显色剂用10%的硫酸乙醇时不显色；用5%香草醛硫酸时，白芍样品溶液出现斑点；最后采用用三氯甲烷:甲醇:丙酮:水（6:3:1:1）为展开剂[4]，用碘蒸气熏显色，供试品溶液和药材溶液相同位置上出现了黄色斑点，阴性对照无干扰。

3.5小结本文建立了可用于鉴别复方芍红颗粒四种药材的薄层色谱方法。该方法所得薄层色谱中斑点清晰，分离度较好，阴性无干扰，重复性强，专属性高，可为复方芍红颗粒的质量控制提供参考。

参考文献

[1]梁毅,高平,张勤等.活血止痛合剂的薄层鉴别研究[J].时珍国医国药,2008,19(9):2210-2212.

[2]王婴,张婧,王岩等.养精种玉颗粒的定性定量方法研究[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(15):76-78.

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[4]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2010：141

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[6]陈军.川芎与混淆品茶芎的比较鉴别[J].中草药,2001,32(4):353-355.

[7]王杰,贺星,徐素伟等.红景天属植物的研究进展[J].中草药,2007,38(7):附2-附4.