净糖胶囊质量研究

邓杏好1林明越2李庆国3

【中图分类号】R977.1+5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）24-0146-02

【摘要】目的探讨建立净糖胶囊质量的方法。方法采用薄层色谱法（TLC）对知母、白芷、枸杞和玄参药材进行定性鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）对葛根素进行含量测定。结果TLC特征斑点清晰、重复性强。葛根素在0.1000～0.4000µg（r=0.9996）的范围内具有良好的线性关系，平均回收率分别为98.12%（RSD=1.4%，n＝6）。结论所建标准用于净糖胶囊的质量控制。

【关键词】净糖胶囊质量薄层色谱高效液相色谱法

净糖胶囊是一种医院制剂。处方由石决明、白芷、天麻、葛根、知母、川牛膝、野菊花、杜仲、泽泻、枸杞、黄芪、天花粉、鸡内金、女贞子、熟地黄等15味药组成，具有疏肝滋阴润燥，清热除烦解渴等功效，用于降低血糖，治疗糖尿病，减少并发症。为了保证该制剂的临床疗效，有效控制其质量，采用TLC法对方中知母、白芷、枸杞子和女贞子进行定性鉴别，采用HPLC对方中葛根进行含量测定研究，建立了该制剂的质量方法。

1仪器与试药

Waters高效液相色谱仪（Water515HPLC泵，2487双道紫外检测器，N3000色谱工作站）、KromasilC18柱(4.6mm×250mm，5µm)；METTLERTOLEDOEL204-IC电子分析天平；KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；知母对照药材（批号：121070-200804）、白芷对照药材（批号：120945-201008）、枸杞子对照药材(批号:121035-200902)、女贞子对照药材(批号：121041-200802）、葛根素对照品(批号：110752—200511)(中国药品生物制品检定所)；高效液相中使用的甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2薄层色谱鉴别

2.1知母的薄层色谱鉴别取本品内容物4g，研细，加乙醇40ml，加热回流40分钟，滤过，滤液加盐酸1ml，加热回流1小时，浓缩至约5ml，加苯20ml振摇提取，提取液蒸干，残渣加乙醇2ml溶解，作为供试品溶液。取对照药材2g，同法制备对照药材溶液。另取缺知母的阴性样品4g，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照TLC法试验，吸取上述溶液各5µl，点于硅胶G薄层板上，以环已烷-醋酸乙酯(3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛无水乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2白芷的薄层色谱鉴别取本品内容物6g，加氯仿20ml，超声处理40min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取白芷对照药材0.5g，同法制备对照药材溶液。取缺白芷的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照TLC法试验，吸取上述溶液各5µl，点于硅胶G薄层板上，以石油醚（30-60℃）-乙醚(3:2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.3女贞子的薄层色谱鉴别取本品内容物5g，加甲醇60ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇-三氯甲烷（3:2）混合液1ml溶解，作为供试品溶液。取女贞子对照药材，同法制备对照药材溶液。取缺女贞子的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照TLC法试验，吸取上述溶液各5µl，点于硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（6:4:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.4枸杞子的薄层色谱鉴别取本品内容物2g，加入10%硫酸溶液40ml，回流1h，放冷，乙酸乙酯20ml萃取，取乙酸乙酯层，水浴蒸干，加乙酸乙酯1ml溶解残渣，作为供试品溶液。再取枸杞子对照药材0.5g，同法制备对照药材溶液。另取缺枸杞子的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。照TLC法试验，吸取上述溶液各5µl，点于硅胶G薄层板上，以环已烷-丙酮-乙酸乙酯（5:2:2.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3葛根素的含量测定

3.1色谱条件色谱柱：KromasiLC18柱(4.6mm×250mm，5µm)；流动相：甲醇∶水（28∶72）（V：V）；检测波长：250nm；流速：1.0ml／min；柱温：室温；理论板数按葛根素峰计应不低于4000。

3.2对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品10mg，置于50ml容量瓶中，加30%乙醇稀释至刻度，配成200µg/ml的溶液，再取1ml，置于10ml容量瓶中，配成20µg/ml的溶液，作为对照品溶液。

3.3供试品溶液的制备取本品重量差异检查项下的内容物适量，研细，取0.5g，精密称定，加30％乙醇25ml，称定重量，超声处理30min，放冷，称重，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品。另取葛根的阴性样品，研细，取0.5g，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

3.4干扰性试验取对照品溶液、供试品溶液和缺葛根的阴性溶液、各进样20µl，进行分析，结果葛根素峰与杂质峰完全分离，而阴性对照在相同的位置上无色谱峰。

3.5线性关系考察实验结果表明，葛根素在0.1000～0.4000µg的范围内呈良好的线性关系。

3.6精密度试验实验结果表明精密度良好。

3.7重复性试验实验结果葛根素的RSD为1.6％。

3.8稳定性试验结果表明供试品溶液在室温下12h内稳定性良好。

3.9加样回收率试验实验结果葛根素平均回收率为98.12％，RSD为1.4％。

3.10样品测定按含量测定方法对样品进行含量测定测定，结果见表1。

表1净糖胶囊葛根素含量测定结果

批号葛根素含量（mg/粒）

10.2470

20.2492

30.2502

4讨论

制备供试品溶液时，比较了回流提取法、连续回流提取法和超声提取法的效果，结果以超声提取法为佳，超声提取时间以30min为宜。

葛根素的含量测定方法，参考了中国药典成方制剂中葛根素的含量测定方法，经多次实验，将甲醇与水的比例调整为28:72，出峰时间提前，分离度大于1.5显著，且阴性对照无干扰，重现性良好。

采用本方法进行4味药材的薄层鉴别，薄层图谱清晰，重现性好，且阴性对照无干扰，专属性强，故对本品质量控制，保证质量稳定，具有实际意义。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年一部[M].北京:化学工业出版社，2010:209.

[2]林明越.高效液相色谱法测定养阴降糖胶囊中葛根素的含量[J].药品鉴定，2010，4:43-45.