液基薄层细胞制片技术对检测脑脊液脱落细胞学的应用

韩冬

（抚顺市中心医院辽宁抚顺113006）

【摘要】目的探讨液基薄层细胞制片技术在脑脊液脱落细胞学检查中的应用。方法用传统涂片和TCT制片同时对172例脑脊液脱落细胞学检查送检标本进行制片，比较两种方法对癌细胞阳性的检出率，并观察其病理结果。结果TCT制片对脑脊液脱落细胞学癌细胞阳性检出率高于传统涂片，差异有统计学意义（P＜0.05）。传统涂片细胞量极少，核仁不明显，着色较深，存在细胞变形现象；TCT制片细胞形态饱满，细胞核呈圆形、椭圆形，核膜清晰且光滑，染色质均细，着色浅，可见细小的核仁。细胞质在两种涂片未见明显区别。结论TCT制片技术对脑脊液脱落细胞学癌细胞阳性检出率及诊断准确率高，漏诊率低。

【关键词】液基薄层细胞制片技术脑脊液病理学脱落细胞

【中图分类号】R741.04【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）05-0058-02

Theapplicationofthin-layercytologicaltestintheexaminationofcerebrospinalfluid

【Abstract】Purpose:TodiscusstheapplicationofThin-layercytologicaltest(TCT)intheexaminationofcerebrospinalfluid.Method:172casesofexfoliativecytologicalspecimensofcerebrospinalfluidwereexaminedbytraditionalsmearmethodandTCTmethodtocomparethepositivedetectionratesofcancercellandobservethepathologicalresults.Results:thepositivedetectionratesbyTCTweresignificantlyhigherthanthosebytraditionalsmearforbothcerebrospinalfluidspecimens(P＜0.05).Inthetraditionalsmear,veryfewcellswereobservedwithlessclearkaryosome,strongstainingandcytomorphosis;intheTCTsmear,cellsremainedintactwithcircularorellipticcellnucleus；definednuclearmembraneevenlydistributedchromatinandeasilyobservedleptoskaryosomes.Therewasnosignificantdifferenceincytoplasmbetweenthesetwomethods.Conclusion:TCTsmearcanincreasetheaccuracyofdetectionrateofexfoliativecellsinCerebrospinalFluidsamplesandreducethechanceoffalsenegativediagnosis.

【Keywords】Thin-layerCytologicalTest(TCT)CerebrospinalFluidPathologyExfoliatedCell

近年来，液基薄层细胞学检测在非妇科方面开始推广使用[1]，但在脑脊液脱落细胞学检测中的应用的相关文献相对较少。脑脊液脱落细胞学检查是临床诊断的重要手段，我们对172例脑脊液标本脱落细胞学同时做了传统涂片染色和TCT制片染色，分析两种方法对肿瘤细胞的检出率，现报告如下。

1材料与方法

1.1材料标本源于我院2011年1月-2013年6月，送检到本科的脑脊液脱落细胞学检查标本172例。

1.2方法

1.2.1传统涂片：将送检表标本立刻置于离心管中，离心5min(2000r/min)沉淀，弃去上清液，留沉淀物吸取至载玻片上，均匀涂片2张，干燥后用95%乙醇固定10-15min，HE染色，镜检。

1.2.2TCT制片：将抽取的标本注入LBPSystem专用150ml取样瓶内，将样本分装成两支50ml离心管，600G，10分钟。上清液弃之，振荡，加入2-5mlLBPSYSTEM?专用细胞保存液，固定30分钟；混匀后；转移至12ml离心管内；600G，10分钟，弃上清液，振荡，加入2—5ml缓冲液，（清洗细胞作用），离心，600g程序离心（约为1800转/分钟），5分钟，弃上清液，震荡，静置10分钟，将涂好细胞粘附剂的玻片放置在制片染色板上，并扣上制片染色舱。使用LBPSYSTEM液基细胞沉降式自动制片染色系统。

1.3细胞学诊断：所有细胞标本制片均由同一位病理医生诊断。细胞学诊断标准参照《诊断细胞病理学》[2]

1.4统计学方法：采用SPSS17.0统计软件处理，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，p＜0.05为检验水准。

2结果

2.1诊断结果

传统涂片：查见癌细胞10例（5.82%），可疑癌细胞26例（15.12%），未查见癌细胞136例（79.06%）。

TCT制片：查见癌细胞18例（10.47%），可疑癌细胞7例（4.07%），未查见癌细胞147例（85.46%）。TCT制片对脑脊液脱落细胞学癌细胞阳性检出率高于传统涂片，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2镜下观察结果传统涂片细胞量极少，夹杂着炎性细胞和细胞碎片，核仁不明显、着色较深，存在细胞变形现象。TCT制片背景中细胞量丰富、炎性细胞和细胞碎片较少，细胞分布均匀，重叠现象较少，细胞形态保存完好，不满意标本制片数量少，细胞形态饱满。良性细胞呈一致性，细胞核呈圆形、椭圆形，核膜清晰且光滑，染色质匀细，着色浅可见细小的核仁。恶性细胞大小不一，核/质比增大，细胞核形态多样，其核膜凸凹不平，核膜厚，染色质粗，集结呈粗粒状团块状，并见明显的核仁。细胞质在两种涂片未见明显区别。

3讨论

TCT检测是近年发展起来的一项制片新技术。目前，TCT技术除了用于妇科标本外，正逐步扩展到非妇科细胞学检测的各个领域[3]，如脑脊液脱落细胞学[4-5]。

我们应用TCT技术对脑脊液脱落细胞学进行检测，并与传统涂片比较，结果显示，TCT制片阳性检出率高于传统涂片。TCT制片过程中细胞采集量丰富，能够收集到更多有价值的细胞且分布均匀、形态保存完好，避免了传统涂片制作过程中由于细胞过度干燥造成的假象，很好地保护了细胞原有的形态，各种干扰明显少于传统涂片，尤其是对肿瘤细胞的干扰及挤压。阅片时对肿瘤细胞的识别更加准确，分析原因为TCT保存液、清洁液可使粘液与细胞分离，避免阳性细胞堆积和丢失，同时可去除组织碎片、粘液、血细胞、杂质，能够保留全部有诊断价值的细胞成分及其完好的形态[5-6]。

液基薄层细胞学检出癌细胞与组织学对照准确率100%，结合临床检出率仍存在差异，原因是液体中没有恶性细胞脱落或是取制片液中没有脱落的恶性细胞，所以怀疑有恶病质者应多次送检标本或在一份标本中多次离心集中沉淀物制成薄片。液基薄层制片技术可提高异常细胞检出率是脱落癌细胞检查的可靠手段，它虽然克服了传统涂片制片中细胞数量不易控制，涂片厚薄不均，细胞易重叠，背景杂乱以及阅片费时等缺点，但液基薄层制片成本高、操作费时，制片过程易使细胞群分散。所以在日常工作中，液基薄片与传统涂片的应用视情况互为补充，有助于肿瘤细胞的检出及相关疾病的诊断[7]。

总之，TCT检测细胞基液能够将细胞完美粘附包裹，保持细胞的鲜活性，并使细胞均匀悬浮，保证标本的随机性和代表性。制片时，靠细胞的表面张力均匀分布。从制片质量来看，TCT技术优于传统涂片技术，癌细胞形态相对清晰，易辨认，且TCT制片细胞采集量丰富，厚度均匀，饱满。对脑脊液的阳性检出率高，诊断准确率高，漏诊率低，值得推广应用。

参考文献

[1]马博文，杨凡.液基薄层细胞制片技术在非妇科标本中的应用[J]。诊断病理学杂志，2010,17（1）：63-66.

[2]马正中.诊断细胞病理学[M].郑州：河南科学技术出版社，2000：218-266.

[3]张进生，梁渊，安红雷，等.尿液标本液基细胞薄层涂片检查在膀胱癌诊断中的应用[J].北京医学，2011,33（7）：563-565.

[4]PiatonE,FaynelJ,HutinK.Conventionalliquid-basedtechniquesversuscytycthinperppricessingofurinarysamples:aqualitativeapproach[J].BMCClinPatho,2005,5(1):9-16.

[5]杨普，陈琛.“脑脊液”液基细胞学检查在中枢神经系统疾病诊断中的应用价值[J].中国实用神经疾病杂志，2009,12（16）：29-30.

[6]叶见波，朱有凯，周祥祯，等.尿液液基细胞学与传统细胞学对膀胱癌诊断价值的比较[J].现代肿瘤医学，2010,18（11）：2209-2211.

[7]LEOPOLDG.KOSS,MYRONR.MELAMED,KOSSDIAGNOSTICCYTOLOGYANDITSHISTOPATHOLOGICBASES.西安：世界图书出版社，2009:1067-1088.