全自动尿沉渣分析仪检查的临床应用

毕晓梅(黑龙江省康复医院150018)

尿液沉渣检测是对尿液离心沉淀物中有形成分用显微镜或尿沉渣分析仪进行定性、定量鉴定的检测。尿沉渣检查是检查尿液有形成分的实验方法，可以识别尿液中细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成分，辅助对泌尿系统疾病作出诊断、定位、鉴别诊断及预后判断的重要常规试验项目。

随着科学技术的发展，为了适应尿沉渣分析标准化的要求，UF-100全自动尿沉渣分析仪在临床检验中的应用越来越广泛，传统的尿沉渣手工显微镜检查方法不仅工作强度大，易污染环境，而且重复性偏差大，测量结果不精确，无法实现定标定量检测。不经过染色的尿有型成分检测，极易发生误诊、漏诊现象，样品的阳性检出率低。尿沉渣分析仪实现了检测自动化、标准化，使其结果具有了可比性。

1UF-100尿沉渣分析仪的工作原理

UF-100尿沉渣分析仪采用流式分析技术，配合快速荧光染色技术和电阻探测技术，达到直接检测和计数尿中有形成分的目的。尿液流经仪器管路时，其有形成分中的细胞核和细胞膜被复合快速荧光染色剂染色后，在鞘流液的作用下依次进入流动分析池的中心轴线。氩离子激光器以488nm波长透射流动池，对流经光路的每一颗粒进行散射光、荧光及脉冲时间分析。经过计算机对颗粒前向散射光波形、前向荧光波形和电阻抗值的大小综合分析，得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘制出直方图和散点图，实现对尿中有形成分的分类和计数。

2尿沉渣的检测

标本来源，经尿干化学法测定尿红细胞、尿白细胞及尿蛋白阳性的各类病人，取可疑患者清洁中段尿10ml置带盖的无菌试管中，立即送检。在UF-100全自动尿沉渣分析仪上测定，记录实验结果，所有检验在留取尿液后1h内完成。

工作前先作仪器的每日质控，数据正常时开始检测。将进样针插入含充分混匀样品的试管，按进样开头，仪器自动吸取800μl样品，分析各种参数，记录分析数据。

2.1红细胞红细胞出现在第一和第二个散射图的左角。红细胞在尿液标本中大小不均，且部分溶解成小红细胞碎片，因此红细胞前向散射光强度(Fsc)差异较大。参考值为男0～12／μl，女0～24／μl，离心后为0～偶见／HPF。每高倍视野见到3个以上的红细胞为异常现象。红细胞可提示肾脏和系统性的多种疾病，包括肾外伤，也可见于剧烈运动后。红细胞可见于外伤性的导尿后、结石的通过、或月经的污染。血尿可见于肾孟肾炎、肾结石、肾肿瘤和泌尿道的其他恶变、也可见于出血性疾病。

2.2白细胞白细胞比红细胞稍大，前向散射光强度也比红细胞稍大一些，但白细胞含有细胞核而红细胞无细胞核，因此它有高强度的前向荧光，能将白细胞与红细胞区别开来，白细胞出现在散射图的正中央。当白细胞存活时，白细胞会呈现前向散射光强和前向荧光弱；当白细胞受损害或死亡时，会呈现前向散射光弱和前向荧光强的变化。参考值为男0～12／μl，女0～26／μl。相关参数，平均白细胞前向散射光强度(WBC-MFL)。肾移植病人的尿沉渣中见到大量的单个核细胞可提示早期组织排斥现象。

2.3上皮细胞(EC)上皮细胞体积大，散射光强，且都含有细胞核、线粒体等，荧光强度也比较强。大的鳞状上皮和移形上皮细胞分布在第二散射图的右角，其散射光强，荧光也强。正常尿液中可见少量的鳞状上皮细胞和移形上皮细胞，每微升小圆上皮细胞数。它包括肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。这类细胞的细胞数到达一定浓度时，还须通过离心染色镜检才能得出准确的结果。大量的肾上皮细胞可提示活动性的肾小管变性。这些细胞常见于急性坏死和肾乳头炎坏死期病人尿沉渣中。鳞状上皮细胞常见于正常尿液中。

2.4管型透明管型由于管型体积大和无内含物，有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光脉冲宽度，出现在第二个散射图的中下区域，因为透明管型内容物中无DNA物质，所以透明管型在仪器上只有FSC、无FI。管型常见于肾小球远曲小管中形成，也可在下行Henle环或集合管中形成。白细胞管型可见于急性肾小球肾炎、肾综合症或肾盂肾炎的患者尿液中。

2.5细菌细菌由于体积小并含有DNA和RNA，所以前向散射光强度要比红、白细胞弱，但荧光强度要比红细胞强，又比白细胞弱。因此细菌分布在第一个散射图红细胞和白细胞之间的下方区域。主要用于诊断泌尿系细菌感染。正常尿液中无细菌存在。标本中大量细菌的存在提示泌尿道感染。标本中白细胞的存在有助于对污染与感染的区分。

2.6酵母细胞与精子酵母细胞和精子细胞由于含有RNA和DNA，荧光强度很高，繁殖过程中的酵母细胞和精原细胞荧光强度更强，这些细胞散射光强度与红、白细胞差不多，所以酵母细胞散射图分布在红、白细胞之间的区域。由于酵母细胞的前向散射光脉冲宽度小于精子细胞的前向散射光脉冲宽度，根据前向散射光脉冲宽度，可将酵母细胞和精子细胞区别开来。但在低浓度时，精子细胞与酵母细胞区分有一定的难度。在高浓度时，部分酵母细胞对红细胞计数有交叉作用。酵母菌细胞（白色念珠菌）可提示尿道念珠菌感染，特别是见于糖尿病患者。真菌还常见于女性阴道念珠菌感染者的被污染的尿液中，精虫常见于射精和性交后尿液中。

2.7结晶结晶出现在散射图红细胞区域，由于结晶的多样性，所以其散射光强度分布很宽，尿酸盐依靠自己的荧光，其分布区域和红细胞重叠在一起，因结晶的中心分布不稳定，所以它和红细胞能够被区分开。当尿酸盐浓度增多时，部分结晶会对红细胞计数产生影响。胱氨酸结晶提示胱氨酸尿液的存在。这是一种新生儿代谢性疾病，患者有胱氨酸结石在肾脏形成，尿液中、网状内皮系统、脾脏和眼睛均可发现胱氨酸结晶。尿酸结晶可呈针状、六角型、玫瑰状、“磨刀石”状或菱形板状。尿酸结晶可以是无色、黄色或棕色。它的增加是嘌呤代谢增强的结果。尿酸结晶还可见于高烧、白血病、一些肾小管疾病和痛风。

3讨论

UF-100尿沉渣分析仪是通过流式细胞术及电阻抗测定原理对尿有形成分作分析的，有流体动力、光学、电子等多个系统。尿液无需离心，标本用量少，用检测尿中常见有形成分，每一标本分析量与检测显微镜50个高倍视野相当，检测速度快，每小时可检测100个或50个尿标本，并可自动打印报告（有形成分粒子直方图、散点图等）。由于每份尿标本检测步骤模式一致，便于质量控制和标准化。吸入800μl尿液后自动加以稀释和混合，并对细胞、细菌等有形成分作特异性染色，通过加压使细胞进入充满鞘液的流室。在鞘液的约束下，细胞排成单列，经流室喷嘴喷出，形成的细胞柱与激光束垂直相交，使激活的细胞产生荧光。流式细胞入口两端电极间的恒定直流电使有形成分通过时产生与细胞大小呈正比的电阻变化。UF-100操作简便、快速，仅需70s便可生成打印的检验报告，每小时能完成100份标本检测，可使临床医生在第一时间段获得尿液检查的有关信息，UF-100检测有假阴性结果，虽可用于临床尿路感染的筛检，但不可替代定量细菌培养。

参考文献

[1]丛玉隆,王力，当代检验分析技术与临床，北京:中国科学技术出版社，2002.

[2]夏铁安，胡诩群，王清涛等，临床医学检验，济南:山东大学出版社，2004.