低离子/抗人球蛋白卡式微柱凝胶法测定O型孕妇产前血型IgG抗A（B）效价与分析

廖思红1谭玉华2袁青1覃雪玲1刘文达1刘贵连1刘

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)5-0062-03

【摘要】目的探讨低离子/抗人球蛋白（LISS/Coombs）卡式微柱凝胶法（MGT）测定O型孕妇产前血型IgG抗A（B）效价的临床意义。方法采用卡式MGT对配偶血型为非O型Rh(D)阳性的1154例O型Rh(D)阳性孕妇，进行产前血型IgG抗A（B）效价测定，并进行跟踪观察。结果1154例孕妇中，血型IgG抗A（B）效价测定≥1：64者占72.36%（835/1154），其中母-婴血型O/AB(抗A)组、O/A组、O/B组和O/AB(抗B)组的IgG抗A（B）效价的阳性率分别为80.90%、72.48%、66.45%和65.73%，阳性率O/AB(抗A)组＞O/A组＞O/B组（P＜0.05），O/AB(抗A)组＞O/AB(抗B)组（P＜0.05）；25例发生溶血的新生儿母亲的血型IgG抗A（B）效价，产前最后一次测定效价均≥1：256。结论卡式MGT动态检测O型孕妇产前血型IgG抗A（B）抗体效价，对预防新生儿母婴血型不合引起的溶血病有指导意义。

【关键词】微柱凝胶血型抗体效价新生儿溶血病

Determinationofthetiterofanti-AandBIgGinthepregnantwomen’sbloodbyID-card“LISS/Coombs”microcolunmgeltechnologyandevaluationoftheclinicalsignificance

【Abstract】ObjectiveToevaluatedtheclinicalsignificanceofdetectingthetiterofanti-AandBIgGinthepregnantwomen’sbloodbyID-card“LISS/Coombs”microcolunmgeltechnology（MGT）.Methods1154pregnantswiththeRh(D+)andObloodwhosehusbandswiththeRh(D+)andtheotherbloodgroupexpectOwerechoosedandthetitersofserumanti-A(B)IgGweremeasuredbyMGT.ThedetectionresultwasusedtotheABOHDNprobabilityofnewborn．Results80.90%,72.48%,66.45%and65.73%ofthesubjectsparticipatingthisstudyhavethetiterofanti-AandBIgGhigherthan1：64intheO/AB(anti-A)group,O/Agroup,O/BgroupandtheO/AB(anti-B)group,respectively,andtheabnormalrateofanti-A(B)IgGofO/AB(anti-A)group>O/Agroup>O/Bgroup(P<0.05),O/AB(anti-A)group>O/AB(anti-B)group(P<0.05);25casesnewbornscontractedhemolysis,theirmothersbloodgroupIgGanti-A(B)antibodytiterswerehigherthan1:256.ConclusionTheMGTisanefectivemethodtopredictHDNcausedbymaternal-fetalbloodgroupincompatibility.

【Keywords】MicrocolumngelBloodgroupTiterofanti-A(B)IgGHemolyticdiseaseofnewborn

当胎儿从父亲方面遗传来的红细胞抗原恰为母亲所缺乏时，称母婴血型不合，母婴血型不合可以引起胎儿或新生儿免疫性溶血病，严重影响了我国出生人口素质，其中以ABO血型不合导致的新生儿溶血病（hemolyticdiseaseofnewborn,HDN）最常见[1-3]，且ABOHDN患儿的母亲多数为O型血，其次为Rh血型系统。笔者利用新技术低离子/抗人球蛋白（LISS/Coombs）卡式微柱凝胶法(microcolunmgeltechnology,MGT），对1154例产前检查的O型孕妇，进行了血型IgG抗A（B）抗体效价的测定，并对其进行跟踪观察，现总结报道于下。

资料与方法

1.一般资料

2008年～2009年间，在本院输血科进行产前血清IgG抗A（B）抗体效价测定的O型Rh(D)阳性孕妇（配偶血型为非O型）1154例，年龄18～44岁，平均年龄28岁。

2.试剂与仪器

MicroTypingSystemLiss/Coombs卡、ID-Diluent2稀释液、ID-Incubator37SⅠ孵育器和ID-Centrifuge12SⅡ离心机（瑞士达亚美公司）。

3.方法与参考值

孕妇与其丈夫的血型筛查及孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的测定，采用达亚美卡式检测，严格按试剂盒说明书操作。孕妇血清中抗A或抗B抗体效价≥1：64，判读为阳性[3]。

4.统计学方法

率的比较采用率的μ检验，检验水准α=0.05，P＜0.05表明差异具有统计学意义。

结果

1.O型孕妇Rh(D)及其丈夫血型测定

经LISS/Coombs卡式微柱凝胶法血型检测，1154例O型孕妇及其丈夫的Rh(D)血型结果均为阳性，丈夫A血型者505例（占43.76%，505/1154），B血型者471例（占40.81%，471/1154），AB血型者178例（占15.42%，505/1154）。

2.孕妇血型抗体效价测定

1154例O型Rh(D)阳性孕妇中，血型抗体阳性者835例，阳性率为72.36%（835/1154）；其中，母-婴血型O/A组366例，阳性率为72.48%（366/505）；O/B组313例，阳性率为66.45%（313/471）；O/AB(抗A或抗B)组156例，阳性率为87.64%（156/178）；O/AB(抗A)组144例，阳性率为80.90%（144/178）；O/AB(抗B)组117例，阳性率为65.73%（117/178）。O/AB(抗A)组、O/A组和O/B组间血型抗体阳性率组间差异有统计学意义（μ=2.08～3.61,P＜0.05）；O/AB(抗A)组与O/AB(抗B)组间≥64者百分率差异有统计学意义（μ=3.23,P＜0.05）。抗A效价阳性率为74.67%（510/683），抗B效价阳性率66.26%（430/649），高于传统试管法检测的文献报道[3]。结果详见表1。

表11154例O型Rh(D)阳性孕妇中血型抗体测定效价及其分布情况（例）

3.孕妇血型效价与新生儿溶血的关系

经跟踪统计，25例新生儿（单胎）患HDN，患者男15例，女10例，出生年龄1～5d，平均2.9d。其中，O/A组10例，O/B组7例，O/AB组8例；在25例HDN患儿孕妇中，产前最后一次血型抗体效价测定均≥1：256。

讨论

Liss/Coombs卡式MGT，是近来逐渐兴起的一项免疫检测新方法，是免疫学抗原抗体反应相结合的产物，1986年法国Dr.YvesLapierre首先发明此方法，1994年此项技术获得了美国FDA的认可[4]。卡式MGT的基本原理是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合，通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小,使其间隙只能允许游离的RBC通过，从而使游离RBC与聚集RBC分离,如果通过离心RBC沉积在凝胶管底部，则表明RBC未发生凝聚，是阴性反应，若RBC聚集在凝胶带上部或凝胶中，则表明RBC发生凝集，呈阳性反应。由于操作简单、重复性好、灵敏度高、结果易于判断以及做Coombs试验时红细胞不需洗涤等优点，已在国内广泛用于不完全抗体筛查、抗体鉴定、交叉配血和血型鉴定和直接Coombs测试[5]。

胎儿红细胞对母亲来说，是一种外来抗原，当它通过胎盘进入母体后，可以刺激母体产生相应的免疫抗体。这些抗体有可能通过胎盘进入体内，与胎儿红细胞起反应，从而使胎儿红细胞遭到破坏而出现新生儿黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大等溶血病的症状和并发症，甚至死胎、新生儿死亡等[6]。O型孕妇的血型天然抗体中有抗A（B）的IgG，IgG类抗体是唯一能通过胎盘进入胎儿体内的免疫球蛋白，如果母婴血型不合，则相应的IgG型血型特异性抗体在妊娠的大部分过程中和新生儿期间都能产生有害作用，应用科学有效的方法检测孕产妇血清IgG抗A(B)效价是预防新生儿溶血病的重要措施。O型孕妇血型IgG抗A(B)测定对预防新生儿溶血病有重要意义[7],本研究中,72.36%的O型孕妇血型抗体效价呈阳性，学者认为当母亲血清中IgG抗A(B)效价≥1：64时,婴儿有受害的机会,当效价≥1：128时,新生儿很可能受害[8]。

本研究O型孕妇血型抗体效价测定结果显示，血型IgG抗A(B)效价阳性率，妻/夫血型O/AB(抗A)组＞O/A组＞O/B组（P＜0.05），O/AB(抗A)组＞O/AB(抗B)组（P＜0.05），与文献[9]报道基本一致。这与A抗原的抗原性比B抗原的抗原性强有一定关系，但具体原因尚待研究。采用MGT检测抗A或抗B的效价阳性率高于文献报道[3]的传统试管法检测，说明MGT较传统试管法的检测灵敏度高，与李建新和邹原[9]报道一致。

夫妇血型不合的孕妇血清抗体效价与新生儿HDN发生率相关，但并不完全一致[10]。其原因与血型IgG抗A(B)进入胎儿后，可被胎儿体内的血型物质中和，胎儿红细胞上的A或B抗原位点少，抗原性弱，且不同个体间的抗体对抗原亲和性不同及溶血程度还取决于IgG抗体的亚型有关[10]。在本研究中，25例HDN患儿O/A组10例，O/B组7例，O/AB组8例，产前最后一次血型抗体效价测定均≥1：256。故在实际工作中，应建议ABO血型不容的孕妇进行血型抗体动态监测，并应加强跟踪观察和综合分析，结合分析结果应采取适当的预防和治疗措施，以降低HDN的发生。

参考文献

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