邻苯二甲酸二甲酯对果蝇生殖力影响的研究

王坤，郭晓农，马心怡，田立，董飞

【摘要】目的：研究邻苯二甲酸二甲酯(dimethylphthalate，DMP)对果蝇生殖能力的影响。方法：通过将未交配雌雄果蝇随机配对分为4组，分别给予不同浓度的DMP培养基喂饲来推测DMP对果蝇生殖能力的影响。结果：，随着DMP浓度的升高，果蝇的子一代数目逐渐降低。结论：DMP会对性成熟的果蝇的生殖能力产生一定的损害。

【关键词】DMP；生殖力；果蝇

邻苯二甲酸二甲酯(dimethylphthalate，简称：DMP)是邻苯二甲酸酯类的一种。历曙光[1]等人的研究表明，酞酸酯类对黑腹果蝇具有一定的毒性作用，而对人类则会产生一些潜在危害。同样，在对邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和邻苯二甲酸二辛酯（DEHP）的研究上，表明其会抑制生精过程及附睾等附属性腺的发育。在对乌鳢的代谢动力学和残留研究就表明，DMP在其体内的吸收和分布较快,而消除却是比较缓慢的。本研究以果蝇为实验动物，通过观察DMP对雌雄果蝇交配能力和生存、生殖能力的影响及其遗传毒性，为深入研究DMP生殖毒性的作用机制提供一些有价值的参考。

4.材料与设备

1.1实验动物

野生型Canton-S果蝇：中国科学院上海生命科学研究院生化细胞所果蝇资源与技术平台吴薇老师馈赠。

1.2材料与试剂

1.2.1主要试剂

邻苯二甲酸二甲酯（分析纯），丙酸（分析纯），乙醚（分析纯），玉米粉，琼脂粉，酵母粉

1.2.2仪器与设备

LDZX-75KBS型立式压力蒸汽灭菌锅，上海申安医疗器械厂；DHJ-724IA型恒温培养箱，上海一恒科技有限公司；SW-CT-ICU型超净工作台，上海博迅实业有限公司医疗设备厂。

2.方法

2.1果蝇培养基的制备

按所参考文献配制果蝇培养基，最后加入DMP溶液并搅拌均匀后分装入各平行组的锥形瓶中，最终制成分别含DMP浓度为0%、0.3%、0.9%、和2.7%的培养基。

2.2果蝇分组及培养

选择野生型Canton-S果蝇进行扩增培养，有幼蝇羽化，立即转出进行雌雄鉴别后，随机配对分别放入不同浓度的4种培养基中，每种浓度设置6个平行组，进行培养，有三龄幼虫出现后，处死母本成蝇，留下幼虫，继续培养观察。

2.3幼虫的观察

每日定时观察幼虫的成长状况，并做相应的记录。当幼虫成蛹羽化时更要密切观察，并及时转移。

2.4子代数目统计

将幼虫羽化成蝇转出并用乙醚麻醉法麻醉成蝇，之后统计子代的蛹数、雌雄数量及总数量。

3.结果与分析

3.1DMP对果蝇子一代羽化的影响

图1不同浓度DMP对果蝇子一代羽化的影响

如图1所示，随着DMP浓度的升高果蝇的子代数目是逐渐下降的，在DMP达到最高浓度时，果蝇的数量降到最低值。

3.2DMP对果蝇羽化率的影响

图2不同浓度DMP对果蝇羽化率的影响

如图2所示，随DMP浓度的升高，果蝇子一代的羽化率逐渐降低，在最高浓度时降到最低，可看出浓度越高影响越大。

3.3DMP对果蝇生殖力的影响

表1DMP对果蝇生殖力的影响

注：与空白对照组相比，*有显著差异（P<0.05）；**有极显著差异（P<0.01）。

如表1所示，与空白组相比较，可看出DMP浓度增高会影响果蝇的羽化及子代果蝇的数量，随DMP的浓度增加果蝇的羽化程度也相应的减弱。

4.讨论

本次研究结果发现，随着DMP浓度的升高，果蝇的生殖能力是持续降低的，尤其是高浓度组明显低于空白组，且交配潜伏期相对延长，交配持续时间逐渐缩短，这表明DMP对果蝇的生殖能力有一定的抑制作用。

本研究结果显示，DMP浓度的增加会降低果蝇的生存以及生殖能力，从模式生物果蝇的水平上证明了DMP的生殖毒性作用。

参考文献

[1]厉曙光,杨科峰，赵文红等.酞酸脂类增塑剂对果蝇寿命的影响[J].毒理学杂志.2016,01:40-41

[2]张蕴晖,陈秉衡,丁训诚等.邻苯二甲酸二丁酯宫内和哺乳期染毒对F1代雄性大鼠的生殖发育毒性[J].卫生研究.2004,01：9-14

[3]张蕴晖,蒋学之,陈秉衡.邻苯二甲酸二丁酯对F1代仔鼠睾丸损害的可逆性恢复特性[J].中华预防医学杂志.2004,38(6):388-391

[4]宋晓峰，魏光辉等.邻苯二二(2-乙基)己酯对胚胎及新生小鼠睾丸Leydig细胞INSL3mRNA表达的影响[J].第四军医大学报.2006,27(21):1973-1976