梅毒螺旋体抗体批量标本检测方法合理应用分析

申静朱俊

【摘要】目的通过对梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）三种检测方法在梅毒检测中比较，建立实验室对于批量标本合理的检测方法应用，以更好的辅助临床诊断治疗和传染病的监测报告。方法选择我院一段时间内的893份术前检查的病人血清样本，用三种方法分别检测。结果TPPA的阳性检出率%，ELISA的阳性检出率%，TRUST的阳性检出率%。以TPPA为金标准，ELISA与TPPA的阳性符合率94.5%，TRUST与TPPA的阳性符合率80.5%。结论TP-ELISA是梅毒螺旋体抗体批量标本的较为合理的初筛检测方法，对于ELISA初筛检测阳性的标本，再同时做TPPA的检测和TRUST的滴度试验。但确诊是否梅毒患者要结合TPPA的检测结果和TRUST的滴度试验。

【关键词】梅毒螺旋体抗体TP-ELISATPPATRUST

【中图分类号】R759.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）01-0245-01

梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性全身性疾病，是经典的性病之一。近年来其发病率有上升趋势，由于其病程长，危害大，早发现，早确诊，早治疗有着重要的意义。临床上梅毒诊断要根据临床症状和血清学方法检查，而血清筛选试验，包括针对非特异性的类脂抗体测定和特异性苍白螺旋体的亚种的抗体测定两大项[1]。对于实验室诊断而言，由于梅毒的检测方法较多，如何合理选择适合批量标本有效的梅毒螺旋体抗体的检测方法和和合理检测程序，既方便实验室的检测和结果的解释和报告，避免医疗纠纷，又能协助临床诊断和治疗，减少误诊，预防梅毒经血传播都是十分重要的。

1.材料与方法

1.1对象收集我院门诊及术前检查标本893例，不分年龄及性别。

1.2试剂与方法梅毒ELISA方法实验用北京华大吉比爱公司生产的试剂，用芬兰-雷勃MK3酶标仪450/630nm双波长检测读数，根据样品S/CO自动判读结果；TPPA试验用日本富士TPPA试剂，1:80以上判为阳性；TRUST实验试剂由上海荣盛公司生产，TRUST滴度1:2以上；试剂均在有效期内，实验严格按照试剂说明书规范操作。

2.结果

893份样本三种方法检测结果

方法TPPATRUSTELISA

阳性数887592

检出率9.85%8.39%10.3%

TRUST与TPPA的符合率85.2%，TRUST与ELISA的符合率81.5%；

ELISA与TPPA的符合率95.6%。

3.讨论

对于临床来说，梅毒血清学实验在梅毒诊断中起重要的作用。机体感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗3-9个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现。感染梅毒四周左右产生的IgG型抗体，即使经足量的抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间IgG抗体仍存在，甚至终身在血清中可测出。反应素是一种具有抗体性质的物质，是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出得一种抗原性的磷脂刺激机体所产生的抗体，一般在感染后5-7周产生，未经治疗的梅毒患者血清中反应素可长期存在。经正规治疗后可逐渐减少，直至消失[2]。TRUST是检测梅毒非特异性反应素，是采用活化的磷脂胆固醇配制VDRL抗原重悬于含甲苯胺红特制溶液中与梅毒患者血清中反应素发生粉红色凝集而检测出梅毒。对一期梅毒抗体检出敏感性低，TRUST检测与病程有关。当感染者接受治疗后或疾病处于非活动期时，抗体水平迅速降低或消失，对三期梅毒和治疗后梅毒检出率低，此外TRUST受多种疾病如自身免疫性疾病、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、急性感染病毒等影响，有时会出现生物学的假阳性。由于过体过量前带现象而出现假阴性。易造成漏检和误诊，因此TRUST做初筛不合适，但是其试剂价格低廉，操作简便，方便测定抗体滴度，且滴度变化与抗梅毒的治疗呈正相关，所以只适用梅毒疗效观察或随访有否复发的或再感染的指标[3]。

TPPA的原理与TPHA基本相同，它以人工合成的惰性明胶颗粒代替TPHA试验的红细胞为载体，检测血清中的梅毒特异性抗体，灵敏度好，特异性好，试剂稳定，批间差小，单人份检测，不需特殊设备，是目前公认的梅毒血清确认试验，检测结果不随病情发展和治疗而变化，不易出现假阳性反应，但是其结果靠肉眼判别，无法保存原始数据，且试剂的价格相对较贵，操作复杂，且对操作人员的水平要求也较高，检测时需将样本做系列稀释，不利于大批量标本的筛查，也不能用于疗效判断。

ELISA是利用基因重组工程合成抗原检测血清中梅毒特异性抗体与TPPA的检测相符合程度高，TP-ELISA的试剂盒包被了重组梅毒螺旋体特异性抗原（47KD,4KD,15KD）同时检测IgG，IgM抗体，可缩短梅毒抗体的窗口期[4]其敏感性和特异性较高，价格较低，操作方便，较其他方法更科学，可实现操作的自动化，客观化，实验原始数据易于保存，可避免医疗纠纷。TP-ELISA的主要缺点是检测梅毒混合型IgG和IgM抗体，IgG抗体在梅毒治愈后很长时间仍然阳性，甚至终身阳性，因此阳性只能说明正在感染或曾经感染过，不能判断梅毒活动与否，不能作为疗效检测的方法。

综上所述，认为对于梅毒螺旋体抗体批量标本的检测实验室更为合理的检测方法应用程序是以TP-ELISA作为筛查试验，对TP-ELISA有反应的标本同时进行TPPA确认和TRUST滴度试验，然后结合病史，症状，综合分析，诊断病情，对症治疗。这样既减少人力和试剂成本，同时也能更好地减轻了患者的治疗负担。

参考文献

[1]毕胜利.临床检验免疫学[M]北京：高等教育出版社。2007,1,39.

[2]李金明.临床酶免疫测定技术[M]北京：人民军医出版社.2005,10,220.

[3]庞妍，张志勇，赵燕玲等.三种梅毒抗体检测方法的比较[J]天津医科大学学报.2007,13（3）；442.

[4]庞妍，张志勇，赵燕玲等.三种梅毒抗体检测方法的比较[J]天津医科大学学报.2007,13（3）；442.