简介：目的：建立实时定量RT—PCR检测人转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1)的方法，对慢性肝炎肝纤维化患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)中TGF-β1mRNA进行定量检测。方法：在TGF-β1基因的外显子1和2之间设计一对引物和一条TaqMan—MGB探针；构建TGF-β1质粒克隆，以T7RNA聚合酶体外转录合成带有目的片断的cRNA作为标准品，根据10倍系列稀释cRNA标准浓度对数和其循环域值(Cyclethreshold，Ct)制作标准曲线，检测PBMC中TGF—β1mRNA含量；并对本方法进行方法学评价。结果：重组质粒测序显示插入的片断为TGF—β1mRNA特异性片断，成功的建立了实时定量RT—PCR检测TGF-β1mRNA方法，灵敏度达6．81拷贝，线性范围为6．81～6．81×10^8拷贝，且重复性好，批内、批间变异系数分别为1．28％-2．27％和2．56％-2．61％，临床应用显示，27例肝纤维化病人PBMC中TGF-β1表达量为1．20×10^8(1．80×10^7～9．80×10^7)拷贝数／10^5细胞，显著高于正常对照组3．30×10^7(7．24×10^6～5．00×10^7)拷贝数／10^5细胞(P<0．05)。结论：实时定量RT-PCR检测TGF-β1mRNA具有敏感、特异、快速、高效等特点，为TGF—β1mRNA作为肝纤维化的诊断指标提供方法学依据。

简介：目的探讨严重急性呼吸综合征患者血清SARS冠状病毒抗体IgM、IgG检测意义。方法应用ELISA法对16例SARS患者、147例发热隔离患者、23例体格检查健康者进行血清SARS抗体：lgM、IgG检测。结果12例SARS患者单份标本中入院标本7例有4例检出SARS抗体IgM阳性，出院5例有3例检出SARS抗体IgG阳性，2例重症患者血清动态结果观察到，从入院到出院的标本均同时检测到高滴度的SARSIgM、IgG；2例轻症SARS患者各只检测到一次SARS抗体IgM弱阳性；发热隔离区患者有6例从入院至出院均检测到SARS抗体IgG，其中两例滴度较高。健康体检者无一例SARS抗体阳性。结论ELISA检测SARS冠状病毒抗体IgM、IgG可作为一种辅助鉴定严重急性呼吸综合征患者的临床检测和确诊手段。

简介：

简介：目的:研究系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)抗磷脂抗体等血清免疫学标志物与患者视网膜血管病的关系.方法:从2002年6月至2003年1月,对164例SLE患者作最佳矫正视力检查、眼压测量、裂隙灯检查和眼底检查,血清免疫学检查指标包括抗心磷脂抗体(anticardiolipinantibody,ACL)、狼疮抗凝物(lupusanticoagulant,LA)、抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)和抗ds-DNA抗体等.结果:164例SLE患者中26例(16%)检查到有视网膜血管病,其中19例(73%)检测到抗磷脂抗体(17例ACL和2例LA).结论:SLE患者易发生视网膜血管病变,抗磷脂抗体的存在可能与其有较高的相关性.

简介：目的：了解革兰阴性杆菌高产I型β－内酰胺酶（AmpCs）与超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的发生率。方法：应用三维试验提取法，以头孢西丁为底物测定细菌高产AmpCs；应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的纸片扩散法表型确证试验测定ESBL。结果：381株革兰阴性杆菌AmpCs和ESBLs的发生率分别为：大肠埃希菌2．0％（2／102）、31．4％（32／102），肺炎克雷伯菌1．4％（2／142）、38．0％（54／142），阴沟肠杆菌57．4％（31／54）、66．7％（36／54），粘质沙雷菌53．8％（7／13）、61．5％（8／13），枸橼酸杆菌属37．5％（6／16）、50％（8／16），变形杆菌属7．1％（1／14）、28．6％（4／14），铜绿假单胞菌16．7％（5／30）、33．3％（10／30），不动杆菌属11．1％（1／9）、66．7％（6／9）。结论，革兰阴性杆菌均有不同程度产高产I型β－内酰胺酶（AmpCs）及超广谱β－内酰胺酶（ESBLs），对其进行监测，有助于临床合理使用抗生素。