简介:DNA聚合酶III是为DNA的复制负责的五eubacterialDNA聚合酶之一双。在DNA聚合酶III核心酶的十个子单元之中,高山哈子单元两个都为polymerizing催化反应DNA海滨。在这研究,我们提取了高山的genomic序列哈从159的子单元定序eubacterial染色体,并且执行了基于顺序的种系发生、结构的分析。我们发现所有eubacterial染色体有至少一座高山哈子单元,哪个形式homodimers或heterodimers。种系发生并且领域高山的结构的分析以及拷贝数字变化哈在每个细菌的子单元显示高山的分类哈子单元进四个基本的组:polC,dnaE1,dnaE2,和dnaE3。这个分类具有在染色体作文分析的本质。我们也巩固了命名惯例在基因注解避免进一步的混乱。
简介:铜绑定,抛锚膜的、细胞的prion蛋白质(PrPC)有二个组成的劈开地点生产不同N终端和C终端碎片(N1/C1和N2/C2)。用表示也人的PrPC,鼠标PrPC或鼠标PrPC的RK13房间带3F4epitope,这研究在endoproteolytic劈开和一个通常认为的PrPC函数上探索了PrPC主要顺序的影响,地图kinase信号transduction,响应外长的铜与或没有使不安的膜环境。PrPC主要顺序,特别在N1/C1劈开地点附近,看起来在这个地点和细胞外的调整信号的kinase1/2(ERK1/2)phosphorylation影响解朊作用的基础层次,与处理激活增加与基础ERK1/2表明一种反的关系。人的PrPC独自响应铜显示出增加的N1/C1劈开,由特定的p38和JNK/SAPKphosphorylation伴随了。到加扣押胆固醇的抗菌素filipin的铜的联合暴露导致了一只老鼠信号蛋白质phosphorylation的PrPC特定的实质的增加,由N1/C1劈开的增加伴随了。怀有人的N1/C1劈开地点的老鼠PrPC基础地并且响应铜假定更似人类的侧面并且改变了膜环境。我们的结果证明在N1/C1劈开地点附近的PrPC主要顺序影响在这个地点处理的endoproteolytic,它显得连接了基础地并且响应铜印射kinase信号transduction。进一步,主要顺序看起来响应外长的刺激在PrPC相关的信号transduction的忠实上授与N1/C1劈开和膜完整的相互的依赖。
简介:Theproinflammatorycytokinetumornecrosisfactor-α(TNF-α)regulatesimmuneresponses,inflammationandprogrammedcelldeath.TheultimatefateofacellexposedtoTNF-αisdeterminedbysignalintegrationbetweenitsdownstreameffectors,includingcaspases,IKBkianse(IKK)andc-JunN-terminalproteinkinase(JNK).However,themolecularmechanismsareincompletelyunderstood.Weinvestigatedthisissueusinggeneticandbiochemicalapproaches.WeidentifiedIKKβ,acatalyticsubunitoftheIKKcomplexthatisrequiredforNF-KBactivationandcellsurvivalinresponsetoTNF-α,wasproteolyzedbycasp-3-relatedcaspases.ThisproteolysiseliminatedIKKactivityandpromotedTNF-α,killing.Point
简介:Humantumornecrosisfactorα(hTNFα),apleiotropiccytokinewithactivitiesrangingfromhostdefensemechanismsininfectionandinjurytoseveretoxicityinsepticshockorotherrelateddiseases,isapromisingtargetfordrugscreening.UsingtheSELEX(systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment)process,weisolatedoligonucleotideligands(aptamers)withhighaffinitiesforhTNFα.Aptamerswereselectedfromastartingpoolof40randomizedsequencescomposedofabout1015RNAmolecules.RepresentativeaptamersweretruncatedtotheminimallengthwithhighaffinityforhTNFαandwerefurthermodifiedbyreplacementof2'-OHwith2'-Fand2'-NH2atallribopurinepositions.ThesemodifiedRNAaptamerswereresistanttonuclease.ThespecificityoftheseaptamersforhTNFαwasconfirmed,andtheiractivitytoinhibitthecytotoxicityofhTNFαonmouseL929cellswasdetermined.Resultsdemonstratedthatfour2'-NH2-modifiedaptamersboundtohTNFαwithhighaffinityandblockedthebindingofhTNFαtoitsreceptor,thusprotectingtheL929cellsfromthecytotoxicityofhTNFα.OligonucleotideaptamersdescribedherearepotentialtherapeuticsanddiagnosticsforhTNFc-relateddiseases.
简介:混合的系kinase(MLK3)3是被肿瘤坏死因素激活的激活mitogen的蛋白质kinasekinasekinase--伪(TNF-伪)并且明确地在TNF-伪刺激上激活c6月N终端kinase(JNK)。TNF-伪由激活MLK3的机制不被知道。TNF联系受体的因素(TRAF)是被招募到TNF受体的细胞质的结束并且调停的改编者分子,包括JNK的激活下游的发信号。这里,我们报导MLK3与TRAF2,TRAF5和TRAF6联系;然而,仅仅TRAF2能显著地导致MLK3的kinase活动。到TRAF领域并且为到它的C终端一半(氨基酸511-847)的MLK3的TRAF2地图的相互作用领域。与对方一起的内长的TRAF2和响应以一种时间依赖者方式的TNF-伪处理的MLK3伙伴。在MLK3和TRAF2之间的协会调停有绑在MLK3的TRAF2删除异种的MLK3激活和竞争以一种剂量依赖者方式稀释MLK3kinase活动,在TNF-伪处理上。而且MLK3的下游的目标,JNK被TNF-伪以一种TRAF2依赖的方式激活。因此,我们在TRAF2和MLK3之间的直接相互作用为TNF-伪-被要求的数据表演导致了MLK3和它的下游的目标的激活,JNK。
简介:目的研究放疗增强DC疫苗治疗小鼠肾癌的作用机理。方法Renca肾癌细胞制作BALB/c小鼠皮下移植瘤模型,分别用单纯放疗、单纯DC和DC瘤内注射联合放疗等方法治疗,第28天牺牲小鼠。体外培养2×10^6Renca肾癌细胞,经20GyX射线单次照射培养24h后,收获细胞。提取细胞和肿瘤组织蛋白,免疫组化和免疫印迹法检测治疗后肿瘤组织中TNF-α、CD3、CD11和F4/80蛋白的表达水平。结果DC瘤内注射联合放疗有效抑制肾癌细胞在BALB/c小鼠体内生长,局部放疗明显增加了肿瘤组织内TNF-α表达水平,体外培养的Renca肾癌细胞经放射线处理后TNF-α表达明显上调。结论放射线能够促进肿瘤细胞分泌TNF-α,瘤内注射DC联合放疗的增效作用与肿瘤局部产生的TNF-α表达上调密切相关。
简介:目的:探究桔梗皂苷对烟雾致矽肺患者血清白介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:选取我院呼吸科2012年6月到2013年6月收治的68例男性矽肺患者,并将其随机分为2组。对照组34例,给于矽肺宁片4片/次,3次/d,口服;氨茶碱片0.1g/次,3次/d,口服;必漱平片16mg/次,3次/d,口服;舒喘灵片4.8mg/次,3次/d,口服;疗程24周。实验组34例,在常规治疗的基础上应用加用桔梗皂苷胶囊10g/次,3次/d,口服;疗程24周。治疗结束后,检测和比较治疗前后两组患者SaO2、PaO2、PaCO2、血清IL-8和TNF-α的变化情况。结果:治疗后,两组患者的SaO2、PaO2、PaCO2水平均得到改善,实验组以上指标较改善更为显著,差异具有统计学意义(P〈0.05)。治疗后,两组患者的IL-8和TNF-α水平均较治疗前显著下降,且实验组IL-8和TNF-α水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:桔梗皂苷辅助治疗能够显著改善烟雾致矽肺患者的呼吸功能,降低血清IL-8和TNF-α含量。
简介:目的:观察卡介苗(BCG)单独作用膀胱肿瘤细胞、正常膀胱移行上皮细胞及其代谢产物作用上述细胞后细胞生长情况及各自细胞培养液上清液中细胞因子(TNF-α、IL-10、IFN-γ)浓度的变化,探讨其在卡介苗治疗膀胱肿瘤中可能的作用机制。方法:构建大鼠膀胱肿瘤模型,并原代培养大鼠膀胱肿瘤细胞及正常膀胱移行上皮细胞。分别用BCG,普通培养液和细胞培养的代谢产物作用上述细胞。酶联接免疫吸附剂测定法(ELISA法)检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)的浓度。结果:ELISA法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-10的浓度改变有显著差异,而IFN-γ的浓度无显著差异。结论:BCG可以直接刺激肿瘤细胞自身分泌细胞因子(TNF-α、IL-10)参与调节抑制肿瘤细胞的生长。更多还原
简介:目的:通过对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ表达水平的检测,探讨它们在UC发生发展过程中的作用。方法采用灌服大黄水煎液+肌肉注射氢化可的松并结合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)+乙醇灌肠建立脾肾阳虚型UC动物模型。将60只大鼠随机分为空白组、脾肾阳虚型UC模型7、14d及21d组,采用酶联免疫法检测各组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ的含量。结果与空白组比较,脾肾阳虚型UC模型组大鼠血清及结肠组织中IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ含量明显升高(P<0.05);尤以模型21d组最为明显。结论促炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α及IFN-γ在脾肾阳虚型UC发病过程中起重要作用。