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  • 简介:摘要目的探究LncRNA PVT1靶向调控Sg1基因在肾细胞癌侵袭和凋亡的机制,以期为临床上肾癌的治疗提供新的靶点。方法选择2015年12月至2018年12月本院收治的58例肾细胞癌患者为研究对象,术中收集患者的肿瘤组织和癌旁组织。利用GEO数据库中肾癌组织中LncRNAs数据,通过高通量数据分析肾癌组织中LncRNAs的差异性表达,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾癌组织中LncRNA PVT1的相对表达量。通过siRNA干扰技术以及基因过表达技术构建LncRNA PVT1的沉默载体和过表达载体,通过慢病毒转染人肾癌细胞系ACHN细胞,根据是否转染慢病毒以及慢病毒载体的类型,将ACHN细胞分成空白对照组、siRNA沉默组和siRNA过表达组。利用RT-qPCR和Western blot法检测Bcl-2、Bad、Bax和Caspase-3的表达水平。利用Transwell试剂盒检测细胞的侵袭,利用AV-PI试剂盒检测细胞的凋亡。以裸鼠为研究对象,进行种植瘤研究。结果肿瘤组织中LncRNA PVT1的表达量明显升高(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的mRNA表达量要明显低于空白对照组和过表达组(P<0.05);siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的mRNA表达量要明显高于空白对照组和过表达组(P<0.05)。Western blot结果显示,siRNA沉默组的LncRNA PVT1、Sg1和促凋亡基因Bad、Bax和Caspase-3的蛋白表达量要明显低于空白对照组和过表达组(P<0.05);siRNA沉默组的抑凋亡基因Bcl-2的蛋白表达量要明显高于空白对照组和过表达组(P<0.05)。Transwell结果显示,siRNA沉默组细胞的侵袭能力要明显高于空白对照组和过表达组(P<0.05);过表达组细胞的侵袭能力要明显低于空白对照组(P<0.05);AV-PI试剂盒检测结果显示,siRNA沉默组细胞的凋亡率要明显低于空白对照组和过表达组(P<0.05);过表达组细胞的凋亡率要明显高于空白对照组(P<0.05)。siRNA沉默组裸鼠移植瘤的直径明显大于空白对照组和过表达组(P<0.05);过表达组裸鼠移植瘤的直径要小于空白对照组和siRNA沉默组(P<0.05)。结论LncRNA PVT1通过靶向调控Sg1基因调控肾细胞癌的侵袭和凋亡。

  • 标签: 肾肿瘤 RNA Sg1 细胞凋亡
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  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)对脑胶质瘤中葡萄糖转运体3(GLUT3)表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法(1)下载中国脑胶质瘤基因组图谱数据库中mRNAseq_325数据集,应用R语言分析222例原发性脑胶质瘤样本中PVT1与GLUT3基因表达的相关性以及二者对患者总生存期的影响。(2)收集海南医学院第一附属医院神经外科自2019年1月至2019年12月手术切除并经病理证实的8例低级别胶质瘤标本(低级别胶质瘤组)及7例胶质母细胞瘤标本(胶质母细胞瘤组),采用荧光原位杂交法检测PVT1的表达,免疫组化染色检测GLUT3蛋白的表达。(3)体外培养人星形胶质细胞NHA及胶质母细胞瘤细胞U87、LN229和U251(NHA组、U87组、LN229组、U251组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中PVT1、GLUT3 mRNA的表达,采用Western blotting实验检测GLUT3蛋白的表达。将U87、LN229细胞分别分为PVT1过表达质粒组与空白质粒组、PVT1短发夹RNA(shRNA)组与阴性对照shRNA组,分别构建慢病毒稳定转染过表达PVT1及其空白对照细胞系、敲低PVT1及其阴性对照细胞系,应用RT-qPCR和Western blotting实验检测各组细胞系中GLUT3 mRNA和蛋白的表达。(4)取PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞,分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。(5)将10只BALB/C-nu雌性裸鼠按随机数字表法分为实验组与对照组(n=5),分别移植PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87细胞以构建皮下移植瘤模型。移植4周后处死取瘤,称重及测量体积,并采用免疫组化染色检测肿瘤中Ki-67、GLUT3蛋白的表达。结果(1)mRNAseq_325数据集中222例原发性脑胶质瘤样本的PVT1与GLUT3基因表达呈正相关关系(r=0.514,P=0.000);与PVT1低表达组相比,PVT1高表达组的总生存期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);与GLUT3低表达组相比,GLUT3高表达组的总生存期明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与低级别胶质瘤组标本相比,胶质母细胞瘤组标本中PVT1、GLUT3蛋白的表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)与NHA组细胞相比,U87、LN229、U251组细胞中PVT1、GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白质粒组相比,PVT1过表达质粒组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与阴性对照shRNA组相比,PVT1 shRNA组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞相比,PVT1 shRNA组U87、LN229细胞的吸光度值、集落形成数和侵袭细胞数均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)与对照组裸鼠相比,实验组裸鼠的皮下移植瘤的体积明显减小、质量明显降低、Ki-67和GLUT3蛋白的表达也明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调PVT1可降低GLUT3的表达,从而抑制脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力。

  • 标签: 神经胶质瘤 浆细胞瘤变异易位1 葡萄糖转运蛋白3
  • 简介:摘要目的探讨氯胺酮通过调节LncRNA PVT1/MYC轴对乳腺癌(breast cancer,BC)细胞干性维持的影响。方法采用不同浓度的氯胺酮(0、5、10或20 μg/ml)处理BC细胞系MCF-7,或以20 μg/ml氯胺酮处理MCF-7细胞不同时间(0、24、48或72 h)。此外,干预MCF-7细胞中的METTL3、PVT1和MYC的表达并且将MCF-7细胞分组。采用球体形成实验检测细胞球体形成的数量。Western blot检测各组细胞干细胞特性相关分子(OCT4和SOX2)的表达水平。采用qRT-PCR法检测PVT1/MYC在各组细胞中的表达水平。MeR-IP分析用于检测PVT1的m6A甲基化水平。结果氯胺酮以剂量和时间依赖性方式显著减少BC细胞球体形成数目,抑制OCT4和SOX2的蛋白表达水平(均P<0.05)。氯胺酮通过调节METTL3介导PVT1的m6A水平,与氯胺酮+pcDNA3.1组相比(207±11),氯胺酮+PVT1组(311±15)细胞的球体形成数目明显增加(t=12.06, P<0.001),OCT4和SOX2蛋白表达水平升高(t=9.68, P<0.001; t=11.50, P<0.001)。MYC是PVT1的下游调节基因,与氯胺酮+PVT1+si-NC组相比,氯胺酮+PVT1+si-MYC组细胞的球体形成数目明显减少(t=0.54,P=0.005),OCT4和SOX2蛋白表达水平降低(t=5.98,P=0.004;t=7.33,P=0.002)。结论氯胺酮通过抑制PVT1的m6A水平介导PVT1及其下游基因MYC的表达,进而抑制BC细胞干细胞样特征。

  • 标签: 乳腺癌 N6-甲基腺苷 LncRNA PVT1 MYC 氯胺酮 干性
  • 简介:摘要:太阳能PVT热泵技术是一种新型的绿色能源技术,能够将太阳能转化为电能和热能。本文针对太阳能PVT热泵技术在供热领域的应用展开了分析研究。文章首先介绍了PVT热泵技术的原理,然后对其在供热领域的系统形式与经济性进行了探讨,分析了该技术的优越性和可行性,并对其在未来的推广和应用进行了展望。最终,本文得出了太阳能PVT热泵技术具有广阔的市场前景和发展空间,值得进一步研究和推广应用。

  • 标签: 太阳能,PVT,热泵,供热
  • 简介:摘要:居民分布式光伏发电,一般是安装在居民建筑屋顶的光伏发电项目,采用“自发自用、余量上网”模式,具有靠近用户、输电成本低、对电网影响小、选址灵活、应用范围广等一系列优势,是我国着力推广的未来电力生产方式之一。在“双碳”目标下,结合居民实际需求,将太阳能热电联用技术(PV/T系统)应用于居民分布式光伏发电项目,是居民分布式光伏发电的另一种创新与尝试。

  • 标签: “双碳”目标 分布式光伏发电 PV/T系统
  • 简介:摘要目的分析原发性肝癌切除术后门静脉血栓形成(PVT)的预防和护理措施。方法选择2017年12月到2019年5月在本院治疗的44例原发性肝癌切除术患者。将其按照治疗方法的不同随机分为观察组22例采用综合护理,对照组22例,采用常规护理,对两组的治疗满意度进行对比。结果两组在护理后均有一定预防,观察组的护理满意度明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过综合护理,可有效预防原发性肝癌切除术后门静脉血栓的形成,提高患者生活质量,值得临床推广。

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  • 简介:你知道不莱梅吗?噢——它是一个美丽快乐的地方。不莱梅在哪儿呢?噢——有梦想的地方就有不莱梅。没错儿,不莱梅这个地方,早就存在于“很久很久以前”的童话里了……

  • 标签: 小学 阅读教学 《1+1+1+1=?》 张蕾
  • 简介:1名学生+1位教师=1所学校。这个特殊的场景,出现在重庆綦江区赶水镇太公山村小。学校唯一的学生叫谭陆森,而陪伴教导他的是老教师令狐克洪。太公山村小的生源逐年减少,学生陆陆续续转到镇上就读,只剩下谭陆森一人。谭家四世同堂,家庭负担颇重,小陆森为了能与祖母互相照顾,不方便转校下山就读。于是,令狐克洪向学校申请:"让我在太公山站好最后一班岗,照顾好最后一名学生。"

  • 标签: 陆森 家庭负担 重庆綦江 打乒乓球 课外辅导
  • 简介:世间有一种最甜美的呼唤,那就是妈妈;世间有一种最伟大的爱,那就是母爱。那个特殊的夜晚,我读懂了那份母爱,也证明了11=1这个让我疑惑很久的式子。

  • 标签: 《1+1=1》 中学生 语文学习 作文
  • 简介:“我们人类总是不满足的。小孩生下来,刚刚学会爬,就不满足,就想学走,刚刚学会走,就又想学跑了。”大鼻子教授一上课,就说了这样一段话,“但人们还是不满足,于是,发明了——”

  • 标签: 《1+1=?》 儿童文学 童话 李白坚
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  • 简介:=?●魏鹏程前不久,县国税局召开征管改革现场会。两位老所长看完我们所税负核定清册后,问我们:“你们月初核定的税款,当月能如数收上来吗?”我们回答:“能”。两位老所长不信的摇摇头,并笑着说:“在农村收税,要想=2,哪是不可能”。听了老所长的...

  • 标签: 税收征管改革 所长 国税局 农村 前不久 税款
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  • 简介:近日,多家媒体报道,加多宝集团出品的王老吉红色罐状饮料出现断货,究其原因,商家们给出了出乎人们意外的答案:王老吉向地震灾区捐款1亿元人民币,创下国内单笔最高捐款额度。这一善举,让消费者看到了一个负责任企业的形象,短时间里得到市场更多关注和追捧,品牌价值不断提升。

  • 标签: 媒体报道 地震灾区 品牌价值 王老吉 人民币 负责任
  • 简介:清明小长假,作业不多,爸爸也难得从部队回家休假。晚饭后,一家人去广场散步。我快乐得像只小鸟,一手牵着爸爸,一手拉着妈妈,边走边唱。突然,爸爸说:“我出一个题目.11=1.你们相信吗?就是某种事物加某种事物等于一种新的事物,我们三个人来比一比,看谁说得多。”

  • 标签: 小长假 事物 回家