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Expression and semi-quantification of hepatitis B virus reverse transcriptase protein in a prokaryotic system

作者： CHAO ZHAO YONG XIANG WANG ZHENG HONG YUAN YU MEI WEN
学科：医药卫生 > 基础医学
创建时间：2006-03-13
出处：《中华微生物学和免疫学：英文版》 2006年第3期

简介：Thereversetranscriptase(RT)proteinofhepatitisBvirus(HBV)hasbeensuccessfullyexpressedbyrecombinanttechnologyinEschericahiacoli(E.coli).Inthisstudyweaimedtodevelopasemi-quantitativeassayforthestudyofHBVRTproteinusingthissystem.CompleteHBVpolymerasegenefromawildtypevirus(rt306P)andthepolymerasegenefromamutant,withrt306Psubstitutedbyserine(rtP306S)wereseparatelyfusedtothemaltosebindingprotein(MBP)geneandexpressedinE.colirespectively.TheexpressionlevelsofHBVpolymerasegenesfromthewildtypevirusanditscounterpartmutantatrt306werecompared.Whentheseproteinsweresemi-quantifiedbyWesternblottingusingrabbitanti-TPserum,thertP306SmutantshoweddecreasedexpressionofMBP-HBVpolymerase.Bythismethod,wehaveshownthattheexpressionlevelofHBVRTcouldbeaffectedbysubstitutionsinitsaminoacidsequences,andthismethodcouldbeusedtostudythecharacteristicsofHBVRTprotein.
标签：乙型肝炎病毒逆转录酶蛋白真核系统基因表达半定量分析

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