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  • 作者: 薛敏 任新军 柯屹峰 刘巨平 范小娥 李筱荣
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2021-06-25
  • 出处:《中华实验眼科杂志》 2021年第06期
  • 机构:天津医科大学眼科医院 天津医科大学眼视光学院 天津医科大学眼科研究所 天津市视网膜功能与疾病重点实验室 天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心 300384 薛敏现在安徽省第二人民医院眼科,合肥 230041,天津医科大学眼科医院 天津医科大学眼视光学院 天津医科大学眼科研究所 天津市视网膜功能与疾病重点实验室 天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心 300384
  • 简介:摘要目的采用定量蛋白组学技术分析高度近视患者房水中的蛋白。方法纳入2019年1—8月在天津医科大学眼科医院于白内障手术中用1 ml注射器采集伴或不伴高度近视的年龄相关性白内障患者房水标本各34例34眼(每例100 μl),分别作为高度近视白内障组和单纯白内障组。各组分别选取16例16眼房水标本,采用BCA法进行蛋白定量并比较,采用非标液相色谱串联质谱分析得到2个组的差异表达蛋白。进一步将生物大数据用基因本体功能富集和京都基因与基因组百科全书通路富集分析差异表达蛋白的功能和信号转导通路。各组分别选取18例18眼房水标本采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行质检测结果的扩大样本量验证。结果高度近视白内障组房水标本平均蛋白量浓度为(1 134.91±104.78)ng/L,明显高于单纯白内障组的(706.71±85.43)ng/L,差异有统计学意义(t=11.977,P<0.01)。2个组患者房水标本中共鉴定出463个可定量蛋白,其中86个差异表达蛋白,包括49个表达上调蛋白和37个表达下调蛋白。这些差异表达蛋白的分类主要包括蛋白结合活性调节因子、细胞外基质蛋白、载体蛋白、细胞间信号分子、蛋白修饰酶等,分别占32.70%、14.50%、9.10%、9.10%和7.30%。生物信息学分析表明,86个差异表达蛋白主要富集在补体激活及其调节、急性炎症反应、细胞外基质组织重塑等生物学过程。其中21个差异表达蛋白富集于补体和凝血级联通路,15个差异表达蛋白富集于细胞外基质-受体相互作用通路,8个差异表达蛋白富集于PI3K-Akt信号通路。ELISA结果表明,随机选取的3个差异表达蛋白在2个组之间表达变化趋势均与非标定量蛋白组学分析结果一致。结论高度近视白内障与单纯白内障之间房水蛋白表达有显著变化,高度近视与炎症和免疫相互作用以及细胞外基质的重塑密切相关。

  • 标签: 高度近视 非标记 蛋白质组学 房水 病理机制
  • 作者: 薛敏 柯屹峰 任新军 刘巨平 范小娥 李筱荣
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-12-27
  • 出处:《中华眼底病杂志》 2020年第12期
  • 机构:天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所 天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心 300384(现在安徽省第二人民医院眼科,合肥 230041),天津医科大学眼科医院、眼视光学院、眼科研究所 天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心 300384
  • 简介:摘要目的观察病理性近视(PM)患者房水标本中蛋白表达的变化。方法横断面研究。2019年1~8月在天津医科大学眼科医院收集32例老年性白内障患者的房水样本进行质检测。其中,男性11例,女性21例;年龄58~76岁,平均年龄(68.41±6.09)岁。将合并PM的16例作为PM组,不合并近视的16例作为对照组。所有患者在白内障手术操作之前从手术眼收集100~150 μl前房水。采用蛋白定量非标液相色谱串联质谱分析,得到差异表达蛋白。随机选取5个差异蛋白进行ELISA验证。然后用基因注释功能富集、京都基因和基因组百科全书通路富集等生物信息学分析方法分析差异表达蛋白的功能。结果两组房水标本中共鉴定出583个可定量蛋白,其中101个蛋白存在差异表达,包括63个上调蛋白和38个下调蛋白。ELISA验证结果显示,5个差异表达蛋白在PM组和对照组之间的表达变化趋势均与非标定量蛋白组学分析结果相一致。这些差异表达蛋白的分类主要包括蛋白结合活性调节因子、防御/免疫蛋白蛋白修饰酶、代谢物间转换酶、细胞外基质蛋白等。生物信息学分析表明,PM与炎症和免疫相互作用以及细胞外基质的重塑密切相关。结论PM患者房水标本中蛋白表达较对照组有明显变化,这些差异变化提示PM与炎症和免疫相互作用以及细胞外基质的重塑密切相关。

  • 标签: 近视,退行性 眼房水 蛋白质组学
  • 简介:目的:利用液相色谱串联质非标定量技术,研究里氏木霉中磷酸化蛋白在不同培养条件下的表达差异,以期获得与纤维素酶表达调控相关的磷酸化蛋白。方法:分别在阻遏条件、诱导条件和中性条件下培养里氏木霉,提取胞内总蛋白,进行酶切和非标定量分析。结果:对比诱导条件与阻遏条件、诱导条件与中性条件、阻遏条件与中性条件下培养的里氏木霉的胞内蛋白表达量差异,分别发现差异蛋白90、61和90个。根据其功能,可将这些差异蛋白归为四类,即锌指蛋白、ATP结合蛋白、具有N-乙酰化转移酶活性的蛋白以及具有氧化还原酶活性的蛋白。它们主要参与糖酵解、蛋白合成、DNA修复以及转录调节过程。结论:发现的这些差异蛋白为研究调控纤维素酶的表达调控提供了新的线索。

  • 标签: 里氏木霉 磷酸化蛋白组学 液相色谱串联质谱 非标记定量 纤维素酶
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:摘要目的通过非标蛋白组学技术研究肺腺癌中蛋白表达。方法选取北京大学人民医院5例未经治疗的肺腺癌患者,提取肿瘤组织和配对癌旁组织的总蛋白,通过高效液相色谱-质联用技术进行质谱分析。质原始数据使用Maxquant软件进行查库和非标定量分析。Maxquant所得的查库文件使用Perseus软件进行分析。肺腺癌肿瘤组织与配对癌旁组织进行配对t检验,筛选出差异表达蛋白后并对差异蛋白进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果通过数据库比对获得11 295条多肽,分别对应于908个蛋白,其中312个蛋白在肺腺癌中存在显著差异表达,110个蛋白表达上调,212个蛋白表达下调。肺癌中上调倍数最高的为铁蛋白,下调倍数最高的为COL6A3。GO分析提示肺腺癌中差异表达的蛋白主要富集的分子功能为RNA binding。KEGG通路分析也证实剪接体通路在差异表达蛋白中显著富集。结论通过非标蛋白组学技术发现312个在肺腺癌中显著差异表达的蛋白

  • 标签: 肺腺癌 非标记蛋白质组 差异表达蛋白 RNA结合
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:传统的蛋白定量策略主要是通过双向凝胶电泳来进行相对定量.由于该方法不能对相对分子质量极高或极低、等电点极酸或极碱和含量低的蛋白以及膜蛋白等进行有效分离和检测,所以已不能适应目前蛋白组研究深入发展的需要.近年来,定量蛋白组学的发展主要是以同位素亲和标签试剂为代表的、以质检测为核心的稳定同位素化学标记方法.稳定同位素化学标记结合质技术,使定量蛋白组的分析更趋简单、准确和快速,具有良好的发展前景.本文对稳定同位素化学标记结合质技术在定量蛋白组学中的研究进展进行了评述.

  • 标签: 稳定同位素 化学标记方法 定量蛋白质组学 生物质谱
  • 简介:蛋白定量检测的生物化学方法是现代定量测定蛋白领域中最为常用的方法。本文对目前常用的蛋白定量方法的局限性,包括各自的检测限、灵敏度、易受的影响因素和常见的干扰物,以及如何正确选择合适的蛋白定量方法和标准品作一综述。

  • 标签: 蛋白质 定量方法 合理应用 生物化学方法
  • 简介:摘要正常人尿液中含有微量的蛋白,每天排出量在150mg以下,其中以白蛋白占多数,随不同病种有一定量的球蛋白和其它蛋白。随着肾病科研工作的开展,以观察患者每天排出蛋白的量以示病情的变化,因此尿液蛋白定量在临床上有实际应用价值,已成为医院化验室常规的检验项目。

  • 标签: 尿液 蛋白质 检测
  • 简介:2018年10月的《乳品科学杂志》上发表的一项小型研究表明,早餐摄入额外的蛋白有助于控制饥饿感。该研究将32名健康成年人分为两组,一组吃两份高碳水化合物的早餐麦片,另一组喝一杯牛奶(含12.4g蛋白)或一杯由牛奶和全脂牛奶浓缩成蛋白或乳清蛋白粉(含28g蛋白)。研究人员先测量他们的空腹血糖,两到三个小时后,再次测试他们的餐后血糖。

  • 标签: 蛋白质
  • 简介:建立了^18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白相对定量分析。对影响蛋白标记稳定性的实验条件进行了比较和优化。结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH5.0的kHPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃^18O标记反应16h,绝大部分肽段即可达到100%的标记效率。对多个^16O/^18O成对肽段蜂强度的动态范围及定量准确度进行了考察。

  • 标签: 蛋白质组 同位素标记 优化 相对定量分析 KH2PO4 稳定同位素
  • 简介:摘要目的探讨脑脊液糖和蛋白的尿液分析仪测定和化学定量法的差异。方法用尿液分析仪和常规的化学定量法同时测定临床送检的65例脑脊液标本的糖和蛋白。结果尿液分析仪测定脑脊液糖和蛋白结果与常规化学定量法存在较大的差异。结论尿液分析仪的糖和蛋白试纸只能用于尿液的过筛性试验,不能代替临床脑脊液的常规分析,否则会造成临床误诊。

  • 标签: 测定 蛋白质 血清总蛋白(TP)
  • 简介:蛋白是一切生命的物质基础,是肌体细胞的重要组成部分,也是人体组织更新和修补的主要原料。没有蛋白就没有生命。人体内蛋白时时刻刻都处于“动态平衡”之中,机体消耗的蛋白全部由食物补充。食物中的蛋白经过消化、分解成氨基酸后,才能被吸收进入血液、肝脏中,再经一系列复杂的生化反应,最终合成人体所需的各种蛋白

  • 标签: 蛋白质 物质基础 人体组织 生化反应 体细胞 氨基酸
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:摘要背景TKI目前已广泛用于EGFR突变型非小细胞肺癌肺癌患者。肿瘤样本可利用性和肿瘤本身的一致性仍是医生选择目标人群的难点。本研究通过使用MALDI-TOF质技术分析NSCLC患者服用TKI治疗前后血清蛋白变化,旨在探讨可能用于预测TKI治疗后出现耐药的血清多肽。方法收集49例晚期NSCLC患者接受TKI治疗前后自身配对的血清样本98份,即服用TKI治疗前及疗效评价为进展后所采集的外周血血清。所有入选患者共分为2组good组PFS>6个月;poor组PFS≤1个月。所有的患者对TKI治疗的最佳总疗效为疾病稳定或部分缓解。所有样本用弱阳离子微珠进行预分离后,在BrukerAutoflexTM基质辅助激光解析离子化-时间飞行质谱仪(MALDI-TOF-MS)上进行血清蛋白检测。以ClinProTools(Version2.1)软件进行数据采集分析。结果分析整体49例样本治疗前后组自身配对差异多肽,两组数据用统计学软件得出有统计学意义(p<0.01)的差异多肽峰16个。在good组的24例样本中,治疗前后组自身配对聚类分析得出两组数据交叉确认值94.44%,区别率95.45%均为最高。两组数据用统计学软件得出有统计学意义(p<0.01)的差异多肽峰20个。Poor组的25例样本治疗前后组自身配对聚类分析得出两组数据交差验证值68.10%,识别率87.87%。后使用统计学软件未找到两组m/z在1,000Da-10,000Da范围内表达的有统计学意义的差异多肽峰。结论本研究发现在PFS>6个月的good组中,治疗前后血清蛋白峰信号强度变化有统计学显著差异。在20个有明显统计学意义(p<0.01)的多肽峰,其代表的蛋白分子很可能与NSCLC患者产生TKI耐药或疾病进展相关。而PFS≤1个月的poor组,治疗前后血清蛋白峰信号强度变化并无统计学差异。但鉴于本研究的病例数有限,需要进一步扩大样本量验证并检测分析并探索这些差异蛋白的具体名称及具体的分子机制。

  • 标签: 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 非小细胞肺癌 表皮生长因子-酪氨酸激酶抑制剂
  • 简介:口腔癌在亚洲地区属于高发生率的癌症疾病,而口腔鳞状上皮癌又是其中最主要的癌症类型。临床上针对此癌症之治疗还是以手术为主。对于口腔鳞状上皮癌发生机制的研究有助于临床上新疗法的开发。以蛋白二度空间电泳分析方式找出癌细胞的异常表现蛋白,并以之作为标的进行细胞实验,以确认该异常蛋白的表现与口腔鳞状上皮癌发生之相关性。

  • 标签: 口腔鳞状上皮癌 标记蛋白质 蛋白质体学 效能 癌症类型 以手术为主
  • 简介:摘要:蛋白是人类细胞中最主要的组成成分之一,而人类许多生命活动都离不开蛋白。目前已有的研究结果显示,人体所需的蛋白约占总能源的18%。蛋白是一类具有生物活性的大分子。目前,乳制品中的蛋白的含量是衡量乳制品品质的主要因素之一。针对这一现状,重点对乳制品中蛋白的常规测定以及蛋白含量的测定进行了分析。

  • 标签: 蛋白质 检测方法 乳制品 蛋白质含量测定
  • 简介:上期提到了供能营养素,蛋白是其中之一。“蛋白”一词来源于希腊文的proteios,意为“头等重要”。蛋白是构成机体组织、器官的重要成分,也是涮节生命活动的多种活性物质的重要成分,还是人体能量的来源之一。因而可以说:蛋白是生命的物质基础,没有蛋白就没有生命。

  • 标签: 生命活动 蛋白质 机体组织 活性物质 人体能量 物质基础